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海南黄灯笼椒与不同品种辣椒的辣椒素含量测定



全 文 :收稿日期:2011 - 12 - 17
作者简介:李海龙(1978 -) ,男,河南杞县人,实验师,硕士,主要从事热带药用植物的研究与开发工作。E - mail:lhl78lhl@
126. com
* 通讯作者:谭银丰(1983 -) ,男,湖南衡阳人,实验师,硕士,从事热带药用植物开发研究,Tel:0898 - 66895337,E - mail:
secondmessenger@ 163. com。
doi:10. 3969 / j. issn. 1006 - 9690. 2012. 04. 009
海南黄灯笼椒与不同品种辣椒的辣椒素含量测定
李海龙,张俊清,赖伟勇,符乃光,谭银丰*
(海南医学院药学院,海南省热带药用植物研究开发重点实验室,海南 海口 571101)
摘 要 目的:建立 HPLC法测定海南黄灯笼椒等辣椒的辣椒素含量。方法:采用 Diamonsil C18柱(4. 6 mm × 250
mm,5 μm) ,流动相为甲醇 -水(体积比 70∶ 30) ,流速为 1. 0 mL /min,检测波长为 230 nm,柱温:30℃,外标法定量。
结果:辣椒素的线性关系良好,线性范围 2. 0 μg /mL ~ 20. 0 μg /mL,r = 0. 9990;精密度、稳定性实验的 RSD 均低于
2%;平均回收率 100. 8%(n = 9) ,RSD = 1. 87%。对海南黄灯笼椒等 7 个品种辣椒的辣椒素含量进行测定,海南黄
灯笼椒的辣椒素含量最高。结论:该方法简便快捷,可用于辣椒中辣椒素含量的测定;海南黄灯笼椒辣椒素含量最
高,这些信息可为海南黄灯笼辣椒的研究开发提供参考。
关键词 黄灯笼辣椒;高效液相色谱法;辣椒素
中图分类号:S641 文献标识码:A 文章编号:1006 - 9690(2012)04 - 0032 - 03
Determination of Capsaicin in Huangdenglong Pepper and
Different Variety of Capsicum
Li Hailong,Zhang Junqing,Lai Weiyong,Fu Naiguang,Tan Yinfeng
(Key Laboratory of R&D on Tropical Medicinal Plants,College of Pharmacy,Hainan Medical University,
Haikou 571101,China)
Abstract Objective:To develop an HPLC method for the determination of capsaicin in Huangdenglong
pepper and different variety of Capsicum. Methods:Diamonsil C18(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)was used
at 30℃ with the mobil phase of methonal - water(70∶ 30). The flow rate was set at 1. 0mL /min and the
detection wavelength was 230nm. Results:The linear range from 2. 0 to 20. 0 μg·mL -1 with coefficient
correlation of 0. 9990,RSDs of precision and stability test were lower than 2% . The average recoveries
was 100. 8% with RSD of 1. 87% . Capsaicin in 7 different varieties of capsicum were determined,the
one that contains maximum capsicin is Huangdenglong pepper. Conclusion:The method is quick,simple
and repeatable for determination of capsicine content in capsicum. The one that contains maximum capsi-
cin is Huangdenglong pepper. These results provide us the useful information for supporting the research
and development of Huangdenglong pepper.
Key words Huangdenglong pepper;HPLC;Capsaicin
黄灯笼椒(Capsicum chinense Jacquin)为茄科辣
椒属多年生草本植物,起源于南美亚马逊流域,成熟
果实亮黄色,又叫黄帝椒;其味极辣并有奇香,营养
丰富,是海南特有的地方珍稀辣椒品种,在海南有着
悠久的栽培和食用历史。黄灯笼椒气味芳香,能增
加人的食欲,开发出的黄灯笼辣椒酱也是目前海南
最热销的旅游产品之一,是海南最具开发潜力得特
色农作物之一[1,2]。由于黄灯笼辣椒的栽培技术要
求较高,其抗病毒病和疫病的能力较差,使得黄灯笼
椒的种植面积、产量和品质都明显减少,海南黄灯笼
辣椒的产业发展受到了很大影响[2,3]。黄灯笼辣椒
中的辣味成分也主要是辣椒素类物质,辣椒素类物
质不仅镇痛止痒、调节食欲及抗炎消肿,还在医药工
业里具有广泛应用,在食品添加剂和生物农药等方
面也具有广阔的开发前景,因此,高含量辣椒素的辣
椒品种也具有较高的附加值[4]。国内有关黄灯笼
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第 31 卷第 4 期
2012 年 8 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Resources
Vol. 31 No. 4
Aug. 2012
椒的研究,也只有很少量报道,关于海南黄灯笼椒辣
椒素含量方面的还未见报道。本文将进行海南黄灯
笼椒辣椒素含量测定,并与海南红米椒、海南朝天椒
等一些特有辣椒品种的辣椒素含量进行比较,为海
南黄灯笼辣椒的综合开发利用提供依据,也为海南
黄灯笼辣椒更好的进行质量控制提供参考。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Waters515 液相色谱系统(Waters 515
泵,2996PDA检测器) ,美国 Pall公司 Cascade Ⅸ超
纯水器,SK5200LHC 型超声波清洗器(上海科导超
声仪器有限公司)。
1. 2 试药 海南黄灯笼辣椒、海南米辣椒样品分别
购买于海口、陵水及万宁菜市场的新鲜辣椒,海南杂
交种黄灯笼椒购于海口市老城农科院种植基地的新
鲜辣椒;四川辣椒和贵州辣椒样品购买于海口菜市
场;辣椒素对照品(中国药品生物制品检定所)、甲
醇(色谱纯)、95%乙醇(分析纯) ,超纯水。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18柱(4. 6 mm × 250 mm,5
μm) ;流动相:甲醇 -水(体积比 70∶ 30) ;流速:1. 0
mL /min;UV检测波长为 230 nm;柱温:30℃;进样
量:20 μL;此条件下,样品中辣椒素峰与杂质峰分离
度良好,见图 1、2。
图 1 辣椒素对照品 HPLC图谱
图 2 海南黄灯笼椒 HPLC图谱
2. 2 对照品溶液的制备
取辣椒素对照品,加甲醇制成 1 mg /mL 的溶
液,作为对照品储备溶液。精密量取 1 mL对照品储
备溶液于 10 mL容量瓶中,加甲醇定容,即得浓度为
0. 1 mg /mL的对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备
将洗净后的辣椒去梗后,于 50℃干燥 6 h,粉
碎,过 60 目筛,置于干燥器中保存备用。称取辣椒
粉约 2. 0 g,置于碘量瓶中,再加入精密量取的 70%
乙醇溶液 100 mL,称重,超声处理 60 min 后,冷却,
称重后,用 70%乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,即
得供试品溶液。
2. 4 线性关系考察
取 2. 2 对照品溶液,精密量取 0. 2,0. 4,0. 8,
1. 2,1. 6,2. 0 mL,加甲醇定容至 10 mL,按上述色谱
条件,重复进样 2 次,测定辣椒素峰面积,以峰面积
平均值和辣椒素浓度进行回归处理,得回归方程:Y
= 15077X + 36677,r = 0. 9990。结果表明,辣椒素在
2. 0 μg /mL ~ 20. 0 μg /mL范围内呈线性关系。
2. 5 精密度实验
取 2. 2 对照品溶液,连续进样 6 次,测定辣椒素
峰面积,RSD =0. 66%。表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性实验
取海南黄灯笼椒粉末,按 2. 3 项下的方法制备
供试品溶液,分别于 0、4、8、16、24、48 h 各进样 1
次,测定辣椒素峰面积,RSD = 1. 3%。表明供试品
溶液在 48 h之内稳定。
2. 7 重复性实验
取海南黄灯笼椒粉末 6 份,按 2. 3 项下的方法
制备 供 试 品 溶 液,测 定 辣 椒 素 平 均 含 量 为
0. 7344%,,RSD = 1. 7%。表明本法有良好的重复
性。
2. 8 加样回收实验
取海南黄灯笼椒粉末约 1 g,精密称定,按 2. 3
项下的方法制备供试品溶液,测定其辣椒素浓度。
而后精密量取 9 份供试品溶液 1 mL 分置于标号 1
~9 号的 10 mL容量瓶中,精密加入 1. 0 mL对照品
溶液于 1 ~ 3 号容量瓶,精密加入 1. 5 mL对照品溶
表 1 辣椒素加样回收率试验测定结果(n = 9)
序号
样品含
量 /mg
加对照
品量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1 0. 1502 0. 100 0. 2507 100. 5
2 0. 1502 0. 100 0. 2525 102. 3
3 0. 1502 0. 100 0. 2515 101. 3
4 0. 1502 0. 150 0. 3047 103
5 0. 1502 0. 150 0. 3034 102. 1 100. 8 1. 87
6 0. 1502 0. 150 0. 3044 102. 8
7 0. 1502 0. 200 0. 3469 98. 35
8 0. 1502 0. 200 0. 3451 97. 45
9 0. 1502 0. 200 0. 3494 99. 60
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第 4 期 李海龙,等:海南黄灯笼椒与不同品种的辣椒素含量测定
液于 4 ~ 6 号容量瓶,精密加入 2. 0 mL对照品溶液
于 7 ~ 9 号容量瓶。按上述色谱条件测定,计算回收
率。结果见表 1。
2. 9 样品的测定结果
取各种辣椒样品,分别按 2. 3 项下的方法制备
供试品溶液。按上述色谱条件,用外标法以峰面积
计算,测定个辣椒样品中辣椒素的含量。结果见表
2。
表 2 不同品种、不同产地辣椒辣椒素含量测定结果
序号 1 2 3 4 5 6 7
品种
海口市售
黄灯笼椒
万宁产
黄灯笼椒
杂交种
黄灯笼椒
海南
小红米椒
海南
朝天椒
贵州
辣椒
四川
辣椒
辣椒素含
量 /(mg /g)
8. 37 5. 35 2. 31 2. 59 1. 17 0. 63 0. 51
3 讨 论
辣椒素在高温下不稳定,选取合适的辣椒素提
取方法非常必要。综合分析文献报道[5 - 7]的辣椒素
的提取制备方面信息,本文选用以 70%乙醇做溶
剂,超声处理 60 min的超声辅助法对辣椒素进行提
取,避免高温处理的损失。按此方法提取制备的供
试品溶液,其辣椒素峰的峰型好,与相邻色谱峰也有
良好的分离度,杂质峰也少。
本文选用甲醇 -水(70 ∶ 30)做流动相的 HPLC
法对辣椒素含量进行测定,该法分离效果好、出峰时
间适中,其稳定性、重现性及精密度都很好,其平均
回收率 100. 8%(n = 9) ,这些说明本方法在辣椒的
处理过程中辣椒素损失少,适合辣椒中辣椒素含量
的测定,并且流动相组成简单。
从测定的辣椒样品结果(表 2)可看到,海南黄
灯笼辣椒辣椒素含量高达 8. 37 mg /g,比文献报
道[8]的口感极辣的四川野山椒的 8. 02 mg /g 还高。
海口市售黄灯椒椒的辣椒素含量最高,海南小红米
椒及朝天椒次之,四川辣椒、贵州辣椒等较少。同
时,海口市售黄灯笼椒的辣椒素含量是海南小红米
椒的 3 倍多,是贵州辣椒和四川辣椒的 13 倍多。海
口市售黄灯笼椒也比万宁产和杂交种黄灯笼椒的辣
椒素含量高的多。不同品种、不同产地辣椒的辣椒
素含量变化幅度很大,存在着广泛的遗传和变异。
以上这些说明辣椒中辣椒素含量的高低与辣椒品
种、种植环境密切有关。海南黄灯笼辣椒这一地方
特有的珍稀辣椒品种口感极辣、风味独特,具有很高
的综合开发价值。有关海南黄灯笼辣椒的不同成熟
期的辣椒素含量变化,辣椒果实不同部位的辣椒素
含量等内容也具有重要的意义,并有待于进一步的
研究。
参考文献
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中 国 野 生 植 物 资 源 第 31 卷