全 文 ：采用大孔吸附树脂对癫葡萄酶解物进行脱盐 ’
袁晓晴’ , 顾小红 “ , 汤 坚 2 , 叶 靖 `
1( 浙江工商大学食品与生物工程学院 ,浙江 杭州 , 31 OO35) 2( 江南大学食品科学与技术国家重点实验室 ,江苏 无锡 , 214 1 22 )
摘 要 通过测定 7 种树脂对嫩蔺萄蛋 白晦解物的吸附率和解吸率 , 选择 D A 201 一C 型大孔 吸附树脂对瘫有萄
阵解物进行脱盆 。 结果表明 ,在阵解物以 60 m g / m L 、 。 . 5 BV / h 流速上样 ,采用 75 % 乙醉解吸 的条件下 ,晦解物
的脱盐率为 92 . 4 9 % , 回收率为 7 8 . 3 8写 ,醉解物 中蛋 白的含 t 从脱盐前的 76 . 67 %提高至脱盆后的 85 . 6 9肠 。
脱盆后的阵解物仍有显著的降血糖作用 , 且 降血籍作用 较脱盐前稍有提商 .
关扭词 嫩荀萄 , 啤解物 ,大孔 吸附树脂 ,脱盆
瘩葡萄 (M dm o r d i e a : h a ar n t i a L . V a r . a b b er v i -
a t a S e r
.
) 是葫芦科苦瓜属 ( M dm o r d i c a . 。 h a ar n t i a
L
.
) 的一个栽培种 , 其果实成纺锤状 , 果面呈不规则
尖刺状 , 长约 4 c m , 宽约 3 c m ,果重 25 ~ 30 9 ,未成
熟果实呈浅绿色 ,成熟后为金黄色 。 疲葡萄中蛋 白含
量较高 ,是一种潜在的植物 蛋白资源 。 近年来 , 利用
酶水解动植物蛋白制备蛋白水解物的研究与开发已
成为生产高附加值生物产品的一个热点〔`一习 。 因此 ,
考虑通过酶解瘩葡萄蛋白制备具有降血糖活性的酶
解物 。 但在瘩葡萄蛋 白质的酶水解过程中采用 p H
一 s t at 方法控制水解度 , 不 断滴加 N a O H 溶液来维
持反应所需 p H 值 ,会导致酶解产物的盐含量大大提
高 。 水解物中过多的盐含量给产品纯化或后继分析
带来麻烦 , 影响产品的风味 , 而且危害人体健康 。 所
以 ,需要对瘩葡萄酶解物进行脱盐处理 。
目前生物活性物质的脱盐方法主要有透析 、超滤
和纳滤等 ,但它们对小分子物质脱盐效果不佳 [’j 。 此
外 ,脱盐可以在特殊的脱盐柱中进行 , 使用脱盐柱高
效但柱子价格 昂贵 ,从而提高了脱盐的成本 。 吸附色
谱法是最有可能对小分子有机物质进行脱盐的方法 ,
它是根据溶质在吸附剂表面上 的吸附强度不 同而对
溶质进行分离 。 其中大孔吸附树脂对 多肤具有选择
性吸附 ,用乙醉等有机溶剂洗脱也较为方便 。 目前 ,
有不少大孔树脂化蛋白酶解物和多肤的实验报道 ,如
夏树华 sj[ 等利用大孔树脂离提纯螺蜘腹 足肌酶解产
物 ; 焦连庆等6j[ 利用 D 4 0 2 0 大孔树脂 纯化红参须 中
的多肤 ;钟芳等图通过大孔吸附树脂对大豆肤进行脱
盐 ;赵利等 sj[ 利用大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肤的脱
盐效果 。
1 材料与方法
1
.
1 材 料
瘩葡萄鲜果 : 无锡富仁生物科技有限公司提供 ;
碱性蛋 白酶 A lca las e 2 . 4 L ( 2 . 4 A U / g ) :诺维信酶制
剂公司 ; 四氧 啥吮 ( A lfo xa )n : S ig m a 公 司 ; 昆明种 小
鼠 : 雄性 ,体重 18 一 2 9 , 购于上海斯莱克实验动物
有限公司 ; 格列本脉片 : 天 津太平洋 制药有 限公 司 ;
D A 20 1 系列 吸 附大孔树脂 : 江 阴市有 机 化 工 厂 ;
D 3 5 2 0
、
D 4 0 0 6
、
A E S
、
5 8 大孔吸附树脂 : 南开大学化
工厂 刃 种大孔吸附树脂的物理结构参数见表 1 。 试
剂 : 本试验所用试剂均为分析纯级 。
衰 1 几种大孔吸附树街的物理结构参数
树脂型号
D A ZO I
一
A
D A 2 0 1
一
B
D A 2 0 1
一
C
A E S
D 3 5 2 0
IM 0 0 6
S 8
粒度 / m m
0
.
4 ~ 1
.
2 5
0
.
4 ~ 1
.
2 5
0
。
4 ~ 1
.
2 5
0
。
3~ 1
.
2 5
0
。
3~ 1
.
2 5
0
.
3~ 1
。
2 5
0
.
3~ 1
.
2 5
比表面积 / m Z · g 一 l 平均孔径 / n m 孔容积 / m L · g 一 ’ 外观 极性
4 5 0 ~ 5 0 0
5 5 0 ~ 6 0 0
0 0 0 ~ 1 3 0 0
4 8 0 ~ 5 2 0
4 8 0 ~ 5 2 0
4 0 0 ~ 4 4 0
10 0 ~ 12 0
9 ~ 1 0
s e g
3~ 4
1 3 ~ 1 4
8
。
5 ~ 9
。
0
6
.
5 ~ 7
.
5
2 8 ~ 3 0
1
.
1 ~ l
。
2
1
.
1 ~ 1
.
2
1
.
0 ~ 1
。
l
0
.
7 3~ 0
.
7 7
2
。
l ~ 2
.
1 5
0
.
7 3 ~ 0
.
7 7
0
.
7 8 ~ 0
.
8 2
乳白色
乳白色
红综色
乳白色
乳白色
乳白色
乳白色
非极性
非极性
非极性
非极性
非极性
非极性
极性
第一作者 : 博士 ,讲师 。
. 无拐市产学研合作项 目 ( D Y OS。。 1 2 )
收稿日期 : 20 0 8一 0 1一 1 6
1
.
2 主要仪器
罗 氏 血糖 监 测 仪 : R o e h e D i a g n o s t i e s G m b H
2以犯 年绝 34 . 绝 6 期 (总绝 246 期 )l 5 7
DOI : 10. 13995 /j . cnki . 11 -1802 /ts . 2008. 06. 018
D D Sl l C电导率仪 :上海雷磁仪器 厂; S HZ 一8 台式
水浴恒温振荡器; 江苏太仓市实验设备厂; H仆 3紫
外检测仪 :上海青浦沪西仪器 厂; L H一l S恒流泵 :上
海青浦 沪西仪器厂; B SZ 一 1 0自动部份收集器 :上海
青浦沪西仪器厂 ,玻璃层析柱 2 . 6 X 30 。 m : 上海锦
华层析设备厂 。
1
.
3 实验方法
1
.
3
.
1 瘩菊萄水溶性蛋白及其醉解物的制备
m (瘩菊萄鲜果 ) : m [磷酸盐缓冲液 ( 0 . 05 m ol /
L
, p H 7 )〕 = 1 , 2 ~ 匀装~ 4 0 0C 提取 4 h ~ 4 0 0 0
r / m i n 离心 3 0 m i n ~ 取上 清液 ~ 调 p H 至 4 . 0 ~
4℃ 冰箱静 ! Z h ~ 4 0 0 0 r /m i n 离心 3 0 m i n ~ 沉
1
.
3
.
5 大孔吸附树脂静态解析试验
选择水和不同浓度的乙醇作为洗脱剂 , 对已吸附
酶解物的树脂进行解吸 ,计算解吸率 ( % s)[ 〕 :
解吸率 /% ~
解吸液蛋白浓度 X 解吸液体积
(原液蛋 白浓度 X 解吸液蛋 白浓度 ) X 吸 附液体积
1 0 0
淀 ~
1
.
3
.
2
去离子水洗 3 次 ~ 冷冻干燥 一 瘩菊萄蛋 白
瘫菊萄踌解物的制备
将雍葡萄蛋 白酶解物配成质量浓度为 5 %的水
溶液 ,并调至 p H g , 57 ℃ 超级恒温水浴溶解 30 m in ,
加人 2 . 4写 A l e a l a s e 2 . 4 L ( w / w , E / S ) , 5 7℃ 下水解
至水解度 1 2% , 沸水浴灭 酶 1 0 m i n , 3 s o o r / m i n 离
心 30 m in ,取上清液 , 经真空浓缩后干燥制得粉末状
酶解产物 。
1
.
3
.
3 大孔吸附树脂的预处理
将一定量 的树脂先用无水 乙醇浸泡 24 h , 然后
用无水 乙醉洗至 2 20 n m 处无吸收峰 ,再用去离子水
洗净后备用 ,用于静态吸附试验的树脂 在 70 ℃ 真空
干燥备用 。
1
.
3
.
4 大孔吸附树脂静态吸附试脸
在选定的实验条件下对各种大孔吸附树脂分别
进行静态吸附实验 , 即用锥形瓶在恒温振荡水浴上进
行 , 使树脂与料液充分接触 ,达到平衡后分析吸附前
后溶液中样品的含量 。 在 2 50 m L 具塞锥形 瓶中加
人 2 9 处理好的干树脂 ,用无水 乙醇充分溶胀 , 用去
离子水洗净乙醇 。 加人 10 0 m L 10 m g / m L 的酶解
物溶液 ,用塞子塞好 ,将该锥形瓶放人 25 ℃水浴恒温
振荡器中振荡 24 h ,振荡速度为 18 0 次 / m in 。 振荡
结束后 , 滤纸过滤 , 将树脂与溶液分离 ,测定溶液中的
蛋白含量 。 按下式计算树脂 的吸附率 ( % )和吸附量
( m g / g ) [
,〕 。
吸附率 /% - 原液蛋白浓度 X 吸附液蛋 白浓度原液蛋白浓度
X 1 0 0
吸附童 ( m g / g ) =
(原液蛋 白浓度一吸附液蛋 白浓度 ) X 溶液体积
干树脂质黄
1
.
3
.
6 D A 20 1
一
C 大孔树脂动态吸附试脸
1
.
3
.
6
.
1 不同流速对 D A 2 01 一 C 大孔树脂吸附性 能
的影响
用 2 . 6 X 3 0 c m 的层析柱装满 D A 2 0 1一 C 大孔树
脂 ,在室温条件下 , 浓度为 10 m g / m L 的酶解物分别
以 0 . 5 B V (柱床体积 ) / h 、 1 BV / h 和 2 B V / h 流速经
过层析柱 , 用紫外检 测器检测流出液 的 A 2 2。 . , 以
A 2
。 。 一 0 . 0 5 为透过点 , 比较不同流速 时酶解物的
穿透体积 。
1
.
3
.
6
.
2 不同酶解物浓度对 D A ZO I一 C 大孔树脂 吸
附性能的影响
用 2 . 6 X 3 0 c m 的层析柱装满 D A 2 0 1一 C 大孔树
脂 ,在室温条件下 , 浓度为 10 、 30 和 60 m g / m L 的酶
解物分别以 0 . 5 B V / h 流速经过层析柱 ,用紫外检测
器检测流出液的 A 2 2。 . , 以 A 2 2。 , 一 0 . 05 为透过点 ,
比较不同浓度酶解物溶液的穿透体积 。
1
.
3
.
7 D A 20 1
一
C 大孔吸 附树脂的动 态解吸和脱盐
用 2 . 6 X 3 0 c m 的层析柱装满 D A Zo l 一 C 大孔树
脂 , 在室温条件 下 , 浓度 为 60 m g / m L 的酶解 物 以
0
.
5 B V / h 流速经过层析柱 , 用紫外检测器检测流 出
液的 A 2 2。 二 , 以 A 2 。 , 一 0 . 05 为透过点 。 先以同样
的流速用去离子水洗涤层析柱 ,收集水洗脱液 , 每 10
m L 收集 1 管 , 测定水洗液的电导率 , 当水洗液电导
率与水一致时 ,用 75 %乙醇以 0 . 5 B V / h 流速经过层
析柱 。 收集洗脱峰 , 浓缩蒸 去乙醇 , 冷冻干燥得脱盐
的酶解物 。
1
.
3
.
8 四氧啥吮糖尿病小蔑模型的建立
小鼠适应性喂养 4 d 后禁食 (不禁水 ) 18 h ,然后
腹腔注射四氧啥吮 20 m g / k g (临用前配成 1% 四氧
啥吮溶液户。〕 , l w 后通过尾静脉取血测量血糖值 , 选
血糖值在 12 ~ 25 m m ol / L 的糖尿病小 鼠 ,作为四氧
啥陡型糖尿病小 鼠模型 。
1
.
3
.
9 水提物对四 氧喻吮型糖尿病小 鼠血糖的影响
糖尿病小鼠禁食 12 h 后 , 随机分成 5 组 ,每组 12
只 。 空白对 照组 和模 型对 照组灌胃给予 生理盐水 。
给药组分别灌胃给予脱盐前后 的翻葡萄蛋白酶解物
58
}一
和阳性对照药优降糖 。 用 血糖监测仪分别测量给药
前 、给药后 2 和 4h后的血糖值 。
. 1. 1 30 成分分析
肚含量: Low r- yFn l i o法; 灰分含量: 马弗炉灰化
法 。
1
.
3
.
n 统计方 法
数据用 王士 5. D. 表示 ,使用学生 氏 一 t 检验 (两
尾 )计算显著性 。 P 值小于 0 . 05 认为是统计学显著 。
2 结果与讨论
2
.
1 大孔吸附树脂的筛选
不 同树脂对酶解物的吸附性能见表 2 。 从表 2
可知 , D A Zo l 一 C 树脂对酶解物的吸附性能较好 , 吸附
率达到 80 . 2 % , 其他树脂对 酶解物 的吸 附率均 在
6 5 %以下 。
衰 2 不同大孔吸附树脂对醉解物的吸附和解吸性能
过小 , 吸附时间就会延长 。 确定最佳的吸附流速常应
综合考虑树脂的吸附效果和工作效率 。 不同吸附流
速 D A ZO I 一 C 大孔吸附树脂对酶解物的穿透曲线见图
l
, 随着上样流速 由 0 . 5 B V / h 提高到 2 B V / h , 穿透
曲线斜率增大 ,说明吸附速度增大 ,穿透点明显提前 ,
流出液的穿透点通液量减小 了 36 % , 因而将酶解物
的吸附流速确定为 0 . 5 B V / h 。
,一月卜- 0 . 5 BV 山
- . 一 1 B V 爪
门
, 含 - Z BV币
门才6ù汀4介J210住仓以.0
0 印 lm l阴 万们
仍积 /m L
吸附率 /% 吸附最 /m g · g一 ’ 解吸率 /%
层析柱 : 2 . 6 X 3 0 e m ,上样浓度 : 1 0 m g / m L
图 1 不同流速时酶解物的穿透曲线
2
.
2
.
2 酶解物浓度时 D A ZO I一 C 大孔树脂吸 附性能
的影响
吸附量与被吸附物质浓度的关系符合 F er n id hc
和 A n g m u r 经典吸附式 ,即吸附量随被吸附物质浓度
提高而增大 ,但不能超过大孔吸附树脂的吸附容量 。
D A 2 0 1
一
C 大孔吸附树脂对不同浓度酶解物的穿透曲
线见图 2 , 随着上样浓度的提高 , 穿透曲线斜率增大 ,
流出液的穿透点通液量逐渐减小 ,树脂 吸附达到饱和
的时间亦随之缩短 。 从表 3 亦可看出 ,树脂的动态吸
附量会随酶解物的上样浓度提高而增大 , 因而选择上
样浓度为 60 m g / m L 。
O以几J口Qùnj`任,d,ó,目曰ōb弓乙口比n`
.…0.h只ù护连勺ó亡JO.b0丹I幽,口月了月口目ó衬渡ō,JCg口1二口ù托门O尸0工JU. .1.…1曰d压0内10乃`ōb月才UQOJōló,曰ù叹,口`O目,ù月09óq心曰U勺JXéné,99翻O`几匕内jo甘.…R,JùUn七Q甘1连人亡J一匕门O月b哎口
树脂
D A 2 0 1
一
A
D A 2 0 1
一
B
D A 2 0 1
一
C
A E S
D 3 5 2 0
D 4 0 0 6
S 8
D A 20 1
一
C 大孔吸 附树脂的吸附性能最好 , 比较
树脂的物理结构参数 ,发现它的比表面积最大 (1 0 0
~ 1 3 0 m
,
/ g )
,这可 能是影响树脂吸附效果的重要
因素 。 邓劲光 lz[ 〕认为 , 大孔 吸附树脂 的 比表面积决
定了吸附剂的饱和吸附量 ,而其它物理结构特性对树
脂的吸附效果影响不大 。
大孔吸附树脂分离生物活性物质是基 于吸附的
可逆性 。 因此 ,不仅要求树脂吸附量 大 , 且解 吸率也
要高 , 以保证最大 限度 回收被分离成分 。 本研究用
7 0% 乙醇作为洗脱剂 , 对 已吸附的酶解物进行解吸 。
从静态吸附与解 吸的效果来看 , D A Z o l 一 C 大孔 吸附
树脂不仅具有较高的吸附率和较大的吸附量 ,而且具
有较高的解吸率 ,故选择该树脂对酶解物进行脱盐 。
2
.
2 D A 2 0 1一C 大孔吸 附树 脂对酶解物 的动态 吸附
和解吸
2
.
2
.
1 不 同流速对 D A 20 1一 C 大孔树 脂吸附性 能的
影响
对于同一浓度的上样溶液 ,若吸附流速过大 ,被
吸附物质来不及扩散 到树脂 的内表面就提早 泄露 而
造成样品流失 ,树脂的吸附量就会下降 ;但吸附流速
尸今一 m m创川山
- 心卜 - 刃 m岁mI J
-吞- 团 m gl lnL
03025似忧1
O 印 . 0 1阴 2刃
体积 1 n 1L
层析柱 : 2 . 6 X 30 e m ; 上样流速 : 0 . S B V
图 2 不同浓度酶解物的穿透曲线
表 3 不同吸附流速对醉解物的穿通点通液 t
酶解物浓度
/m g
·
m L一 1
穿透点通液 l 穿透点动态吸附 t
/m g
·
g 一 l
4
.
1 8
8
.
9 6
1 1
.
6 4
n00
1CO自t)
一 ls
2
.
2
.
3D A2 01
一
C 大孔吸附树脂的动态解吸和脱盐 吸率见表 4 。 解吸率随乙醉浓度的提高而增大 ,水的
通常要求解吸剂能使大孔吸附树脂溶胀 , 以减弱 解吸 率 仅 为 8 . 52 % , 75 % 乙 醇 的解 吸 率 达 到
被吸附物质和吸附树脂之间的吸附力 ; 同时被吸附物 82 . 34 % ,但 95 % 乙醉的解吸率反而有所下降 , 这可
质在解吸剂中的溶解性能也应 良好 。 本研究选用水 、 能是雍葡萄蛋 白酶解物在 95 %乙醉中溶解性不好所
15 %
、
3 5%
、
5 %
、
75 %
、
95 %的 乙醉对已吸附的酶解 致 ,所以动态解 吸选用 75 %乙醉为解吸剂 。
物的树脂进行了 24 h 的静态解吸 , 不同解 吸剂的解
裹 4 不同解吸荆对蕊解物的解吸效果
解吸剂 水 15 % 乙醉 35 % 乙醉 5 %乙醉 75 %乙醉 95 % 乙醉
解吸率 /% 8 . 5 2 3 1 . 2 2 69 . 2 8 7 3 . 5 2 8 2 . 3 4 75 . 6 6
酶解物在以 60 m g / m L 、 0 . 5 B V / h 流速上样后 ,
用去离子水 以 1 BV / h 的解吸流速洗涤层析柱 , 因无
机盐在水中的溶解度大 ,所 以无机盐很快被溶剂前沿
排出 。 当电导率降至与去离子水相当时 , 用 75 % 乙
醉以 9 0 m L / h 的流速流经层析柱 , 收集洗脱峰 , 真空
浓缩去乙醉 ,冷冻干燥 即得脱盐的酶解物 。
2
.
2
.
4 D A 2 0 1
一
C 大孔吸 附树 脂对酶 解物 的脱 盆效
果
大孔吸附树脂处理前后酶解物的主要成分见表
5
。 从表 5 可知 , 大孔树脂脱盐后灰分含量大大下降 ,
脱盐率达 92 . 49 % . 酶解物中蛋 白的含量从脱盐前
的 76 . 67 %提高至脱盐后的 85 . 69 % ;酶解物的回收
率为 78 . 38 % 。 因此 , 采用 D A 201 一C 大孔 吸附树脂
可以有效地去除酶解物中的无机盐 。
裹 S 脱盐前后醉解物的主要成分 %
成分 水分 灰分 蛋白质
脱盐前 1 0 . 1 2 4 . 66 ` 7 6 . 6 7
脱盐后 9 . 1 4 0 . 3 5 8 5 . 6 9
3 结 论
2
.
2
.
5 脱盐后睁解物的降血抬活性
由表 6 可以看出 ,脱盐前后的酶解物都有显著的
降血糖作用 ,脱盐前酶解物在给药 Z h 和 4 h 后分别
使小鼠血糖值降低 48 . 25 %和 50 . 56 % ;脱盐后酶解
物在给药 Z h 和 4 h 后分别使小 鼠血糖值降低
50
.
31 写和 53 . 57 纬 。 结果表明脱盐过程并未去除酶
解物中的降血糖活性成分 ,且脱盐后活性组分的含量
有所提高 。
裹 ` 脱盆前后水解物的降血粉作用
斑葡萄蛋白的酶解使原先埋藏在蛋 白质分子内
部的疏水性氨基酸暴露出来 l[ `〕 ,从而使酶解物可 以
从水相通过疏水相互作用吸附到树脂的疏水表面 ,并
可利用不同浓度洗脱剂的不 同极性对酶解物进行分
级纯化 ,而酶解物中的无机盐则因不能被树脂吸附 ,
在用纯水洗脱时即可去除 。 通过大孔吸附树脂对众
葡萄蛋 白酶解产物进行脱盐研究 ,得到如下结论 。
( l) 根据 7 种不同大孔吸附树脂对瘩有萄酶解物
的吸附率和解 吸率 ,选择 D A 2 0 1一 C 大孔吸附树脂对
酶解物进行脱盐 。
( 2 ) D A 2 0 1
一
C 大孔吸 附树脂动态吸附和解吸实
验表明 : 在酶解物以 60 m g / m L 、 。 . S B V / h 流速上
样 , 1 BV / h 流速水洗 , 90 m L / h 流速 75 % 乙醉解吸
条件下 ,酶解物的脱盐率和 回收率分别为 92 . 49 % 和
78
.
38 %
,脱盐后 酶解物 中蛋 白的含 t 从脱盐前的
76
.
6 7%提高至脱盐后的 85 . 69 % 。
( 3) 脱盐后 的酶解物仍有显 著的降血糖作用 ,且
降血搪效果较脱盐前稍有提高 。
今 考 文 橄
组别 荆t 血抢值 /
m m o l
·
L 一 l
熨 侧 /叱 · 吨一 , ho hZ h4
1020
空白对照组
棋型对瓜组
脱盐前醉解物
脱盐后阵解物
阳性对照组
4
.
34 士 0 . 7 3 4 . 2 5 士 0 . 59 4 . 1 3 士 0 . 38
1 5
.
71 士 3 . 1 2 16 . 0 2 士 3 . 03 15 . 32 士 2 . 9 0
1 5
.
96 士 3 . 0 7 8 . 28 土 1 . 4 61 ) 7 . 8 9 士 1 . 35 1 )
1 5
.
98 士 3 . 4 0 7. 94 士 1 . 48 1 ) ? . 4 2 士 1 . 49 2 )
1 5
.
86 士 3 . 3 9 8 . 0 7 士 1 . 56 2 ) 7 . 5 3 士 1 . 30 2 )
注 : 一 ` P < 0 . 05 ,与初始值比较有差异 . 2) P < 0 . 01 ,与初始值比较差异极
其显着 .
Y o s h ik a w a M
,
F uj i t
a H
,
M a t o b
a N
, e t a l
.
iB o a e t i
v e P e p
-
t id e s d e ir v e d f r o m f o o d p r o t e in p r e v e n t in g li fe s t y l-e r e la t e d
d is e a s e s [ J〕. iB o f a e t o r s , 20 0 0 , 1 2 : 1 4 3 ~ 14 6
DZ i
u
ba J
,
M in k i
e
w ie
z P
,
N a lce
z
.D B io l o g i
e a ll y a e t iv e
p e p t i d e 。 d e r iv e d f r o m p la n t a n d a n im a l p or t e i n : [ J〕 . P o l
F o o d N u t r i cS i
,
1 9 9 9
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S t u d y o n D e s a l t i n g o f H y d r o l y s a t e s o f 几了o m o r d i e a c h a r a n t i a L . V a r ·
A b b r e v i a t a S e r
.
P r o t e i n w i t h M a c r o P o r o u s A d s o r P t i o n R e s i n
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d e s a l t
(上接第 56 页 )
C o n d i t i o n a l I n v e s t i g a t i o n o f A s P e r g i l l u s n i g e r P r o d u c i n g T a n n a s e
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2以犯 年绝 34 卷第 6 期 (总绝 246 期 )