全 文 ：第 33 卷第 4 期
2014 年 8 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Ｒesources
Vol． 33 No． 4
Aug． 2014
收稿日期:2014 － 01 － 20
基金项目:本项目获山东中医药大学 2013 年 SＲT资助。
作者简介:程丹丹，山东中医药大学 2012 级中药学研究生。
* 通讯作者:高德民，博士，副教授，研究方向:中药资源与质量控制。
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2014． 04． 008
有柄石韦中绿原酸的提取工艺优化
程丹丹，辛晓伟，高德民*
(山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)
摘 要 通过单因素和正交试验，以绿原酸提取率为指标，对有柄石韦中绿原酸提取的工艺参数进行优化，为有柄
石韦的深入开发利用提供基础材料。有柄石韦中绿原酸提取最佳工艺参数组合为:料液比 1∶ 13 g·mL －1，浸渍时间
50 min，超声温度 80 ℃，超声时间 20 min。以紫外 －可见分光光度法测定有柄石韦中绿原酸的提取率，方法可行，
结果稳定。
关键词 有柄石韦;绿原酸;提取率
中图分类号:Ｒ284 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2014)04 － 0028 － 02
Study on Extraction Procedure of Chlorogenic Acid from
Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching
Cheng Dandan，Xin Xiaowei，Gao Demin
(School of Pharmacy，Shandong University of TCM，Jinan 250355，China)
Abstract The extraction of chlorogenic acid from Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching was studied through
the single factor and orthogonal experiment，and this will provide a basis materials for further development
utilization． The optimum conditions were:ultrasound temperature 40 ℃，ultrasound time 20 min，extrac-
tion time 50 min，the ratio of material to water 1∶ 13 g·mL －1 ． The method is proved to be stable and fea-
sible．
Key words Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching;chlorogenic acid;extracts rate
有柄石韦［Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching］为水
龙骨科(Polypodiaceae)石韦属(Pyrrosia)植物。始
载于《神农本草经》，具有清肺泄热、利水通淋、清湿
热止血之功效。临床上用于热淋、血淋、石淋、小便
不通［1］。石韦的主要活性成分为绿原酸，a． 生育
酚、里白烯、24 － methy － lene － 9，19 － cyclolanost 、
胡萝卜苷、香草酸等［2］。绿原酸具有抗菌消炎，抗
氧化，兴奋中枢神经等作用，药典将其列为质量指标
成分。实验主要针对绿原酸的提取工艺进行研究，
为进一步开发利用及药理研究提供科学依据。
1 材料、仪器和试剂
1． 1 材料
有柄石韦(采自胶东地区 2013． 09) ，绿原酸标
准品(上海金穗生物科技有限公司 20130916)
1． 2 仪器与试剂
海菁华 754PC紫外 －可见光分光光度计、KO －
250E医用超声波清洗器、试剂均为分析纯，购自天
津富宇试剂公司。
2 方 法
2． 1 样品的制备［3］
石韦经粉碎，石油醚脱脂，分别称取 5 份，每份
50 g，按表 1 条件［3］制备，得到水提物(W) ，甲醇提
取物(M) ，50 % 甲醇提物［M(50 %) ］，60 %乙醇
提取物［E(60 %) ］，丙酮提取物(A)。再称取 9
份，按表 2 条件制备，抽滤备用。
2． 2 样品中绿原酸的测定
采用紫外光谱快速测定样品中绿原酸的含
量［4］。用紫外可见光分光光度计在 330 nm 处测定
—82—
第 4 期 程丹丹，等:有柄石韦中绿原酸的提取工艺优化
各样品中吸光度。以浓度对吸光度值做标准曲线，
所得绿原酸标准曲线及回归曲线方程为 y = 11 651x
+ 10，r = 0． 999 7。
3 结 果
3． 1 结果分析
结果显示不同的提取方法，绿原酸的提取率有
很大差异(图 1，表 2)。60 %乙醇较其它溶剂提取
率更高。其中实验号 8 条件下提取率最高，且明显
高于其它条件下的提取率。实验号 2，3，4 的得率最
低，试验号 1，5，6，9 的提取率相差不大。综合分析
可知，影响因素的大小顺序为:超声时间 ＞料液比 ＞
超声温度 ＞ 浸渍时间。最佳提取条件为:料水比
113 g·mL －1，浸渍时间 50 min，超声温度 80 ℃，超声
时间 20 min。即 A3B2C3D3。
表 1 单因素条件表
浸提溶剂 A料液比 B浸渍时间 /min
C超声时间 /
min
D超声温度 /
℃
水 1∶ 10 50 40 60
甲醇 1∶ 10 50 40 60
50%甲醇 1∶ 10 50 40 60
60%乙醇 1∶ 10 50 40 60
丙酮 1∶ 10 50 40 60
图 1 不同浸提物中绿原酸的含量
表 2 因素水平表
水平 A料液比 B浸渍时间 /min
C超声时间 /
min
D超声温度 /
℃
1 1∶ 7 40 60 40
2 1∶ 10 50 40 60
3 1∶ 13 60 20 80
表 2 正交试验设计及结果分析
试验号
因素
A B C D
吸光度
绿原酸
含量 /%
1 1 1 1 1 0． 326 2． 66
2 1 2 2 2 0． 119 0． 97
3 1 3 3 3 0． 181 1． 49
4 2 1 2 3 0． 132 1． 08
5 2 2 3 1 0． 310 2． 53
6 2 3 1 2 0． 299 2． 44
7 3 1 1 2 0． 309 2． 52
8 3 2 3 3 0． 327 2． 67
9 3 3 2 1 0． 273 2． 23
K1 5． 12 6． 26 7． 62 7． 42
K2 6． 05 6． 17 4． 28 5． 93
K3 7． 42 6． 16 6． 69 5． 24
k1 1． 71 2． 09 2． 54 2． 47
k2 2． 02 2． 06 1． 43 1． 98
k3 2． 47 2． 05 2． 23 1． 75
Ｒ 0． 76 0． 04 1． 11 0． 72
3． 2 试验验证
根据正交试验结果对 A3B2C3D3 条件进行多次
实验，以验证该工艺的合理性和稳定性，结果无显著
差异。
4 讨 论
绿原酸是有柄石韦中有效成分之一。其含量最
高，具有广泛的活性。查阅资料可知测定有柄石韦
中绿原酸的含量多采用高效液相色谱法［5］，也是药
典收载的绿原酸测定方法，但需要较长时间，更高的
费用，因此可采用紫外光谱对其含量测定，方便快
捷，节省资源。超声时间对绿原酸提取率的影响最
为明显，浸渍时间最不明显，料液比，超声温度对结
果影响相差不大，最佳的工艺条件为 A3B2C3D3。
查阅大量文献以及药典(2010 版)可知很多工
艺都是采用 50 %甲醇提取，但实验发现 60%乙醇
提取率更高，为进一步研究提供参考。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国国家药典委员会．中华人民共和国药典:一部
［S］．北京:中国医药科技出版社，2010．
［2］ 王楠，王金辉，程杰，等．有柄石韦的化学成分［J］．沈阳药科大
学学报，2003，20(6) :425 － 427．
［3］ 刘艳清，汪洪武．野菊花中绿原酸提取工艺的研究［J］．时珍国
医国药，2008，19(7) :1612 － 1613．
［4］ 邢丽红，李文龙，瞿海斌．金银花提取物中 5 种有机酸含量测
定的紫外光度法［J］．药物分析杂志，2011，31(3) :547 － 551．
［5］ 谢文湖，江丰． HPLC 法测定不同产地中药石韦的绿原酸含量
［J］．江西化工，2009(2) :67 － 69．
—92—