全 文 ：第 34 卷第 6 期
2015 年 12 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Ｒesources
Vol． 34 No． 6
Dec． 2015
收稿日期:2015 － 03 － 12
基金项目:山东中医药大学 2014 年 SＲT资助(2014376)。
作者简介:李月梅(1993—)，女，2012 级中药学本科生。
* 通讯作者:张颖颖，男，讲师，研究方向:微生物学。E － mail:zhangyy19@ aliyun． com
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2015． 06． 010
石韦中绿原酸的提取工艺优化及含量分析
李月梅1，种贝贝1，辛晓伟1，张颖颖2*
(山东中医药大学 1．药学院;2．基础医学院，山东 济南 250355)
摘 要 通过正交试验，以绿原酸提取率为指标，对石韦中绿原酸的提取工艺参数进行优化，建立石韦中绿原酸的
最佳提取方法。并在此优化条件下，对不同石韦药材中的绿原酸含量进行分析。石韦中绿原酸的乙醇提取最佳工
艺参数组合为:乙醇浓度 50%，超声时间 60 min，料液比 1∶ 12(g∶ mL)，超声温度 80 ℃。这为中药石韦的合理开发
和利用提供依据。
关键词 石韦;绿原酸;提取率;含量测定;紫外 －可见分光光度法
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2015)06 － 0037 － 03
The Process Optimization and Content Analysis of
Chlorogenic Acid from Pyrrosia lingua
Li Yuemei1，Zhong Beibei1，Xin Xiaowei1，Zhang Yingying2*
(1． School of Pharmacy;2． School of Basic Medical Science，Shandong University of Traditional Chi-
nese Medicine，Jinan 250355，China)
Abstract Through orthogonal test，the extraction yield of chlorogenic acid as index，optimizating chloro-
genic acid in Pyrrosia lingua ethanol extraction process parameters． And under optimized conditions，
analying the content of chlorogenic acid in the different Pyrrosia leaves． The optimum conditions were:
50% ethanol concentration，ultrasonic time 60 min，solid-liquid ratio 1∶ 12g /mL，ultrasonic temperature
80 ℃ ． It provides the reference for the rational development and utilization of Pyrrosia．
Key words Pyrrosia;chlorogenic acid;extraction rate;content determination;UV-Vis spectrophotom-
etry．
石韦是水龙骨科(Polypodiaceae)石韦属(Pyrro-
sia)有柄石韦、石韦和庐山石韦的干燥叶，始载于
《神农本草经》，具有清肺泄热，利尿通淋等功效，临
床上常用于治疗热淋，血淋，小便不通，淋沥涩痛
等［1］。石韦中主要有效成分是绿原酸，具有抑菌、
抗氧化、抗肿瘤，降血压，保肝利胆等功能，对生殖系
统，血液循环系统和消化系统均有治疗作用［2 － 3］。
绿原酸作为一种有强抗氧化能力的天然物质，目前
已被广泛应用于医药、食品、保健和日用化工等行
业，其开发利用前景良好［4］。因此本实验旨在探究
石韦中绿原酸的提取工艺，为石韦的开发研究提供
基础材料。
1 材料、仪器与试剂
1． 1 材料
石韦，有柄石韦，庐山石韦，华北石韦，中越石
韦，毡毛石韦，绿原酸标准品(批号:20140318，上海
金穗，分析纯)。石韦样品经山东中医药大学高德
民副教授鉴定。
1． 2 仪器与试剂
754PC紫外 － 可见分光光度计(上海菁海);
FXB101 － 1 加热鼓风干燥箱(上海树立);KQ －
250E型医用超声波清洗器(昆山);FA2004N 电子
天平(上海菁海);SHB － III 循环水式多用真空泵
(菏泽鑫源);DS － T250 型高速多功能粉碎机(上海
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中 国 野 生 植 物 资 源 第 34 卷
顶帅);95%乙醇;娃哈哈纯净水。
2 方 法
2． 1 标准曲线的绘制［5］
精密称取绿原酸标准品，用 EtOH 溶解，混匀。
将其配制成不同浓度的绿原酸溶液，以 70% EtOH
为参比置于 330 nm处测定吸光度，以浓度对吸光度
值做标准曲线，所得其回归方程 y = 46． 51x +
0． 042 2，Ｒ2 = 0． 998 5。
2． 2 样品中绿原酸含量的测定［6］
工艺优化:精确称取石韦粉末 90． 00g(过 40 目
筛)，平均分成 9 份，按表 1 条件提取绿原酸。
样品液的制备:将不同产地石韦的叶，叶柄及根
茎分别粉碎，过 40 目筛。精确称取各样品 1． 00 g，
按照上述工艺优化的最佳条件进行提取。
含量测定:将样品提取液稀释备用，以 50%
EtOH作空白，在 330 nm处测定各吸光度值，计算各
样品中绿原酸的含量［7］。
3 结果和分析
3． 1 工艺优化
结果显示不同的提取方法，绿原酸的提取率有
很大差异(表 1，表 2)。其中实验号 3 条件下提取
率最高，且明显高于其它条件下的提取率。实验号
5，7，8 的得率最低，试验号 1，4，6，9 的提取率相差
不大。综合分析可知，影响因素的大小顺序为:乙醇
浓度 ＞ 超声时间 ＞超声温度 ＞ 料液比。最佳提取
条件为:乙醇浓度 50%，超声时间 60 min，料液比 1∶
12，超声温度 80 ℃，即 A1B3C2D3。
表 1 因素水平表
水平 A乙醇浓度 /% B超声时间 /min C料液比 D超声温度 /℃
1 50 20 1∶ 08 40
2 60 40 1∶ 12 60
3 70 60 1∶ 16 80
表 2 正交试验设计及结果分析
实验号
因素
A B C D
吸光度
绿原酸含量 /
%
1 1 1 1 1 0． 29 2． 18
2 1 2 2 2 0． 176 2． 05
3 1 3 3 3 0． 322 2． 40
4 2 1 2 3 0． 381 2． 12
5 2 2 3 1 0． 265 2． 00
6 2 3 1 2 0． 61 2． 22
7 3 1 3 2 0． 237 1． 80
8 3 2 1 3 0． 486 1． 78
9 3 3 2 1 0． 377 2． 09
K1 6． 63 6． 10 6． 18 6． 27
K2 6． 34 5． 83 6． 26 6． 07
K3 5． 67 6． 71 6． 20 6． 30
k1 2． 21 2． 03 2． 06 2． 09
k2 2． 11 1． 94 2． 09 2． 02
k3 1． 89 2． 24 2． 07 2． 10
Ｒ 0． 32 0． 30 0． 03 0． 08
3． 2 实验验证
根据正交试验结果对 A1B3C2D3 条件进行多次
实验，以验证该工艺的合理性和稳定性，结果无显著
差异。
3． 3 绿原酸含量测定结果
结果显示，不同种石韦，同种石韦不同产地和不
同部位中绿原酸的含量均有明显差别(表 3，表 4)。
同种石韦中绿原酸在叶中的含量远远高于叶柄和根
茎。产地和品种对其含量也有一定的影响，其中云
南昆明的庐山石韦，陕西洋县的有柄石韦和广西宜
州的石韦含量较高，浙江，吉林，四川，湖北，河北，山
东相差不大。
表 3 不同石韦中不同部位的绿原酸含量
标本号
(采收时间)
样 品 产地 来源 /经纬度
绿原酸含量 /%
叶 叶柄 根茎
20142201(2014． 06) 庐山石韦 Pyrrosia sheareri 四川 亳州药城中药材 3． 28 0． 99 0． 29
20142202 (2014． 06) 庐山石韦 P． sheareri 湖北 亳州饮片厂批号 140208 4． 34 1． 73 0． 40
20142203 (2013． 05) 庐山石韦 P． sheareri 云南昆明 N25°1456″ E102°4428″ 5． 15 1． 47 0． 63
20142204(2012． 11) 有柄石韦 P． petiolosa 浙江 建联中药店 2． 30 0． 75 —
20142205(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 山东胶东 N36°4830″ E121°1845″ 1． 85 0． 83 0． 22
20142206(2012． 09) 有柄石韦 P． petiolosa 山东济南云梯山 N36°2912″ E117°1054″ 2． 00 0． 65 0． 41
20142207(2012． 11) 有柄石韦 P． petiolosa 吉林磐石长富屯山 N43°2998″ E126°0976″ 2． 39 0． 92 0． 26
20142208(2012． 08) 有柄石韦 P． petiolosa — 安徽亳州 0． 82 0． 84 0． 33
20142209(2013． 10) 有柄石韦 P． petiolosa 贵州 安徽亳州 1． 24 0． 69 0． 35
20142210(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 山东济南齐长城 N36°2330″ E116°1845″ 2． 19 0． 91 0． 40
20142211(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 陕西洋县 N33°2830″ E107°5845″ 3． 64 0． 84 0． 22
20142212(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 河北 摇扇堂中药材批号 140621 2． 64 0． 65 0． 25
20142213(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 四川成都 亳州中药饮片厂批号 140209 2． 97 0． 73 0． 15
20142214(2014． 06) 有柄石韦 P． petiolosa 云南 — 1． 61 0． 70 0． 34
20142215(2014． 07) 有柄石韦 P． petiolosa 湖北武汉 — 2． 37 0． 83 0． 22
20142216(2014． 05) 有柄石韦 P． petiolosa 江苏 亳州中药饮片批号 140208 1． 05 0． 46 0． 21
20142217(2014． 07) 有柄石韦 P． petiolosa 广西 安徽亳州批号 140710 1． 97 0． 86 0． 11
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第 6 期 李月梅，等:石韦中绿原酸的提取工艺优化及含量分析
表 4 六种石韦药材绿原酸的平均含量 %
药材
部位
庐山
石韦
有柄
石韦
石韦
中越
石韦
华北
石韦
毡毛
石韦
叶 4． 26 2． 074 1． 586 1． 08 1． 195 0． 686
叶柄 1． 40 0． 76 0． 436 — 0． 725 0． 50
根茎 0． 44 0． 248 0． 124 — 0． 195 0． 32
经重复性实验后，发现石韦中绿原酸的含量测
定结果稳定可靠。
4 讨 论
超声提取作为一种新型的提取技术，在天然产
物提取方面得到广泛应用［8］。从实验结果可知，乙
醇浓度对绿原酸提取效果影响显著，超声时间影响
次之，超声温度影响较小，料液比的影响最小。超声
的最佳提取条件是 A1B3C2D3，即料液比为 1∶ 12 的
50%的乙醇在 80 ℃条件下超声提取 60 min。在此
工艺下得到的绿原酸含量最大。由于市场上石韦混
用现象较明显，本实验为提高临床用药质量，以及对
药用石韦的开发利用提供科学依据，也为石韦进一
步研究提供基础材料。
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164 － 166．
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