全 文 ：13.52 μg/ml的标准品溶液 , 取标准品溶液分别进
样 2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 μl,标准曲线方程
为 A=5.03e+0.006Q-3.18e+003, r=0.9999,表
明阿魏酸在 0.02704 ～ 0.2704 μg范围内线性关系
良好 。
3.4　精密度　将标准品分别以 10 μl1 d内连续
进样 5次 ,峰面积的 RSD为 0.5%,表明分析方法重
复性较好 。
3.5　稳定性实验　取样品溶液在 0、2、4、10、24 h
分别进样 10 μl, 5次进样的峰面积 RSD0.9%,表明
样品在 24 h内分析是很稳定的 。
3.6　加样回收率　精密称取已知含量的粉末约 2
g三份 ,加入标准储备液 0.5、1.0、1.5 ml,按 70%乙
醇提取法提取并进行含量测定 ,计算平均加样回收
率为 99.21%、100.03%、98.65%,表明提取方法准
确可行。
3.7　样品测定　分别取对照品溶液和相应的供试
品溶液各 10μl,依照上述色谱条件测定 ,按外标法
计算阿魏酸 ,结果见表 1。
　表 1　　加味调经种玉丸中阿魏酸的测定结果(n=5)
批号 阿魏酸(mg/g) RSD(%)
01 0.081 1.5
02 0.086 1.8
03 0.083 1.4
4　讨论
4.1　关于薄层鉴别　在本次加味调经种玉丸的质
量标准研究过程中 ,参考多方资及反复实验筛选研
究 ,筛选出上述三种无干扰且重现性好的药味鉴别 ,
且提取和鉴别方法都简便有效 ,多批样品验证 ,均能
检出与对照药材相同的斑点 ,在薄层鉴别方面为本
制剂提供了比较全面准确的质量控制方法。
4.2 　关于高效液相色谱法
4.2.1　检测波长的确定:将 70%乙醇及对照品阿
魏酸溶液分别置紫外检测器中进行波长扫描。结果
说明阿魏酸在波长 313 nm处吸收稳定 ,故选定高效
液相色谱法的检测波长为 313nm。
4.2.2　流动相的选择:参考 2005年版中国药典一
部当归药材项下阿魏酸含量测定方法 〔2〕 ,本实验分
别尝试采用乙腈∶0.1%磷酸 (40∶60),甲醇∶1%冰
醋酸(40∶60),甲醇∶1%冰醋酸(50∶50),甲醇∶1%
冰醋酸(60∶40)为流动相 ,结果以甲醇∶1%冰醋酸
(40∶60, 1%冰醋酸 pH=3.6)为流动相时 ,阿魏酸
与样品中其他组分分离良好 ,色谱图峰形尖锐 ,故选
定其为流动相。
4.2.3　提取方式的确定:参照 2005年中国药典一
部当归项下的超声提取方法。分别以甲醇及不同浓
度的乙醇作为提取溶媒进行超声处理试验 ,结果
70%的乙醇毒性小且提取效果良好 。故选择 70%
的乙醇为提取溶媒。且超声 20min,已经提取完全 ,
再延长时间对结果没有显著影响 ,故确定时间为 20
min。
本研究对加味调经种玉丸中主要药味进行了定
性鉴别 ,并以当归中的阿魏酸作为定量指标对制剂
进行含量监测 ,检验方法能作到既全面可靠又具有
一定的专属性 ,可作为其质量控制标准的可靠依据 。
参 考 文 献
[ 1] 徐大江 ,李慧金 , 任红玉 .复健宁胶囊中紫河车的薄层
鉴别 .中成药 , 1996, 18(1):14.
[ 2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部 .北京:
化学工业出版社 , 2005:111, 229.
[ 3] 车晓彦 ,李毅 .伤痛宁片鉴别方法研究 .时珍国医国
药 , 2007, 18(4):921-922.
(2007-05-10收稿)
毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定的方法学验证
梁旭霞 ,徐文箭
(广东省惠州九惠药业有限公司 ,广东惠州 516007)
　　摘要　目的:对毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定方法进行验证。方法:考察毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定
的色谱条件 、供试品溶液的制备 、空白干扰试验 、线性 、精密度 、稳定性试验 、准确度 、样品测定等内容。结论:经过
对该制剂原儿茶醛含量测定的方法学验证 , 显示该方法操作简单 ,稳定性 、重现性好 ,可用于本制剂的质量控制。
关键词　毛冬青胶囊;原儿茶醛;测定方法
中图分类号:R286.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)10-1324-02
·1324· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 10期 2007年 10月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.10.043
　　毛冬青胶囊为卫生部药品标准中药成方制剂第
七册(标准编号:WS3 -B-1290-93)药品 。该品是从中
药毛冬青中提取的黄酮类化合物制成的制剂 ,属于
心血管疾病用药 ,有扩张血管及抗菌消炎作用。主
要用于冠状动脉硬化性心脏病 、血栓闭塞性脉管炎 ,
并也可用于中心性视网膜炎 、小儿肺炎 。
为了进一步完善产品的质量标准 ,含量测定项
下增加原儿茶醛的测定 。笔者对毛冬青胶囊中原儿
茶醛的含量测定方法进行验证 ,报道如下。
1　仪器与试剂
1.1　仪器 　岛津 LC-10 Avp型 HPLC仪(SPD-10
A型检测器 , LC-10 AT型输液泵 , N2000双通道色
谱工作站), BP-211 D型电子天平 。
1.2　样品及试剂　原儿茶醛对照品(中国药品生
物检定所),毛冬青胶囊(惠州九惠制药厂生产),甲
醇为色谱纯 ,乙醇 、乙醚为分析纯。
2　方法
2.1　条件　用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;
甲醇 -1%醋酸溶液(8∶92)为流动相;检测波长为
312 nm。理论板数按原儿茶醛(C7H6O3)峰计算应
不低于 4000。
2.2　对照品贮备液的制备　精密称取原儿茶醛 40
mg,置 500ml量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇
匀 ,即得。
2.3　对照品溶液的制备　精密量取贮备液 1 ml,
置 10 ml量瓶中 ,加流动相稀释至刻度 ,摇匀 ,作为
对照品溶液 ,即得(每 1 ml溶液中含原儿茶醛 8
μg)。
2.4　供试品溶液的制备 　取本品 10粒 ,除去胶
囊 ,精密称定 ,研细 ,取 0.5 g,精密称定 ,精密加入甲
醇 50 ml,称定重量 ,超声处理 45 min,放冷 ,再称定
重量 ,用甲醇补充减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,精密量取
续滤液 25 ml,置 85℃水浴蒸干 ,残渣用水 10 ml分
次转移至分液漏斗中 ,用醋酸乙酯振摇提取 4次
(10、5、5、5 ml),合并醋酸乙酯提取液 , 85℃水浴蒸
干 ,残渣加甲醇适量使溶解 ,转移至 10 ml量瓶中并
稀释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得 。
2.5　测定法　分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液各 10 μl,注入液相色谱仪 ,测定 ,即得 。
3　方法与结果
3.1　线性关系考察　精密量取上述对照品贮备液
1、2、3、5、10、15ml,分别置 50ml量瓶中用流动相稀
释至刻度 ,摇匀 ,按上述色谱条件测定。以原儿茶醛
对照品峰面积为纵坐标 ,以进样的原儿茶醛对照品
溶液浓度为横坐标进行回归分析 ,得回归方程为 Y
=6320.9X-1502.7, r=0.9999,实验表明 ,原儿茶
醛进样浓度在 1.6 ～ 24.0 μg范围内线性关系良好。
3.2 　精密度试验　精密吸取对照品溶液 (8 μg/
ml),连续注入色谱柱 6次 , 结果平均峰面积为
65566, RSD为 0.81%。
3.3 　稳定性试验　取 1批毛冬青胶囊 ,按供试品
溶液制备方法制备 ,分别于配制后 0、1、2、4、8 h依
法测定 ,结果表明 ,供试品溶液在 8 h内基本稳定 ,
结果平均峰面积为 68828, RSD为 0.74%。
3.4 　重复性试验　平行取 6份同一批号的毛冬青
胶囊 ,按供试品溶液制备方法制备 ,按上述色谱条件
依法测定 ,计算含量 ,结果平均含量为 76.4 μg/粒 ,
RSD为 0.67%。
3.5 　加样回收率试验　精密称取适量的毛冬青胶
囊内容物 6份 ,分别精密加入 2ml的对照品溶液(8
μg/ml),按供试品溶液制备方法制备 ,按上述色谱
条件依法测定 , 计算含量 , 结果平均回收率为
97.3%, RSD为 1.79%。
3.6 　样品含量测定　取 3批毛冬青胶囊 ,按供试
品溶液制备方法制备 ,按上述色谱条件依法测定 ,计
算含量 ,结果见表 1。
　表 1 　样品中原儿茶醛总量测定结果
样品批号 测得总量(μg/粒) 平均总量(μg/粒) RSD(%)
1
77.0
76.9
75.6
75.4
76.3 1.10
2
67.6
67.3
68.2
68.0
67.8 0.59
3
71.1
70.9
71.8
71.5
71.3 0.56
4 　讨论
经过对毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定的色谱
条件 、供试品溶液的制备(提取溶剂选择 、提取方法
选择)、线性 、精密度 (重复性 、重现性)、稳定性试
验 、准确度 、样品测定一系列测定方法的验证 ,显示
该方法操作简单 ,稳定性 、重现性好 ,是控制本制剂
质量的有效方法 。
(2007-01-17收稿)
·1325·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 10期 2007年 10月