全 文 ：糖所致衰老小鼠血清 AchE及脑 SOD活性 , 降低血清 LPO和脑
MDA含量 , 并且效果随药物剂量的增加而明显。结果见表 3 ～ 4。
表 2　补肾抗衰方对 D-半乳糖致衰老小鼠
学习记忆能力的影响( x±s)
组别 学习潜伏期 错误次数
记忆
潜伏期 错误次数
a 7.10±0.74 1.20±0.63 167.30±4.92 0.50±0.53
b 14.40±1.35■ 4.80±0.63■ 74.60±4.06■ 2.10±0.57■
c 13.00±1.25＊ 4.10±0.74＊ 126.10±4.56＊ 1.80±0.63d 9.40±1.58＊ 1.80±0.63＊ 156.30±4.97＊ 1.00±0.47＊e 6.80±0.63＊ 1.70±0.67＊ 167.60±5.08＊ 0.60±0.52＊f 7.80±0.92＊ 1.90±0.74＊ 162.20±5.07＊ 1.10±0.57＊
　　与正常组比较 , ■P<0.01;与衰老模型组比较 , ＊P<0.01
表 3　补肾抗衰方对 D-半乳糖致
衰老小鼠血清 LPO、AchE的影响( x±s)
组别 过氧化脂质 /nmol· ml-1 乙酰胆碱酯酶 /U· ml-1
a 7.89±0.23 0.81±0.04
b 10.58±0.29■ 0.54±0.03■
c 10.26±0.71＊ 0.56±0.02＊
d 8.50±0.26＊ 0.72±0.02＊
e 8.13±0.38＊ 0.80±0.02＊
f 9.12±0.18＊ 0.70±0.02＊
　　与正常组比较 , ■P<0.01;与衰老模型组比较 , ＊P<0.01
表 4　补肾抗衰方对 D-半乳糖致
衰老小鼠脑 MDA、SOD的影响( x±s)
组别 丙二醛 /nmol· ml-1 超氧化物歧化酶 /U· ml-1
a 2.86±0.09 234.80±9.08
b 4.24±0.08■ 120.10±6.61■
c 3.77±0.08＊ 151.30±9.27＊
d 3.01±0.08＊ 222.90±8.67＊
e 2.93±0.07＊ 230.30±6.41＊
f 3.10±0.08＊ 201.50±5.82＊
　　与正常组比较 , ■P<0.01;与衰老模型组比较 , ＊P<0.01
4　结论
本实验采用西洋参 、当归 、女贞子 、枸杞子 、熟地 、山药 、菟丝
子 、何首乌 、淫羊藿 、山茱萸 、补骨脂 、肉苁蓉 12种具有补肾壮阳 、
益气养阴 、强筋健骨 、补血填精的中药按一定比例配方制成了补
肾抗衰方。衰老模型组与正常组相比 , 抗应激及学习记忆能力 ,
血清 AchE及脑 SOD活性极显著下降(P<0.01), 血清 LPO、脑
MDA含量极显著上升(P<0.01), 说明造模成功。 而服用补肾
抗衰方组与衰老模型组相比:抗应激及学习记忆能力 ,血清 AchE
及脑 SOD活性极显著上升(P<0.01), 血清 LPO、脑 MDA含量
极显著下降(P<0.01)。提示补肾抗衰方可以抑制体内过氧化
物生成 , 改善自由基代谢 , 使衰老机体的各项生命体征得到改善 ,
从而起到延缓衰老的作用。
参考文献:
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收稿日期:2010-01-08;　修订日期:2010-03-15
基金项目:浙江工业大学重中之重学科开放基金(No.20060609)
作者简介:夏成才(1978-),男(汉族),安徽宣城人 ,现任泰山医学院讲师 ,
硕士学位 ,主要从事天然药物提取分离研究工作.
白屈菜总生物碱的提取工艺研究
夏成才 , 肖玉良 , 王彩云 , 周慧敏
(泰山医学院·药学院 ,山东 泰安　271000)
摘要:目的 研究白屈菜总生物碱的提取工艺 , 优化得到白屈菜总生物碱的最佳提取工艺条件。方法 以正交实验优化白
屈菜总生物碱的提取工艺条件。结果 最佳提取路线是碱化索式提取法 , 提取溶剂氯仿 , 溶剂用量 250 ml, 提取时间 3 h。
结论 该法适用白屈菜总生物碱的提取。
关键词:白屈菜;　正交实验法;　生物碱
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.12.087
中图分类号:R284　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)12-3216-02
　　白屈菜是罂粟科植物 , 全草入药 , 味苦 , 性凉 , 有毒。 该族富
含具有显著生理活性的多种异喹啉生物碱。白屈菜总生物碱的
主要成分白屈菜碱 、白屈菜红碱 、血根碱 、原阿片碱 , 它们具有很
好的生物活性。
白屈菜生物碱有明显的抗流感病毒作用 , 对五型 、十二型腺
病毒及单纯性疱疹等病毒有明显作用 [ 1 , 2];宗永立等 [ 3 ～ 5]报道它
具有抑癌作用和抗癌活性;黄金竹 [ 6]报道白屈菜地上部分提取
物和化合物对 MRSA临床分离株具有抗菌作用;2003年何志敏
等 [ 7]报道白屈菜碱具有很好的镇痛作用 , 并且镇痛机理是外周
神经性 ,镇痛机制不同于吗啡。
本实验在董晓庆等 [ 8 , 9]提取工作的基础上考察了超声波法 、
乙醇索式法 、碱化索式法提取白屈菜总生物碱 , 采用正交实验优
化得到了最佳的提取。
1　试剂与仪器
95%乙醇 , 氯仿(AR), 乙醚(AR), 36%盐酸 ,固体氢氧化钠 ,
25%氨水。索式提取器 , 超声波清洗器。
2　方法与结果
2.1　索式法乙醇提取白屈菜总生物碱 将 50 g干燥的粉碎过筛
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 12期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.12
(80目)后的白屈菜粉末装入索式提取器中 , 500 ml的单口烧瓶
中加入 95%乙醇 250 ml, 电加热套加热 , 回流 4 h, 稍冷后过滤 ,
将滤液在旋转蒸发仪上蒸除乙醇浓缩 ,所得浓缩液用 10%的 HCl
调 pH至 1,过滤除去酯溶性物质 , 再将滤液用 20%的氢氧化钠调
pH值 , 当 pH至 6 ～ 7时有大量灰绿色的固体析出 ,继续调 pH至
10后先用 50 ml×3的乙醚提取 , 将提取乙醚液浓缩干燥得
0.51 g;剩余液继续用 50 ml×3的氯仿提取 , 将提取氯仿液浓缩
干燥得 0.16 g。计算得白屈菜总生物碱提取总得率为 1.34%。
其它实验条件实验结果数据如表 1。
2.2　碱化法索式提取白屈菜总生物碱 将 50g干燥的粉碎过筛
(80目)后的白屈菜粉末装入 250ml的烧杯中 , 加入 25%的氨水
30 ml和水 50 ml将白屈菜粉末浸润 , 封好烧杯口。放置 1周时
间后将碱化的白屈菜粉末装入索式提取器中 , 500ml的单口烧瓶
中加入氯仿 300ml,电加热套加热 , 回流 4 h, 稍冷后过滤 , 将滤液
在旋转蒸发仪上蒸除氯仿浓缩 , 所得浓缩液用 10%的 HCl调 pH
至 1,过滤除去酯溶性物质 , 再将滤液用 20%的氢氧化钠调 pH
值 , 当 pH至 6 ～ 7时有大量灰绿色的固体析出 , 继续调 pH至 10
后先用 50ml×3的乙醚提取 ,将提取乙醚液浓缩干燥得 0.60 g;
剩余液继续用 50ml×3的氯仿提取 , 将提取氯仿液浓缩干燥得
0.10 g。计算得白屈菜总生物碱提取总得率为 1.40%。 其它实
验条件实验结果数据 。见表 2。
表 1　索式法乙醇提取白屈菜总生物碱
序号 乙醇浓度(%)
乙醇用量
V/ml
提取时间
t/h
提取得率
(%)
1 95 200 3 1.02
2 95 250 4 1.34
3 95 300 5 1.32
4 80 200 4 1.28
5 80 250 5 1.30
6 80 300 3 1.32
7 65 200 5 0.56
8 65 250 3 0.60
9 65 300 4 0.40
kⅠ 3.68 2.86 2.94kⅡ 3.90 3.24 3.02
kⅢ 1.56 3.04 3.18
R 2.34 0.38 0.24
表 2　碱化法索式提取白屈菜总生物碱
序号 提取溶剂 提取时间t/h
溶剂用量
V/ml
提取得率
(%)
1 氯仿 2 250 1.26
2 氯仿 3 200 1.36
3 氯仿 4 300 1.40
4 95%乙醇 2 200 0.16
5 95%乙醇 3 300 0.32
6 95%乙醇 4 250 0.26
7 甲苯 2 300 0.92
8 甲苯 3 250 1.34
9 甲苯 4 200 0.96
kⅠ 4.02 2.34 2.48kⅡ 0.74 3.02 2.86
kⅢ 3.22 2.62 2.64
R 3.28 0.68 0.38
2.3　超声波法 95%乙醇提取白屈菜总生物碱 将 50g干燥的粉
碎过筛(80目)后的白屈菜粉末装入 500 ml的单口烧瓶中加入
95%乙醇 400 ml,将烧瓶放入超声波清洗器 , 安装好回流装置 , 待
超声波清洗器水温升至 60℃时开启超声波 , 提取 5 h, 稍冷后过
滤 , 将上述实验所得到的滤液在旋转蒸发仪减压浓缩 , 所得浓缩
液约 20ml, 用 10%的盐酸溶液调节 pH值至 1, 再将得到的溶液
进行抽滤 ,除去脂溶性物质和鞣质。滤液用 10%的氢氧化钠溶
液调 pH值至 9。将碱化后的溶液约 50ml, 用 30ml×3氯仿进行
萃取 , 合并得到有机相 , 用无水硫酸镁干燥 ,过滤 ,将滤液用旋转
蒸发仪蒸干 , 从而得到白屈菜总生物碱的结晶物 0.68 g, 得率为
1.36%。其它实验条件实验结果数据如表 3。
表 3　超声波辅助提取白屈菜总生物碱
序号 提取液体积 /ml 提取时间t/h 提取温度T/℃ 提取得率(%)
1 300 6 50 0.62
2 350 4 40 0.85
3 400 5 60 1.36
4 300 5 40 1.03
5 350 6 60 1.33
6 400 4 50 1.19
7 300 4 60 1.32
8 350 5 50 1.18
9 400 6 40 0.55
kⅠ 2.97 3.36 2.43
kⅡ 3.36 3.58 2.99kⅢ 3.11 2.50 4.02
R 0.39 1.08 1.59
3　结论
索式法乙醇提取白屈菜总生物碱实验中乙醇的浓度对结果
影响最大 , 其次是乙醇用量和提取时间 , 其最佳工艺条件是乙醇
浓度为 80%,乙醇用量 250ml, 提取时间 5 h;超声波乙醇提取白
屈菜总生物碱实验中影响因素的主次顺序依次是提取温度 、提取
时间和溶剂用量 ,其最佳工艺条件是提取温度 60℃,提取时间 5
h,乙醇用量 250 ml;碱化法索式提取白屈菜总生物碱是以上三种
路线中最好的 , 影响因素的主次顺序依次是溶剂 、提取时间和溶
剂用量 ,其最佳工艺条件是溶剂为氯仿 , 提取时间 3 h, 氯仿用量
250 ml。
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