全 文 ：网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４６．１０４９．Ｒ．２０１２０７３１．１６５２．００３．ｈｔｍｌ
［基金项目］海南省自然科学基金项目（３０９１２９）
［作者简介］李玲娜（１９７８－），女，海南海口人，本科，实习研究员，电话：１３１３８９８７９１８，电子信箱：ｌｉｌｉｎｇｎａ＠ｌｉｖｅ．ｃｏｍ。
［收稿日期］２０１２－０７－１０　　［修回日期］２０１２－０７－２６　　网络出版时间：２０１２－０７－３１　１６：５２
大鼠口服裸花紫珠后木犀草素的体内药动学研究
李玲娜，马　婷，王　彬，张一云，李诚丛
（海南省药物研究所，海南 海口　５７０３１１）
　　［摘要］目的：建立木犀草素血药浓度的高效液相色谱测定方法，并探讨大鼠口服裸花紫珠提取物后木
犀草素的体内药代动力学行为。方法：采用ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８（５ｕ，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）色谱柱，流动相为
甲醇－水（５２∶４８），流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温：３０ ℃，检测波长３５０ｎｍ。大鼠灌胃裸花紫珠提取
物２０ｇ·ｋｇ－１ 后，与不同时间点股静脉取血，用 ＨＰＬＣ法测定其血药浓度，绘制药－时曲线。结果：大
鼠血浆中，木犀草素在０．００５～０．１０μｇ范围内，回归方程为Ｙ＝２９０６３Ｘ－１９３３．３，ｒ＝０．９９８９，呈良好的
线性关系。大鼠灌胃裸花紫珠提取物后，木犀草素的药－时曲线符合二室模型。结论：裸花紫珠提取物
中木犀草素在大鼠体内吸收迅速。该方法专属性强，灵敏度高，可用于木犀草素在大鼠体内的药动学研
究。
［关键词］裸花紫珠；木犀草素；药动学
［中图分类号］Ｒ９３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００７－１２３７（２０１２）１１－１５４１－０３
Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｃａｌｉｃａｒｐａｎｕｄｉｆｌｏｒａ　ｉｎ　ｒａｔｓ
ＬＩ　Ｌｉｎｇ－ｎａ，ＭＡ　Ｔｉｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｂｉｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｙｉ－ｙｕｎ，ＬＩ　Ｃｈｅｎｇ－ｃｏｎｇ
（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｈａｉｋｏｕ　５７０３１１，Ｃｈｉｎａ）．
［Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｊｅｃｔ］：Ｉｔ　ｉｓ　ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ　ｂｙ　Ｎａｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｆｕｎｄ　ｏｆ　Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ（３０９１２９）．
［Ａｕｔｈｏｒ］：ＬＩ　Ｌｉｎｇ－ｎａ （１９７８－），Ｆｅｍａｌｅ，Ｈａｉｋｏｕ　Ｈａｉｎａｎ，Ｉｎｔｅｒｎ　Ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒ，Ｍ．Ｂ．，Ｔｅｌ：
１３１３８９８７９１８，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｌｉｎｇｎａ＠ｌｉｖｅ．ｃｏｍ．
Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０１２－０７－１０　　Ｒｅｖｉｓｅｄ：２０１２－０９－２６　 ＪＨＭＣ，２０１２；１８（１１）：１５４１－１５４３
Ｖｉｅｗ　ｆｒｏｍ　ｓｐｅｃｉａｌｉｓｔ：Ｉｔ　ｉｓ　ｃｒｅａｔｉｖｅ，ａｎｄ　ｏｆ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ　ｖａｌｕｅ．
［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｐｌａｓｍａ
ａｎｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｎ　ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８（５ｕ，２５０ｍｍ×４．６
ｍｍ）ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ，ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ａｎｄ　ｗａｔｅｒ（５２∶４８）ａｔ　ｔｈｅ
ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０ｍＬ／ｍｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ＵＶ　ｄｅｔｅｃｔｏｒ　ｗａｓ　ｏｐｅｒａｔｅｄ　ａｔ　３５０ｎｍ．Ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔ－ｉｏｎ　ｏｆ　Ｃａｌｉ－
ｃａｒｐａｎｕｄｉｆｌｏｒａ（２０ｇ／ｋｇ），ｔｈｅ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　ｐｌａｓｍａ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏ－
ｋｉｎｅｔｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ＷｉｎＮｏｎｌｏｎ　５．２ｐｒｏｇｒａｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｉｎ　ｒａｔ　ｐｌａｓｍａ，ａｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｏｆ
ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．００５－０．１０μｇ（ｒ＝０．９９８９）．Ｔｈｅ　ｐｌａｓｍａ　ｌｕｔｅｏｌｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｔｉｍｅ
ｃｕｒｖｅ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ　ｍｏｄｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｃａｎ　ｂｅ　ａｂｓｏｒｂｅｄ　ｑｕｉｃｋｌｙ　ｉｎ
ｒａｔｓ．Ｉｔ　ｉｓ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｏｆ　ｒａｔ　ｉｎ　ｖｉｖｏ．
［ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ］Ｃａｌｉｃａｒｐａｎｕｄｉｆｌｏｒａ；Ｌｕｔｅｏｌｉｎ；Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ＨＰＬＣ
１４５１
海南医学院学报　２０１２，１８（１１）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈａｉｎａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
　
DOI:10.13210/j.cnki.jhmu.2012.11.005
　　裸花紫珠（Ｃａｌｉｃａｒｐａｎｕｄｉｆｌｏｒａ　Ｈｏｏｋ．ｅｘ　Ａｍ．）
为马鞭草科（Ｖｅｒｂｅｎａｃｅａｅ）紫珠属植物，具有散瘀止
血、解毒消肿的功效，主要用于各种出血病、跌打瘀
肿、水火烫伤、疮毒溃烂等［１，２］，据文献报道其主要
含有木犀草苷，木犀草素－３＇－０－Ｂ－Ｄ－吡喃葡萄糖苷，
木犀草素－４＇－０－Ｂ－Ｄ－吡喃葡萄糖苷，２ｃｔ，３ｃｔ，１９ｃｔ－三
羟基－乌索－ｌ２－烯－２８－酸，乌索酸，２－羟基－乌索酸和齐
墩果酸等化学成分［３，４］。本文以木犀草素为指标，
研究大鼠灌胃给予裸花紫珠提取物后，木犀草素在
血浆中含量随时间的变化，反映裸花紫珠在大鼠体
内的木犀草素吸收代谢规律。
１　材料与方法
１．１　仪器与试剂
日本岛津ＬＣ－１０ＡＤ液相色谱仪；ＳＰＤ－１０ＡＶＤ
紫外可见检测器，ＬＣ－１０ＡＴＶＰ 泵，色谱柱：ｐｈｅ－
ｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８（５ｕ，２５０×４．６ ｍｍ）。Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ
ＢＰ２１１Ｄ电子分析天平（十万分之一）；日本岛津
ＡＥＧ－１２０Ｇ电子分析天平（万分之一）；岛津 ＵＶ－
２４０１ＰＣ紫外可见分光光度计；冷冻离心机；超声仪；
水浴锅等。木犀草素对照品（中国药品生物制品检
定所，批号：１１０７５６－２００１１０含量测定用）；甲醇为色
谱纯，超纯水（自制），其余所用试剂均为分析纯。裸
花紫珠提取物（自制）。
１．２　实验动物
ＳＤ大鼠，雌雄各半，体重２２０～２８０ｇ，长沙市开
福区东创实验动物科技服务部提供
１．３　方法
１．３．１　色谱条件 　以硅烷键合硅柱Ｃ１８（２５０ｎｍ
×４．６ｎｍ）为色谱柱，流动相为甲醇－水（５２∶４８），流
速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温：３０℃，检测波长３５０ｎｍ。
理论板数按木犀草素峰计算应不小于２　５００，分离度
大于１．５。
１．３．２　给药方案与血样采集　称取ＣＭＣ－Ｎａ　１．０
ｇ，溶于沸水２００ｍＬ中，配成０．５％的溶液。取配置
好的ＣＭＣ－Ｎａ　１０ｍＬ于小烧杯中，精密称取裸花紫
珠提取物（含木犀草素１．３７ｍｇ／ｇ）５ｇ于小烧杯中，
搅拌混匀，并超声使溶解，制成质量浓度为０．５ｇ／
ｍＬ的裸花紫珠提取物混悬液。大鼠禁食过夜，灌
胃给予裸花紫珠提取物ＣＭＣ－Ｎａ混悬液８ｍＬ，并
于给药后１０ｍｉｎ﹑２０ｍｉｎ﹑３０ｍｉｎ﹑４０ｍｉｎ﹑
５０ｍｉｎ﹑１ｈ、１．５ｈ股静脉取血（０．５ｍＬ）。将各
时间点的血分别置于涂有肝素的离心管中，５　０００
ｒ﹒ｍｉｎ－１ 离心５ｍｉｎ，取上清液备用。
１．３．３　溶液的配制　对照品溶液的制备：精密称取
木犀草素对照品２．５ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加适量
甲醇振摇溶解，再用甲醇定容至刻度，摇匀。精密量
取适量，加甲醇稀释至浓度为１．０μｇ／ｍＬ，摇匀即
得。
血浆样品供试液的制备：精密吸取上述２．２上
清液２５０μＬ，加入１０ｍｏｌ﹒Ｌ
－１ 盐酸２５０μＬ，超声
３０ｍｉｎ进行酸水解，取出冷却后，加入１０％三氯乙
酸１００μＬ涡旋混合。在精密加入乙酸乙酯２ｍＬ，
涡旋５ｍｉｎ，１０　０００ｒ﹒ｍｉｎ－１ 离心１０ｍｉｎ，精密吸
取上清液２ｍＬ，用氮气吹干溶剂，并用甲醇２５０μＬ
复溶，１３　０００ｒ﹒ｍｉｎ－１ 离心１０ｍｉｎ，既得。
阴性样品供试液的制备：精密吸取空白血浆
２５０μＬ，与血浆样品供试品溶液同法处理，既得。
２　结果
２．１　专属性试验
分别精密量取１．３．３中对照品溶液，血浆样品
供试液及阴性样品供试液各２０μＬ，注入液相色谱
仪，记录色谱图（图１）。结果显示：在此色谱条件
下，空白血浆在木犀草素出峰位置附近没有峰出现，
说明内源性物质对木犀草素的测定无干扰，可以满
足木犀草素血液样品的测定要求。
Ａ：空白血浆　Ｂ：木犀草素对照品　Ｃ：大鼠灌胃３０ｍｉｎ后的血浆样品
图１　木犀草素血液样品液相色谱图
２４５１ 　海南医学院学报 Ｖｏｌ．１８Ｎｏ．１１Ｎｏｖ．２０１２
２．２　线性考察
精密称取木犀草素对照品适量，配置系列浓度
的对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典２００５
年版－部附录ＶＩＤ）测定，进样２０μＬ，以峰面积为纵
轴（Ｙ）和木犀草素的浓度为横坐标（Ｘ），绘制标准曲
线，得 回 归 方 程 为 Ｙ ＝２９０６３Ｘ－１９３３．３，ｒ
＝０．９９８９，结果表明木犀草素在进样量０．００５～０．
１０μｇ范围内与峰面积呈良好的线性关系。
２．３　精密度试验
吸取同－对照品溶液，依法分别重复进行６次，
测定，记录峰面积，计算ＲＳＤ＝２．２３％，结果表明精
密度良好。
２．４　稳定性试验
取血浆样品（大鼠灌胃３０ｍｉｎ后），按血浆样品
供试液的制备方法项下操作，并进行室温放置０、２、
４、８、１２ｈ的稳定性试验，测定峰面积，并计算其
ＲＳＤ＝３．７２％，说明血浆样品供试液在１２ｈ内稳
定。
２．５　回收率试验
精密量取６份空白血浆各２５０μＬ，分别精密加
入木犀草素对照品溶液（１．０２μｇ／ｍＬ）１．０ｍＬ，依
照血浆样品供试液的制备方法项下操作，按上述色
谱条件进样分析，测定木犀草素的峰面积，计算其回
收率为８５．３％，ＲＳＤ＝２．１３％，表明本方法回收率
良好。
２．６　大鼠体内药代动力学考察
按上述方法给大鼠给药并采集血样，按方法操
作，测定血浆中的木犀草素，绘制其血浆平均药物浓
度－时间曲线，见图２。血药浓度测定数据采用 Ｗｉｎ－
Ｎｏｎｌｏｎ　５．２药代动力学软件进行曲线拟合，裸花紫
珠提取物中大黄素在大鼠体内的动力学行为符合二
室开放模型，主要动力学参数见表１。
图２　木犀草素血液样品液相色谱图
　　由图可表明：大鼠灌胃裸花紫珠提取物后３０
ｍｉｎ，木犀草素总浓度达到峰值，药时曲线符合开放二
室模型。Ｔｍａｘ为０．５ｈ，Ｃｍａｘ为６．０μｇ·ｍＬ
－１。
表１　大鼠口服裸花紫珠提取物后木犀草素的药动学参数
Ｌａｍｂｄａ＿ｚ
μｇ·ｍＬ－１·ｍｉｎ－１
ＨＬ＿Ｌａｍｂｄａ＿ｚ
ｍｉｎ
Ｃｌ＿Ｆ＿ｏｂｓ
ｍＬ·ｍｉｎ
Ｖｚ＿Ｆ＿ｏｂｓ
Ｌ
Ｔｍａｘ
ｍｉｎ
ＡＵＣｌａｓｔ
μｇ·ｍｉｎ·ｍＬ－１
Ｃｍａｘ
μｇ·ｍＬ－１
０．０５９　 １４．３５５　 ０．１７５　 ２．７　 ３０　 １７１．４８８　 ５．９３８
　　表１中Ｌａｍｂｄａ＿ｚ为消除速率常数，ＨＬ＿Ｌａｍｂｄａ＿ｚ为半衰期，Ｃｌ＿Ｆ＿ｏｂｓ为血浆清除率，Ｖｚ＿Ｆ＿ｏｂｓ为表
观分布容积。
３　讨论
裸花紫珠提取物的水溶性不好，试验中发现用－
定比例的乙醇溶解提取物给大鼠灌胃后，手术后极
易出现死亡。经查证此现象是因为乙醇灌胃后对麻
药的影响造成的。最终采用以０．５％ＣＭＣ－Ｎａ溶液
作为助溶剂，溶解裸花紫珠提取物给大鼠灌胃。
在裸花紫珠提取物中木犀草素含量测定方法的
基础上，对木犀草素的血液样品进行研究。发现此
方法基本适用于血液样品的测定，且在柱温３０℃
时，效果最佳。
从药－时曲线图中可看出，Ｔｍａｘ为０．５ｈ说明
木犀草素在大鼠体内吸收很快，口服后３０ｍｉｎ血药
浓度即达峰值。口服吸收后约５０ｍｉｎ时出现第二
个血药浓度的峰值，说明木犀草素在大鼠体内经肝
肠循环有二次吸收。由表１可看出大鼠口服裸花紫
珠提取物后木犀草素的吸收，清除均比较快，而且半
衰期短，体内无蓄积。经试验发现，木犀草素在大鼠
体内吸收消除的个体差异性很大，含量很低，无明显
的性别差异。
参考文献
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验研究［Ｊ］．广东微量元素科学，２００６，１３（８）：３９－４１．
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用研究［Ｊ］．海南大学学报（自然科学），２００２，２０（２）：
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药学，２０１０，２２（９）：７７－７９．
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３４５１李玲娜等．大鼠口服裸花紫珠后木犀草素的体内药动学研究