全 文 ：云 南大学学报 (自然科 学版 ), 20 04 , 26 (6AJ : 58 一劝 C N 53 一 1 04 5 / N l朋N 025 8 一 7 9 7 1
J o川 , al of Y u n ” a n I J川 v e巧 iyt
腺毛茶蔗种子中的脂肪酸含量的分析 ’
师治贤 , 刘 梅 , 杨月琴 , 胡凤祖
(中国科学院 西北高原生物研究所 ,青海 西宁 80 00 1)
摘要 :用超临界萃取技术对青藏高原产的腺毛茶篇种子中脂肪酸进行了萃取 ,其萃取率 12 . 0% . 用毛细管气相色
谱进行分离和分析 ,结果表明不饱和脂肪酸在卯% 以上 . 其中 a 一亚麻酸 20 . 83 % , 下亚麻酸 7 . n % ,亚油酸 46 . 0% .
关键词 : 腺毛茶篇 ;脂肪酸 ;气相色谱 ;超临界萃取
中圈分类号 : Q 946 . 81 文献标识码 : A 文章编号 : 02 58 一 79 7 “ 2 0 4 )6 A 一 0 58 一 02
青藏高原特殊的生态条件 , 孕育了丰富多采的
生物多样性 , 其中具有浓厚民族特点的藏药是青藏
高原各族人民在长期的生活实践中与各种疾病作
斗争的宝贵经验的总结 . 为此 , 我们对青藏高原资
源丰富的虎耳草科茶藤属 (凡be s L . )植物 中未见
报道的腺毛茶 ( R艺加: ig ? ’a ed “ )进行 了研究分析 .
茶蔗属植物 , 全世界分布共有 15 0 种 , 我国分
布的有 4 5 种 , 青藏高原产 13 种 . 其中腺毛茶蕉是
青藏高原上资源丰富果实丰满的一种药用植物 , 生
长在海拔 2 600一 3 7 0 0 m 的山坡林下 , 河谷灌丛 .
主要篇分布在青海互助北山林场以及祁连和玉树
等地 . 茶属植物在“ 晶珠本草 ” 中记载 , 甘 , 微寒 , 滋
补止泻 ; 有敛毒、 除黄水之功效 , 并能收敛各种脉
管病等川 . 因此 , 对青藏高原茶蔗属腺毛茶篇深人
地研究 , 找出有利于防治心脑血管疾病及能够提高
人体免疫功能的生理活性物质 , 这不但为青藏高原
藏药茶篇属植物药学的发展提供科学的理论基础 ,
而且为研究开发茶藤属植物增加新思路和新的应
用价值 .
( 1) 仪器 : C QZ 超临界萃取仪 (广州轻工业研
究所生产 , 容量 10 k g ) .
毛细管气相色谱仪 ( 日本岛津公司生产 G 。 一
g A )
, 带氢火焰离子化检测器 ( IF D ) , C 一 ZR A 数据
处理机 , 旋转蒸发仪 (瑞士公司 B ue hl 生产 ) ;
( 2) 试剂 :各种脂肪酸标准品均购 自美国 51 9 -
ma 公司 .
乙醚 ( A , R ) ( 30 一 60℃ ) (西安化学试剂厂 ) ,
K ( ) H ( A
.
R ) (北京化学试剂厂 ) .
1 材料 、 仪器和试剂
1
.
1 材料 腺毛茶藤于 2以犯 年 8 月份采自海拔 3
仪叉〕m 以上的青海互助北山林场 . 果实采集后 , 保存
在阴凉处 , 半阴干后 , 剥去果肉 , 籽粒洗净 , 晾干 , 干
燥保存 .
1
.
2 仪器和试荆
2 脂肪酸萃取方法
2
.
1 溶剂萃取法 将剥去果肉后的籽粒精选去杂
后 , 加 8 % 一 10 % 的水 , 在 80℃的温度下软化 4 h,
粉碎在 ( 80一 10 0 目 )范围 . 准确称取 10 . 0 9 , 用 20
m L 的乙醚浸泡过夜后 , 索氏提取 s h , 然后冷却 ,
提取液用无水 N aZ 以轰干燥 4 h , 过滤 , 除去乙醚 .
得深绿色的脂肪酸混合物 . 脱色后得淡黄色的脂肪
酸混合物 1 . 1 9 , 萃取率为 1 1 . 0 % .
2
.
2 C OZ 超临界萃取法 超临界流体既有与气体
相当的高渗透能力和低的粘度 ,又具有与液体相近
的密度和对物质优良的溶解能力 . 同溶剂萃取法相
比 , 超临界萃取法的提取脂肪酸效果较好 .
选用剥果肉的籽粒去杂后 , 加 8 % 一 10 % 的
水 , 在 80 ℃温度下软化 4一 s h , 然后粉碎为 1一 1 . 5
~ 大小颗粒
, 在萃取床中装料 10 k g , 按以下萃取
条件进行运行 : 压力 15 M l〕 a , 温度 41 ℃ , 以儿动态
· 收稿日期 : 2X(] 4 一 8D 一 16
甚金项目 :青海省自然科学基金资助项目 .
作者简介 :师治贤 ( 1 940 一 ) , 男 , 研究员 , 博士生导师 , 主要从事药物化学方面的研究
第 6A 期 师治贤 , 等 : 腺毛茶篇种子中的脂肪酸含量的分析
流量 45 L/ h . 经过 8一 10 h 的萃取 , 得清亮棕色 的
脂肪酸混合物 1 195 9 , 其萃取率 12 . 0 % .
3 月旨肪酸含量的分析
3
.
1 脂肪酸衍生物的制备 称取萃取的脂肪酸棍
合物 0 . 8 9 , 置 1 0 n 1 L 的试管 中 , 小 心 用新配 的
V (石油醚 ) : V ( 乙醚 ) 二 4 : 3 溶剂溶解 , 然后加人
新配置的 0 . 5 m o l / L K O H 甲醇溶液 4 m L , 振荡 5
而 n , 在室温下放置 20 而 n 后 , 加入少许蒸馏水 , 静
置 1 . s h , 小心取上清液进行色谱分析 .
3
.
2 月旨肪酸色谱条件的选择 毛细 管弹性柱
F R \P ( 5 0 m 又 0
.
2 2
mrn )
, 柱温 1 5 0一 2 4 0℃ , 程序升
温 , 升温速率 5℃ /而 n , 在 2 4 0℃时 , 保持 50 而 n , 检
测器温度 2 8 0℃ , 汽化室温度 280℃ , 载气 (高纯
姚 ) 4 2 m L/ 而 n , 玩 的压力 0 . I M P[ a , 空 气 0 . 08
N且〕 a , 尾 吹流速 4 9 m上 /而 n , 火焰离子化检测器
( F ID )
, 衰减 10 4 , 进样 1 m L . 其脂肪酸甲醋色谱分
离图如图 1 .
1 4 5 6 7
醋外标法定量 , 在时间程序上删除溶剂峰后 , 采用
面积归一化法在数据处理机上进行计算 , 其结果如
表 1 .
表 l 腺毛茶蔗果实油脂中脂肪酸质且分数
T
a b
.
1 Cb n t e n t s of fa t t y
a e i d s of R艺撇 彭ar 及班￡￡
峰号 脂肪酸结构 质量分数 / % 脂肪酸
1 q :60 .8 2 软脂酸
2 Q 6 1 0
.
14 棕桐油酸
3 q 80 1
.
38 硬脂酸
4 q s
: r {:9 ) 11
.
7 0 油酸
5 Q s
: 2 (9
.
12 ) 46
.
0 0
’ 亚油酸
6 Q s 3 (6
.
9
.
12 ) 7
.
11 丫一 亚麻酸
7 q s
: 3
( 6
.
9
.
15 ) 20
.
8 3 。 一亚麻酸
8 味 、 .0 53 十八碳四稀酸
10 2 0 30
t / m i n
1 : 软脂酸 p a卜in t ic ; 2 : 棕搁油酸 p曲元 t o le i c ; 3 : 硬脂酸 oc tad e -
~
c 翻 d沁 : 油酸 ol ie c ac id ; 5 : 亚油酸 石加 le i c a c id ; 6 : Y 一 亚麻酸 7
一阮d丽 ;c 7 : a 一亚麻酸 a 一 l阳 le n ie ; 8 : 十八碳四稀酸 1〕a n n a n 。 ac id
图 1 脂肪酸甲醋色谱分离图
iF g
.
I C肠” m a tq 犷aln of eS l〕a r at ion of fa t y ac ids on G C
3
.
3 月旨肪酸的定性定皿分析 按照 3 . 1 制备标准
脂肪酸甲醋 , 然后在同一色谱条件下 , 利用标准脂
肪酸甲醋保留时间与样品中脂肪酸 甲醋 比较确定
脂肪酸的定性分析 . 定量分析用标准混合脂肪酸甲
4 结果和讨论
( 1) 腺毛茶篇是青藏高原上资源丰富 , 成熟期
果实丰满 . 经分离提纯后 , 腺毛茶藤种子油 的不饱
和脂肪酸的质量分数在 90 % 以上 , 其中属 。 一 3 多
不饱和脂肪酸 a 一 亚麻酸质量分数占 20 . 83 % , 属
。 一 6 的多不饱和 脂肪酸的亚油 酸质量分数为
4 6
.
0 0 % 和 下一 亚麻酸为 7 . 1 % , 这些脂肪酸不仅
是人体重要必须的脂肪酸 , 而切具有 明确的功效 .
药理和临床证明2[, 3] , 。 一 亚麻酸可经酶转化成二
十碳五烯酸 ( E F A )和二十二碳六烯酸 ( E痊LA ) , 它
具有改善心血管疾病和高血脂疾病的作用 ;亚油酸
和 下一亚麻酸是活性很强的脂肪酸 , 在足够酶的作
用下 , 可提供正常代谢功能的前列腺素 , 可抗血栓 ,
降低胆固醇 , 改善血液循环 .
( 2) 腺毛茶藤种子 中脂肪酸采用 Cq 超临界
萃取技术 , 减少了操作过程中的污染 , 保证 了药用
多不饱和脂肪酸的生理活性 . 而溶剂萃取法 , 操作
比较麻烦 , 溶剂的残留很难除尽 , 脱色使脂肪酸损
失相对比较大 . 用高效毛细管气相色谱对各脂肪酸
进行了分离和分,析 , 由色谱分离 图可以看 出 , 峰形
对称 , 清晰 , 主峰含量高 , 杂质峰含量很底 , 这不但
确保了分析数据的准确性 , 也保证了从腺毛茶蕉种
子中萃取出的脂肪酸质量 .
致谢 :潘金堂研究员鉴定标本 , 特此致谢 .
(下转第 62 页 )
云南大学学报 (自然科学版 ) 第 26卷
性繁殖试验初报 fJ〕 . 云南植物研究 , 19 82 , 4 ( 4 ) :
4 2争一 43 1 .
李运昌 . 重楼属植物引种栽培的研究 R . 滨重楼的育
苗试验 [ J ] . 云南植物研究 , 19 86 , 8( 2 ) : 2 09- 2 12 .
R A G HA V A N V
.
E x p 叮 ir n e n过 e m b即呢en es is in vas -
d ar lP
a n st[ M ] I刀n d o r l , N ew Y or k : A心记 , i c P~
,
19 76
.
李运昌 . 滇重楼 的无性繁殖【J . 云南植物研究 ,
1986
,
8 ( 4 )
:
4 29一4 35 .
陈昌祥 , 周 俊 , 张玉童 , 等 . 滇重楼地上部分的幽体
皂贰 [J ] . 云南植物研究 , 19 90 , 12 (3 ) : 32 3 .
陈昌祥 , 周 俊 . 滇重楼地上部分的 2 个微量皂贰
[ J ]
. 云南植物研究 , 19 5 , 17 ( 2 ) : 2 15一 2 0 .
, .J, .哎J了0心l`且lr胜LF.
, .J勺.J
7
ǎXà11,尸. LI
.L
医杂志 , 19 84 , 3 : 37一4 0 .
【9] 胡光万 ,雷立公 , 出自深山的 良药— 重楼〔J . 植物杂志 , 20 02 , 3 : 16 .
〔10 ] 王丽萍 , 赵学伟 . 云南重楼野生驯化及栽培技术研究
初探 [J ] , 中国野生植物资源 , 2 0() 1 , 2 1( 1) : 62e 币 3 .
【川 欧阳志勤 , 龙春林 ,郭 星 . 珍稀濒危植物与云南的
生物多样性保护【J] . 云南环境科学 , 2 002 , 2 1 ( 3 ) :
30
目
se 33
.
〔12 」 侧巴卫 R N . T hr ae et n已 b i o t as : “ hot s详臼 ” in tI’O p i以如尚招〔J〕. hT e E n v i~ 。 alt
ist
,
19 88
,
8 ( 3 )
: 1 87一
20 8
.
〔13 ) 汪发绩 , 唐 进 . 中国植物志 〔M ] . 北京 : 科学出版
社 , 197 8 .
「14 〕 李运昌 . 重楼属植物引种栽培的研究 1 . 滇重楼的有
〔19 1
S t u d ie s on P or P ag
a t io n t e e hn i que
o f t h e G en us aP
r 泛s L
HOU Y u
一
iP gn
,
F氏J 沁盼il , SH A hS a , Y U A N M in g , Y U H a i一do gn , W A N G Y -ue h ua
(反h。』 of U fe 翻~
,
uY ~
U ir i
~ yt,
K
~
gn 65 0D 91
, 以 ian )
周比 t n比:t T h e eG nus aP 找
5 L
.
is a 诚dl m e d i d耐 he ht in o 即 rT u n o n use . sA a esr ul t of in c r巴巧 Ign r叫iu er -
刀n e n t er ce n lt y
,
t h e an t
u r al
~
u r c e s h as ben ex ca va
t e d un con
tolr l
e d
,
an d t h
e
iw ld esor
ur e es t e n d ot e x h a ust
-
ed
.豁 t h e p r o p a gat ion t e eh in q ue of the eG n略 aP ir s L , sho ul d be s t u di e d in e di a tel y
.
K ey w or ds : Ge nus aP
行 5 L . ; 贺司 p rO Pa g a t 10 n ; se c on da ry do rm a n cy ; hir ~
c u t ign p
r o Pa ga it on ; it s ue
c
d t
u re
关 关 补 关 关 关 关 关 关 补 关 关 补 关 关 关 关 关 关 关 关 关 关 关 关 爷 关 关 关 关 关 关
赵淑春 , 富 力 , 于 英 , 等. 6 种茶篇种子的营养成
分研究 [ J〕. 营养学报 , 199 4 , 16 ( 2 ) : 2 32一2 35 .
范文询 . a 一 亚麻酸和 F PA 和 I )HA 代谢〔1 ] . 生理科
学进展 , 198 8 , 19 ( 2 ) : 1 1于一 113 .
, ,.J
2
月」尸.胜`卜. 1
(上接第 59 页 )
参考文献 :
〔1] 杨永昌 ,何廷农 , 卢生莲 , 等 . 藏药志 [M〕. 西宁 : 青海
人民出版社 , 199 1 .
A r l al ” 15 o f t h e f a t t y a e ids in s e e d 0 11 o f R泛be s g 泛ar 奴 i艺
S H I Z ih
一
ix a n
,
L U I M e i
,
Y A N G Y u -e 中n , H U
(N
o rt 枷胜 t P la t ea u Isn t i ut et of B iolc 盯 , hC in es 户` a d曰n y 段 iecn es,
F七n -g :
X iin n g
,
8 10 0 1 hC i
n a )
A加t o c t : A me t h记 bes ed on s u eP cr irt ical n iu d ex t ar ict on ( S F E ) an d ca inl lar y g a s hc ~ ogt arP
h y
( CG C ) w as dve el
o pe d for g ua li
t at iv e
, a n d g ua n t i t a t ive an al y is
s
of fa t t y
a ic d s of s e e d io l f rom R
葱be s ig ar ld ￡诬i n
中n g h a i 一 iT be t a n lP at ea u . T he ar et of ex t ar ict on ~ 12 % on SF E
.
T h e r es ul st
s h o w ed ht at ht e con et nt
s
of
u n s a t u ar t e d a ic d
wer
a加 u t 90 % , a r n o n g w h i e h a 一 l ioln 咧 e a ic d , 下一 l i n ol ien e a ic d a n d li n ol ie e a e id we r e
20
.
83%
,
7
.
11% a n d 4 6
.
00 %
, r es Pe ct ive ly
.
K即 w 。找如 : R诬鲡 ig ar ld 艺￡; c a p ll l a yr 脚 山omar t og
r a ph y ; s u p e r c ir t i阅 fl ul d ex t r a e t io n ; f a t t y a e ids