全 文 ：89※基础研究 食品科学 2007, Vol. 28, No. 09
收稿日期：2007-07-16
基金项目：吉林省科技厅应用基础研究项目(20050567)
作者简介：刘静波(1962-)，女，教授，研究方向为营养与功能食品。
笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I
结构鉴定
刘静波，林松毅，王作昭，王二雷
(吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室，吉林 长春 130062)
摘 要：本实验重点研究了笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I与特殊试剂颜色反应，紫外光谱特征判断其基本
结构为黄酮醇黄酮，为进一步拓宽笃斯越桔在食品领域和药品领域奠定研究基础。
关键词：笃斯越桔；黄酮类化合物；结构鉴定
Study on Structure Identification of Flavonoids in Vaccinium uliginosum L.
LIU Jing-bo，LIN Song-yi，WANG Zuo-zhao，WANG Er-lei
(Laboratory of Nutrition and Functional Food, College of Quartermaster Technology,
Jilin University, Changchun 130062, China)
Abstract ：Through a detailed analysis of color reaction and UV optical spectrum test of flavonoids, the flavonoids from
Vaccinium uliginosum L. were pri arily identified as flavonols, which had laid a foundation for the deep study of V ccinium
uliginosum L. in the field of food and medicine.
Key words：Vaccinium uliginosum L.；f avo ids；extraction； tructure identification
中图分类号：TQ234 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)09-0089-03
笃斯越桔(Vaccinium uliginosum L.)又名蓝莓、地
果、甸果、都柿等，隶属杜鹃花科越桔属，为亚灌
木野生植物。越桔属全世界共有130多种，中国约有20
余种[1]，主要集中在东北、内蒙古、新疆等地区，吉
林省长白山地区野生笃斯越桔分布极广、产量大、资
源丰富。笃斯越桔含有大量的黄酮类化合物等有效成
分，其保健功能在食品领域和医药领域的作用日渐突
出，逐渐被重视，现在已经被联合国粮农组织列为人
类五大健康食品之一。当前，对笃斯越桔研究主要热
点集中在治疗眼科疾病，血管障碍和糖尿病并发症等，
尤其是笃斯越桔果实黄酮类化合物提取物用于治疗腹
泻、痢疾、口腔炎症等，笃斯越桔叶黄酮类化合物提
取物可降低糖尿病患者的血糖浓度[2]。
吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室课题
组成员在利用微波、超声波、脉冲电场等高新技术提
取分离长白山笃斯越桔果实、叶片、枝干等不同部位
中黄酮类化合物[3-4]、多糖类化合物、花青素等多种功
能因子的研究基础上，为了使笃斯越桔叶片黄酮类化合
物符合第三代功能性食品要求，功能性成分必须明确结
构化学式，本实验主要通过黄酮类化合物分离组分I与
特殊试剂颜色反应和黄酮类化合物分离组分I紫外光谱特
征[5]判断其基本结构，为开发笃斯越桔叶的第三代功能
食品奠定研究基础。
1 材料与方法
1.1材料
笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I：吉林大学
军需科技学院营养与功能食品研究室提供。
1.2试剂
甲醇、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化
钠、盐酸、硼酸、三氯化铁、浓盐酸、锌粉等分析
纯试剂，均由北京化工厂生产。
1.3仪器与设备
MILLIPORE牌超纯水机 美国；752PC型紫外可见
分光光度计 上海光谱仪器有限公司；AG204型电子天
平，METTLE TOLEDO 瑞士。
1.4笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I结构鉴定方
法
2007, Vol. 28, No. 09 食品科学 ※基础研究90
1.5颜色反应鉴定黄酮类化合物分离组分I方法
1.5.1盐酸-锌粉反应颜色鉴定方法
取笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I分离组分I
样品的乙醇溶液1ml，加放少量锌粉，然后加浓盐酸4～
5滴，置沸水浴中加热2～3min，观察颜色变化，如果
出现红色表示有游离黄酮类或黄酮甙。(以同法不加锌粉
做一对照，如果两管都现红色则有花色素存在。如继
续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色又变为蓝色，即证明
含花色苷)[5]。
1.5.2三氯化铁反应颜色鉴定方法
三氯化铁水溶液或醇溶液为常用的酚类显色剂，多
数黄酮类化合物分离组分I因分子中含有酚羟基，故可
产生阳性反应，但一般仅在含有氢键缔合的酚羟基时，
才呈现明显的颜色。取笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离
组分I样品的乙醇溶液5ml，加放少许的三氯化铁，观
察颜色变化。
1.5.3硝酸铝反应颜色鉴定方法
取笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I样品的乙
醇溶液5ml，加放1%的硝酸铝溶液5ml，在紫外灯下
观察。
1.5.4硼酸反应颜色鉴定方法
黄酮类化合物分离组分I分子中具有5-羟基黄酮及
2-羟基查尔酮类结构时，在无机酸或有机酸存在条件
下，可与硼酸反应，生成亮黄色。取笃斯越桔叶片黄
酮类化合物分离组分I样品的乙醇溶液5ml，加放少许硼
酸，观察颜色变化。
1.5.5氢氧化钠反应颜色鉴定方法
取笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I样品的乙
醇溶液5ml，加放1mol/L的氢氧化钠10ml，观察颜色
变化，然后通入空气，观察颜色变化。
1.6紫外光谱特征判断结构的实验方法
取笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I样品甲醇
溶液，以甲醇作参比，在紫外光谱仪上从200～500nm
扫描，记录样品UV图谱，并与不同黄酮类化合物类型
甲醇溶液的UV光谱(如表1所示)对照，以确定黄酮类化
合物结构类型。
2 结果与分析
2.1盐酸-锌粉实验结果
盐酸-锌粉实验颜色鉴定实验结果为：加放锌粉的
实验显红色，不加放锌的对照实验不显红色。结果证
明分离组分I中存在游离的黄酮类或黄酮苷。黄酮类的
乙醇溶液，在盐酸存在的情况下，能被锌粉还原，生
成花色苷元而显红色或紫色反应。这是由于酮类化合物
分子中含有一个碱性氧原子，能溶于稀酸中被还原成带
四价的氧原子即锌盐。本法是鉴定黄酮类的一个反应。
但花色素本身在酸性下(不需加放锌粉)呈红色，应加以
区别。
2.2三氯化铁反应结果
三氯化铁反应颜色鉴定试验结果：颜色变为绿褐
色，证明有黄酮类化合物分离组分I存在。
2.3硝酸铝反应结果
硝酸铝反应颜色鉴定试验结果：呈黄绿色荧光，
证明黄酮或者黄酮醇类。
2.4硼酸反应结果
硼酸反应颜色鉴定结果：呈亮黄色，证明有2-OH
查儿酮或5-OH黄酮类。
2.5氢氧化钠反应结果
氢氧化钠反应颜色鉴定结果：反应溶液先呈黄
色，通入空气后颜色变为棕色，证明分离组分I中有
黄酮醇类存在。碱性试剂显色反应鉴定黄酮类化合物分
笃斯越桔叶片黄
酮类化合物分离
组分I
与盐酸-
锌粉反应
与三氯化
铁反应
与销酸
铝反应
与硼酸
反应
与氢氧化
钠反应
紫外
光谱
特征
判断
颜色特征判断
综合判断黄酮类化合物分离组分I结构
图1 笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分 I结构的初步鉴定方法
Fig.1 Flow chart of initially identifying flavonoids from
Vaccinium uliginosum L.
表1 不同黄酮类化合物类型的甲醇溶液的UV光谱表
Table 1 UV spectrum of flavonoids in solution of methanol
化合物结构类型 带I(300～4 0nm) 带II(240～ 8 nm) 备注
黄酮 310～350 250～280
黄酮醇 350～385 250～280 带Ⅰ红移
异黄酮 310～330 245～275 桂皮酰基系统破坏，故带Ⅰ为弱峰带Ⅱ为主峰
二氢黄酮及二氢黄酮醇 300～330 275～295 同异黄酮，但主峰比异黄酮红移(大于270nm)
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离组分I时，二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应
的异构体查尔酮，显橙色至黄色。黄酮醇类在碱液中
先呈黄色，通入空气后变为棕色。分子结构中有邻二
酚羟基或3,4-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被
氧化，产生沉淀。
2.6紫外光谱特征判断结果
黄酮类化合物甲醇溶液的UV光谱特征如表1所示，
根据各类黄酮类化合物的紫外吸收波长范围可以初步鉴
定笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I为黄酮醇黄酮。
3 结 论
3.1笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I紫外光谱特
征结果：吸收峰带I在359.5nm处出现峰值，吸收峰带
II在259.1nm处出现峰值。
3.2通过黄酮类化合物分离组分I与特定试剂颜色反
应实验和UV光谱特征图检验实验，能够鉴定出分离纯
化所得笃斯越桔叶片黄酮类化合物分离组分I为黄酮醇
黄酮。
参考文献：
[1]张欣. 黑龙江省野生浆果资源——笃斯越桔[J]. 中国野生植物资源,
1997(3): 23-29.
[2]Thorne Research, Inc[J]. Alternative Medicine Review, 2001(5):
504.
[3]王作昭, 刘静波, 林松毅, 等. 笃斯越桔黄酮类化合物提取技术的试
验研究[J]. 食品科学, 2006, 27(11): 391-394.
[4]WANG Zuo-zhao, LIU Jing-bo, LIN Song-yi. Study on extraction of
total flavonoids from Vaccinium uliginosumL[J]. APJCN, 2006, 15
(suppl): S140.
[5]陈晓青, 蒋新宇, 刘佳佳, 等. 中草药成分分离分析技术与方法[M].
北京: 化学工业出版社, 2006(4): 57-107.
2.8
2.4
2.0
1.6
1.2
0.8
0.4
0.0
200250300350400450500
259.1nm
吸
光
度
波长(nm)
359.5nm
图2 黄酮类化合物分离组分I样品在甲醇中的紫外吸收光谱
Fig.2 Ultraviolet absorption spectrum of samples containing
flavonoids solved in methanol
紫外光谱特征判断黄酮类化合物分离组分I结构实
验结果如图2所示。从图2可以看出，分离组分I吸收
峰带I落在350～385nm之间，在359.5nm处出现峰值，
吸收峰带II落在250～280nm之间，在259.1nm处出现
峰值。
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