全 文 ：藁本内酯稳定性的影响因素及稳定化措施
★ 李慧 王一涛 (中国中医研究院 北京 100700)
摘要:探讨了藁本内酯在常温下的不稳定因素 , 如光化 、氧化等对其含量的影响。结果显示:即使密闭 、避光也不能保证藁本
内酯的稳定。加入适宜的稳定剂后 ,藁本内酯能较好地保存。
关键词:藁本内酯;稳定剂;含量
中图分类号:R 284.1 文献标识码:A
川芎 、当归均为常用中药 ,化学成分分析显示二
者富含挥发油 ,藁本内酯则是其中含量最高的有效
成分 ,分别占川芎 、当归挥发油的 35%和 58%,具有
解痉 、止咳平喘等抗胆碱活性。但是 ,藁本内酯纯品
或是制备成蒸馏液后 ,放置期间不稳定[ 1] ,极易发
生异构化使含量显著下降 ,以至在制剂或药材当中
测不到藁本内酯的存在。
针对藁本内酯的不稳定性 ,国内学者进行了一
些试验工作以寻求稳定化措施 ,如:藁本内酯纯品需
在-20 ℃的低温环境下基本稳定[ 2] ;应用 PCM 溶
剂化效应模型进行量子化学理论计算 ,推测出了藁
本内酯常温下在氯仿 、环己烷等溶剂中可稳定保
存[ 3] 。本研究则在藁本内酯中加入适宜的药用辅
料 ,并比较添加前后指标成分的含量变化情况 。
1 仪器与材料
1.1 仪器
HPLC仪:Hew let t-Packard1100 全自动液相色
谱仪 , 1100HP 多元泵 ,自动进样器 ,二极管阵列检
测器(DAD)扫描范围 190 ～ 400 nm ,并可对色谱峰
进行纯度检测。HP1100Chemstation 化学工作站则
用于积分和数据分析处理 。
1.2 试剂与药品
藁本内酯从伞形科植物川芎(Ligust icum
chuanxiong Hort.)中提取分离得到 。经 HPLC 面
积归一化法测定纯度为 98%以上 。
甲醇(天津四友生物医学技术有限公司);其余
试剂均为分析纯 ,购于北京化学试剂公司 。
2 实验方法
2.1 藁本内酯的含量测定方法
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取藁本内酯对
照品 24.60 mg 于 50 mL 的容量瓶中 ,加入甲醇充
分溶解 ,作为对照品溶液 。
2.1.2 色谱条件 Zorbax RX-C18(Analyt ical 4.6
mm×250 mm ,5 μm)柱 ,流动相为甲醇-水(70∶30),
流速为 1.0 mL/min ,检测波长 330 nm ,柱温 35 ℃。
2.1.3 线性范围考察 自动吸取对照品溶液 1 、2 、
4 、8 、12 、20 、30 μL 注入液相色谱仪中 ,依据给定的
色谱条件测定藁本内酯峰面积。以对照品进样量为
横坐标 ,峰面积为纵坐标进行线性回归 ,得回归方程
为:Y =4.404 1+197.243 6X , r=0.999 9 ,说明藁
本内酯在 0.492 ～ 14.76 μg 之间呈良好线性关系。
2.1.4精密度试验 精密吸取上述对照品溶液 ,重
复进样 5次 ,藁本内酯峰面积积分值的相对标准偏
差为 2.9%。
2.1.5 回收率试验 采用加样回收法。取 4份己
知含量样品 ,分别添加藁本内酯标准品 ,按给定色谱
条件进行操作 ,进样量为 10 μL ,计算加样回收率 ,
结果见表 1 。
Tab 1 Recovery o f Ligustilide
Amount in sample/μg Amount added/μg Amount detected/μg Recovery(%) RSD(%)
16.99 9.85 27.09 100.93
17.36 12.31 28.86 97.27
13.08 9.90 23.81 103.61
12.85 12.47 24.69 97.51
2.6
作者简介:李慧 ,博士研究生 ,主要从事中药制剂研究。
·56·
江西中医学院学报20 0 3年3月第1 5卷第1期
JOURNAL OF JIANGXI COLLEGE OF TCM 2003 Vol.15 N o.1
○中药现代化○
2.1.6 稳定性试验 精密吸取藁本内酯标准溶液
10μL ,每间隔半小时测定一次峰面积 ,结果表明 ,测
定值在 2.5小时内稳定。
2.2 不同条件下藁本内酯的含量变化
藁本内酯的化学结构为苯酞类 , 3位上连有活
泼的丁烯基 ,均为化学不稳定因素 ,在室温自然放置
条件下 ,可发生脱氢 、氧化 、水解 、降解等多种异构化
反应 ,使样品由透明澄清 、可流动的液体逐步转变成
褐色 、粘稠的半固体或固体 。
不同储存温度对藁本内酯含量影响已有文献报
道[ 2] ,针对稳定性的影响因素———光和空气中的
氧 ,我们设计了如下条件试验 ,定期精密称取样品 ,
按给定的液相色谱条件 ,测定其中藁本内酯的含量 。
以 0时测定量为 100%,计算不同条件下藁本百分
含量的经时变化 ,结果见表 2 。
Tab 2 Content variety of ligustilide under
different condition %
condit ion
time of detect ive
0 2 4 10 15 30
++ 100 92.40 87.48 71.01 60.09 33.45
-+ 100 71.37 36.73 5.78 0.82 -
+- 100 91.84 80.18 64.39 14.07 -
-- 100 59.82 53.13 21.61 2.87 0.46
注:+-表示密闭但不避光;-+表示不密闭但避光;++表示
密闭且避光;--表示不密闭也不避光。
测定结果表明:光和氧确实会加速藁本内酯的
异构化 ,室温条件下即使避光 、密闭保存 ,也不能保
证藁本内酯的稳定 ,有必要采取稳定化措施。
2.3 不同稳定剂对藁本内酯稳定性的影响
针对藁本内酯不稳定的诱因 ,选取 3种稳定剂
进行试验 ,添加工艺优选试验另文报道 。定期精密
称取样品 ,按给定的液相色谱条件 ,测定其中藁本内
酯的含量。以 0 时测定量为 100%,计算加入不同
稳定剂后藁本内酯百分含量的经时变化 ,结果见表
3 。
试验筛选的 3种稳定剂对藁本内酯均一定的稳
定作用 ,其中以稳定剂 B 的效果更显著 。稳定剂 C
的试验数据均一性相对较差 ,同组数据之间存在偏
差 ,可能原因是藁本内酯在其中分散性差所致。
Tab 3 percent content of ligustilide by using
different stabilizers %
stabilizer
t ime of detective
0 2 4 10 15 30
stabilizer A 100 99.30 99.42 96.95 96.87 90.61
stabilizer B 100 99.84 99.80 99.77 98.83 96.15
stabi lizer C 100 101.37 92.24 95.44 89.18 85.53
3 讨论
(1)改变传统中药制剂“粗 、大 、黑”的落后状况 ,
最大限度地降低服用剂量 ,一个重要手段就是对有
效成分进行精制。随着藁本内酯在提取物中含量的
不断提高 ,其异构化的速率也同样加快 ,因此 ,解决
藁本内酯的稳定性问题就显得十分迫切 。但国内相
关文献对此报道极少 ,共联机检索到 3篇 ,其中两篇
指出了藁本内酯的不稳定性及可能异构化途径;另
一篇寻找出了藁本内酯稳定保存的溶剂条件 。本文
从制剂学角度出发 ,寻求适宜的稳定剂 ,为藁本内酯
在制剂中的稳定化提供一个可行的方法 。
(2)藁本内酯是当归 、川芎挥发油中最大量的成
分 ,并具有一定的生理活性 ,因此 ,相比药材中的川
芎嗪 、阿魏酸 、丁基苯酞含量而言 ,藁本内酯的研究
有必要深入化 。
(3)藁本内酯异构化产物发生了外观 、物态的改
变 ,但异构化的规律以及生理活性是否随之改变 ,还
有待进一步研究。
参考文献
[ 1] 石力夫 ,邓延昭 ,吴柏生 ,等.川芎干燥根茎挥发油化学成分及其
稳定性的研究[ J] .药物分析杂志 , 1995 , 15(3):26
[ 2] 李桂生 ,马成俊 ,李香玉 ,等.藁本内酯的稳定性研究及异构化产
物的 GC-MS 分析[ J] .中草药 ,2000 , 31(6):405
[ 3]周长新 ,李新华.藁本内酯的稳定性与溶剂化效应的关系[ J] .药
学学报 , 2001 , 36(10):793
(收稿日期:2002-12-27)
Influencing Factor of the Stability of Ligustilide and Means
of Stabilization
LI Hui ,WANG Yi-tao
(China academy of Traditional Chinese Medicine ,Beijing100700)
Abstract:To invest ig ate the effects on content of ligustilide under the condition of illumination , oxidation at
room temperature.The result show s that ligustilide is unstable even if kept aw ay f rom layer and air ,but it can be
w ell preserved af ter some stabilizers are added.
Key words:ligustilide;stabilizer;content
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李慧等:藁本内酯稳定性的影响因素及稳定化措施
○中药现代化○