全 文 ：羌活中异欧前胡素的含量测定
郭晏华,沙 明, 车 鑫
(辽宁中医学院, 辽宁 沈阳 110032)
摘 要:目的: 对羌活中异欧前胡素含量进行测定。方法: 溶剂提取, 大孔吸附树脂纯化, 反相高效
液相色谱法测定。Lbondapak C18色谱柱, 流动相甲醇 - 乙腈 - 0. 25mol /L 磷酸 ( 9B5B10) , 检测波长
322nm。结果: 进样量 0. 084~ 0. 42mg /ml, 线性关系良好 ( r = 0. 9998) , 加样回收率为 97. 00% , RSD=
1. 61% ( n= 5) , 90%乙醇洗脱物中异欧前胡素含量为 51. 99% ( mg /g )。结论: 羌活醇提物经大孔吸附树
脂纯化后,提高了其异欧前胡素的含量, 为开发利用羌活提供依据。
关键词:羌活; 异欧前胡素;反相高效液相色谱法
中图分类号: R284. 1 文献标识码: B 文章编号: 1008 - 4231( 2001) 04 - 0300 - 02
羌活为伞形科植物羌活和宽叶羌活的根和根茎,
分布于我国青海、四川、甘肃、云南一带[1、2]。具有散表
寒、祛风湿、利关节的作用。药理研究表明, 羌活水溶
性成分具有抗心律失常作用, 其脂溶性成分(挥发油、
香豆素) 对体内血栓形成有抑制作用并具抗炎作用。
据文献报道,已从羌活中分离出 15 种香豆素[3~ 5] ,其中
异欧前胡素的含量较高。笔者测定了羌活醇提后得到
的膏状物经大孔吸附树脂经乙醇梯度洗脱后得到的洗
脱液中异欧前胡素的含量。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药 LC - 6A 高效液相色谱仪, 200 型紫
外检测器, 4290 型积分仪。甲醇、乙腈为色谱纯, 其它
试剂为分析纯。D101型大孔吸附树脂( 20~ 60 目)。异
欧前胡素对照品(中国药品生物制品检定所提供)。生
药样品购于沈阳市沈城中药厂, 经本院康廷国教授鉴
定为植物羌活 ( Notopterygium incisum Ting ) 的干燥根
和茎。
图 1 样品及对照品的HPLC图谱
A.样品 B.对照品 * 异欧前胡素
1. 2 色谱条件 Lbondapak C18 5Lm, 6mm @ 150mm 色
谱柱( 日本岛津)。流动相甲醇 - 乙腈 - 0. 025mol / L
( 9B5B10) , 流 速 1. 0ml/min, 检 测 波 长 322nm,纸速
0. 3cm /min,柱温为室温。进样量 10Ll。外标法峰面积
定量(色谱图见图 1)。
1. 3 标准曲线的制备 精密称取异欧前胡素对照品
8. 40mg, 置 100ml量瓶中, 甲醇定容 ( 84. 0Lg /ml)。精
密吸取 1, 2, 3, 4, 5Ll进样, 以异欧前胡素峰面积为自变
量( X) ,以异欧前胡素量为因变量( Y) ,回归方程为 Y=
1901217. 857X - 34198, 对照液在 0. 084 ~ 0. 42mg /ml
线性关系良好( r= 0. 9998, n = 5)。
1. 4 加样回收率实验 取已知含量的羌活药材适量,
加入一定量的异欧前胡素,测定结果见表 1。(Lg , % )
表 1 异欧前胡素加样回收率测定结果
样品量 加入量 测得量 回收率 X- RSD
1 529. 2 504. 1 1025. 7 99. 2
2 583. 9 532. 6 1064. 0 95. 3
3 626. 7 528. 7 1111. 5 96. 2 96. 98 1. 61
4 547. 6 512. 0 1036. 3 97. 8
5 577. 6 525. 3 1063. 2 96. 4
1. 5 样品的测定 取羌活 50. 00g , 粉碎成粗粉, 用 8
倍量 90%乙醇回流提取 3 次,每次 1. 5h, 合并提取液,
回收乙醇,得浸膏 13. 70g, 并将其与适量经处理过的大
孔吸附树脂拌匀,上于经处理过的大孔吸附树脂柱上,
依次用水, 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、
90%的乙醇冲洗, 每次冲至洗脱液无色, 水浴蒸干, 得
膏状物,分别用 50% 乙醇溶解, 定容至 50ml,作为供试
品溶液。进样 10Ll, HPLC 测定 (见图 1)。异欧前胡素
含量随洗脱液醇浓度的增加而增加, 见表 2。
收稿日期: 2001 - 08 - 12
作者简介:郭晏华( 1962 - ) ,女,湖南湘潭人,副教授,学士,从事生药学研究。
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第 3卷 第 4期
2001年 12月
辽 宁 中 医 学 院 学 报
JOURNAL OF LIAONING COLLEGE OF TCM
vol . 3 No. 4
Dec. , 2001
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2001.04.61.guoyh.044
黄杖膏对家兔皮肤刺激性试验
高 松,潘 燕
(大连大学医学院, 辽宁 大连 116622)
摘 要:通过黄杖膏对家兔完整皮肤和破损皮肤刺激试验, 结果表明,无论是单次给药还是多次给
药均未见刺激作用。
关键词:黄杖膏; 家兔;皮肤刺激试验
中图分类号: R282. 710. 7 文献标识码: B 文章编号: 1008 - 4231( 2001) 04 - 0301 - 01
黄杖膏是在/ 速效烧伤膏0的组方基础上, 去掉地
榆等加虎杖配伍而成, 在临床上用于治疗各期褥疮。
为了评价其外用的安全性, 对家兔作皮肤刺激性试验,
取效较好,现报道如下。
1 实验材料
药品:黄杖膏, 批号: 991009, 含量: 含生药量 30%。
由大连大学医学院中药制剂实验室提供。动物: 大耳
白家兔, 体重 1. 8~ 2. 1kg ,雌雄兼用, 由大连医科大学
实验动物中心提供,试验期间实验室温度 18~ 24 度。
2 实验方法
取家兔 12 只,每组 3 只, 随机分成 4 组, 给受试物
前将家兔背部两侧脱毛 5cm @ 10cm。其中两组于给药
前用消毒过的 9 号针头在脱毛区皮肤上划井字形, 均
以损伤角质层, 表皮出血丝为度, 为破损皮肤组, 另两
组为完整皮肤组。破损组和完整组各设 1 次给药组和
多次给药组,多次给药组每日 1 次,连续涂抹1 周, 每次
取黄杖膏 1. 0g, 均匀涂抹在家兔脱毛区右侧, 另组涂抹
赋形剂1. 0g。24h 后用温水轻洗残留的受试物, 去除受
试物后 1、24、48、72h 观察涂抹部位有无红斑和水肿等
情况,进行试验评价。
3 评分标准
3. 1 皮肤刺激反应积分 ¹ 红肿, 0: 无红斑; 1: 勉强可
见; 2:明显红斑; 3: 中度到明显红斑; 4: 紫红色红斑并
有焦痂形成。º水肿, 0: 无水肿; 1: 勉强可见; 2: 皮肤
隆起轮廓清楚; 3:水肿隆起约 1mm 并范围扩大。
3. 2 皮肤刺激强度分值 无刺激性: 0~ 0. 4; 轻度刺
激性: 0. 5~ 1. 9;中度刺激性: 2. 0~ 5. 9;强度刺激性: 6.
0~ 8. 0。
4 实验结果
完整组中多次给药组一次给药组, 皮肤刺激反应
总积分、皮肤刺激反应平均分值均为 0; 皮肤刺激反应
强度均为无刺激性。破损组中多次给药组、一次给药
组皮肤刺激反应总积分分另为 1、0;皮肤刺激反应平均
分值分别为 0. 33、0;皮肤刺激反应强度均为无刺激性。
结果表明,黄杖膏无论是单次给药还是多次给药,对家
兔完整皮肤和破损皮肤均未见有刺激作用。因此, 单
从皮肤刺激试验看是可以外用的。
编辑:李兴宜
表 2 乙醇洗脱液中异欧前胡素含量
乙醇浓度
( %)
测得量
mg /g
总量
mg /g
1 90 51. 99
2 80 20. 96
3 70 7. 50
4 60 0. 65
5 50 0. 43 81. 53
6 40 -
7 30 -
8 20 -
9 水 -
2 讨论与结果
本实验采用热提法、大孔吸附树脂纯化法分别制
备供试品溶液,测定结果表明后者优于前者,其原因是
除掉了大量的杂质,使异欧前胡素纯度提高。
实验结果表明, 90%醇洗脱液中异欧前胡素含量
最高, 这与其结构特点是相符的。
参考文献:
[1 ] 中国医学科学院药物所.中药志( 1 ) [M ] .北京:人民出
版社, 1959. 282.
[2 ] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴( Ò ) [M ] .
北京:科学出版社, 1972. 1099.
[3 ] 肖永庆. 中药羌活中的香豆素 [ J ] . 药学学报, 1995, 30
( 4) : 274.
[4 ] 孙友富,孙玉茹. 羌活化学成分的研究 ( Ò ) [ J ] .中药通
报, 1985, 10( 3) : 31.
[5 ] 孙友富,肖永庆,刘晓宏.羌活化学成分研究( Ó ) [ J ] . 中
国中药杂志, 1994, 19( 2) : 99.
编辑:覃 芳
收稿日期: 2001 - 10 - 08
作者简介:高松( 1959 - ) ,男,辽宁大连人,副教授,主要从事中医药教学与研究。
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第 3卷 第 4期
2001年 12月
辽 宁 中 医 学 院 学 报
JOURNAL OF LIAONING COLLEGE OF TCM
vol . 3 No. 4
Dec. , 2001