全 文 ：［成分分析］
高效液相法快速测定紫金砂中没药烷吉酮和异欧前胡素的含量
王晓梅， 汪鋆植* ， 郭志勇， 彭元莉， 邹 坤， 但飞君
(天然产物开发与利用湖北省重点实验室(三峡大学)，三峡大学化学与生命科学院，湖北 宜昌 443002)
收稿日期:2010-04-23
基金项目:国家自然科学基金(30970296)
作者简介:王晓梅(1985 －)，女，硕士生，研究方向:天然产物化学。
* 通讯作者:汪鋆植(1966 －)，男(土家族)，博士，教授，主要从事三峡地区民族民间药物质量控制和活性研究。Tel:(0717)6397478 E-
mail:horsedog@ 163. com
关键词:紫金砂;高效液相色谱法;没药烷吉酮;异欧前胡素
摘要:目的:建立高效液相色谱法，测定紫金砂中没药烷吉酮和异欧前胡素的含量。方法:采用色谱柱 YMC-Pack AQ C18，
150 mm ×4. 6 mm，5 μm，流动相乙腈-水(40 ∶ 60 ～ 70 ∶ 30)，流速 1. 0 mL /min，柱温 25 ℃，检测波长 226 nm。结果:紫金
砂中没药烷吉酮的平均含量为 3. 8%。没药烷吉酮在 1 ～ 9 g /L呈良好的线性关系，r = 0. 999 8，异欧前胡素的平均含量
为 3. 1%，r = 0. 999 9，在 1 ～ 9 g /L呈良好的线性关系。结论:采用高效液相色谱法测定紫金砂中没药烷吉酮和异欧前胡
素的含量简便快速，结果可靠，可作为紫金砂的质量控制指标。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)02-0294-04
Rapid analysis of isoimperatorin and bisabolangelone in Angelica polymorpha
Maxim. by HPLC
WANG Xiao-mei， WANG Jun-zhi* ， GUO Zhi-yong， PENG Yuan-li， ZOU Kun， DAN Fei-jun
(Hubei Key Laboratory of Natural Products Research and Development，China Three Gorges University，Yichang 443002，Hubei，China)
KEY WORDS:Angelica polymorpha Maxim.;HPLC;isoimperatorin;bisabolangelone;assay
ABSTRACT:AIM:To develop an HPLC method of determining the contents of isoimperatorin and bisabolangelo-
ne in Angelica polymorpha Maxim from western part of Hubei Province. METHODS:A Diamonsil-C18 (150 mm
×4. 6 mm，5 μm)column was adopted. The mobile phase was acetonitrile-water(40 ∶ 60-70 ∶ 30)1. 0 mL /min
flow rate. UV detection wavelength was set at 226 nm. RESULTS:The average of bisabolangelone content was
3. 8% in the linear range of 1-9 g /L(R = 0. 999 8)，and the average of isoimperatorin content was 3. 1% in the
linear range of 1-9 g /L(R = 0. 999 9). CONCLUSION:This simple，accurate and sensitive method is suitable
for the determination of contents of isoimperatorin and bisabolangelone in Angelica polymorpha Maxim.
紫金砂来源于伞形科当归属植物拐芹 Angelica
polymorpha Maxim.的根［1］，为土家族常用药物，为
《湖北中药材质量标准》(2009 年版)收载品种，具
有温中散寒、理气止痛的功效，用于治疗胃痛、腹痛、
风湿关节痛等。紫金砂主要含有异欧前胡素﹙ iso-
imperatorin﹚、欧前胡素［4］(imperatorin)等香豆素成
分，没药烷吉酮［6］(Bisabolangelone)等萜类成
分［7-9］，还有甾醇类成分［2-3］，挥发油等［5］。其中没
药烷吉酮是其主要抗溃疡活性成分［9-10］，欧前胡素
和异欧前胡素具有抗菌、抗肿瘤等多种药理作
用［13］，欧前胡素主要用于抗菌，抗癫痫等作用［10-12］，
本试验对紫金砂中主要成分和主要活性成分异欧前
胡素和没药烷吉酮的含量进行了测定。
1 材料与仪器
1. 1 实验材料、试剂 药材采购于鄂西不同的地
区。经中南民族大学万定荣教授鉴定为伞形科植物
拐芹 Angelica polymorpha Maxim.的根。
甲醇、乙腈(天津市科密欧化学试剂开发中
心)。没药烷吉酮对照品(本实验室提供，经 HPLC
分析其纯度均大于 98%)、异欧前胡素对照品(本实
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验室提供，经 HPLC分析其纯度均大于 98%)。
1. 2 仪器 高效液相色谱仪 prostar 210，AL204 电
子天平，紫外-可见分光光度计 U-3010，KQ3200DB
型数控超声波清洗器。
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件的优选 分别取紫金砂没药烷基酮
和异欧前胡素的对照品和样品经甲醇溶解后，紫外
分光光度计进行全波长扫描，图谱显示 2 个对照品
和样品在 226 nm 处均有最大吸收，故选择 226 nm
为检测波长。
2. 2 色谱条件 色谱柱为 YMC-Pack AQ C18，150
mm ×4. 6 mm，5 μm;流动相为乙腈-水(40 ∶ 60 ～
70 ∶ 30);进样量为 20 μL，流速为 1. 0 mL /min;柱温
为 25 ℃，检测波长为 226 nm。在该色谱条件下待
测组分可达到基线分离见下图 1。
图 1 紫金砂的 HPLC图
Fig. 1 HPLC of Angelica polymorpha Maxim
1.没药烷基酮 2.异欧前胡素
1. bisabolangelone 2. isoimperatorin
2. 3 对照品溶液制备 精密称取没药烷吉酮和异
欧前胡素对照品各 10 mg，置于 10 mL量瓶中，加甲
醇溶解并稀释到刻度，0. 45 μL 滤膜过滤，供测定
用。
2. 4 供试样品溶液制备 取药材粉碎，过 80 目筛，
精确称取粉末 1 g 置于锥形瓶中，精密量取甲醇 20
mL浸泡 2 h，40 ℃时超声波(40 W)超声提取 15
min，放冷，加甲醇至原重量，0. 45 μL 滤膜过滤，供
测定用。
2. 5 标准曲线及线性关系考察 精密吸取对照品
溶液 1、3、5、7、9 μL注入液相色谱仪，按色谱条件测
得峰面积，以进样量(μL)为横坐标，峰面积为纵坐
标，绘制标准曲线。回归方程为:没药烷基酮 Y =
6. 541 49 × 107X － 1. 913 47 × 106，r = 0. 999 81，在
1 ～ 9 mg /mL呈良好的线性关系。异欧前胡素 Y =
3. 273 98 × 107X － 1. 421 15 × 107，r = 0. 999 93，在
1 ～ 9 mg /mL呈良好的线性关系。图 2 和图 3 为没
药烷基酮和异欧前胡素对照品溶液的 HPLC图。
图 2 对照品没药烷基酮的 HPLC图
Fig. 2 HPLC of bisabolangelone
图 3 对照品异欧前胡素的 HPLC图
Fig. 3 HPLC of isoimperatorin
2. 6 稳定性试验 取样品溶液，间隔 3 h 测 1 次，
共测 24 h。结果没药烷吉酮峰面积 RSD 为 1. 3%
(n = 8)，异欧前胡素峰面积 RSD 为 1. 14%(n = 8)
表明供试品溶液室温下放置 24 h基木稳定。
2. 7 精密度实验 精密吸取没药烷吉酮和异欧前
胡素对照品溶液 6 μL重复进样 5 次，测定没药烷基
酮峰面积的 RSD 为 1. 48%，异欧前胡素峰面积的
RSD为 0. 77%
2. 8 重复性试验 取样品 5 份，照 2. 4 项操作，测
得没药烷吉酮平均含量为 3. 8%;异欧前胡素的平
均含量为 3. 1%。
2. 9 加样回收试验 精密称取已知含量样品 3 份，
加入与样品含量相当的对照品，测定没药烷吉酮和
异欧前胡素含量，计算回收率，结果见表 1，表 2。
表 1 没药烷吉酮加样回收率(n =5)
Tab. 1 The recoveries of bisabolangelone
没药烷
基酮
样品平均
含量 /%
加入的对照
品的量 /%
测得量
/%
回收率
/%
RSD
/%
1 2. 82 3. 6 6. 293 98. 33 4. 8
2 3. 98 4 8. 01 100. 38 3. 89
3 2. 04 1. 90 3. 77 96. 9 3. 21
4 4. 42 4. 45 8. 598 96. 93 2. 34
5 3. 21 3. 00 6. 31 101. 61 4. 47
2. 10 样品含量测定 收集不同产地的 5 批样品，
分别测定药材中没药烷吉酮和异欧前胡素的含量。
取药材粉碎，过 80 目筛，精确称取粉末 1 g，精密量
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取甲醇 20 mL浸泡 2 h，40 ℃时超声波(40 W)超声
提取 15 min，放冷，加甲醇至原重量。0. 45 μL 滤膜
过滤，供测定用。按上述色谱条件，进样测定。结果
见表 3。
表 2 异欧前胡素加样回收率(n =5)
Tab. 2 The recoveries of isoimperatorin(n =5)
异欧前
胡素
样品平均
含量 /%
加入的对
照量 /%
测得量
/%
回收率
/%
RSD
/%
1 2. 11 1. 5 3. 58 99. 17 4. 45
2 4. 54 4. 5 9. 12 100. 88 3. 63
3 2. 23 2. 3 4. 58 101. 10 2. 75
4 3. 66 3. 45 6. 95 97. 75 3. 26
5 2. 09 2. 00 3. 93 96. 08 4. 68
表 3 不同产地的紫金砂没药烷基酮和异欧前胡素的
质量分数
Tab. 3 The concentration of bisabolangelone and isoimper-
atorin of Angelia polymorpha Maxim in different
habitats
药材来源
没药烷基酮的
质量分数 /%
异欧前胡素的
质量分数 /%
1.神农架木鱼镇 4. 93 4. 3
2.神农架松柏镇 5. 66 4. 77
3.宜昌市长阳土家族自治县
榔坪镇
2. 04 2. 23
4.宜昌市五峰土家族自治县
牛庄乡
4. 42 3. 54
5.鄂西土家族苗族自治州福
宝山
2. 36 3. 04
3 讨论
紫金砂为土家族治疗胃肠疾病的常用药物。本
实验从紫金砂主产地鄂西不同的地方收集了具有代
表性药材，用 HPLC 建立了没药烷吉酮和异欧前胡
素的含量测定方法。为制定紫金砂的质量标准，进
一步控制紫金砂的质量提供了基础。
波长分别取紫金砂没药烷基酮和异欧前胡素的
对照品和样品经甲醇溶解后，紫外分光光度计进行
全波长扫描，图谱显示 2 个对照品和样品在 226 nm
处均有最大吸收，故选择 226 nm为检测波长。比较
了不同系统和流动相比例，如甲醇-水、乙腈-水-磷
酸，甲醇-水-磷酸等，效果都不理想。乙腈-水的比例
经调试，结果 40 ∶ 60 ～ 70 ∶ 30 的比例两者在样品中
可以得到较好的分离，且保留时间合适，检测比较
快。因此，选择乙腈-水作为流动相。通过正交实验
确定其超声时间，药材浸泡的时间，最后得出浸泡 2
h，超声 15 min，可使紫金砂药材中的 2 种有效成分
含量达到最高。
实验表明没药烷吉酮在紫金砂中含量较高，平
均达 3. 3%，同时没药烷吉酮是紫金砂中抗溃疡的
主要有效成分，但不同产地的紫金砂中没药烷吉酮
含量差异较大，因此，建立没药烷吉酮的含量测定方
法，对紫金砂中没药烷吉酮的含量进行测定，对控制
紫金砂的质量具有重要意义。实验表明，以根粗大，
油性强，断面挤压有油性物渗出者含量高。
没药烷吉酮、异欧前胡素沸点低，均具有一定挥
发性。经过对放置于不同状态，不同时间的紫金砂
的含量进行测定，如下表 4 结果表明，紫金砂存放时
间过长或不当，没药烷吉酮、异欧前胡素的含量会下
降，影响药效。因此，存储一般不宜超过 2 年，应密
闭保存，避免高温和酸碱。
表 4 放置不同时间的紫金砂没药烷基酮和异欧前胡素的
质量分数
Tab. 4 The concentration of bisabolangelone and isoimper-
atorin of Angelia polymorpha Maxim stored for dif-
ferent periods of time
药材来源
没药烷基酮的
质量分数 /%
异欧前胡素的
质量分数 /%
1.宜昌市五峰土家族自治县
牛庄乡
4. 42 3. 54
2.宜昌市五峰土家族自治县
牛庄乡(放置一年)
3. 76 2. 94
3.鄂西土家族苗族自治州福
宝山
2. 36 3. 04
4.鄂西土家族苗族自治州福
宝山(放置一年)
2. 05 2. 60
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一年和二年生人工种植唐古特大黄蒽醌类成分的变化
周 利1， 陈桂琛2， 史 萍1*
(1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;2.中国科学院西北高原生物研究所，青海
西宁 810001)
收稿日期:2010-06-30
基金项目:中科院西北高原生物研究所客座研究人员基金(F200-9-28);上海市浦江人才计划(10PJ1402300)
作者简介:周 利(1958 －)，女，工程师，研究方向:仪器分析。Tel:(021)64252920 E-mail:lzhou@ ecust. edu. cn
* 通讯作者:史 萍，研究员。Tel:(021)64252920 E-mail:ship723@ yahoo. com
关键词:人工栽培唐古特大黄;蒽醌;高效液相色谱
摘要:目的:测定和比较一年期和二年期生长的人工种植唐古特大黄中游离和结合型蒽醌类成分的变化。方法:利用
HPLC和 UV法测定大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚和总蒽醌含量，并与市售成品进行比较。
结果:研究显示，生长期从一年增加到二年间，蒽醌类成分随着时间的增加有所增加;大黑沟种植的一年期大黄中游离大
黄素甲醚含量已接近市售成品大黄的含量;大黑沟和群加种植的一年期大黄中结合大黄酸的含量均高于市售成品大黄
的含量。结论:研究结果可为一年期人工种植唐吉特大黄资源开发，可望取代野生唐吉特大黄提供依据。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2011)02-0297-04
Change of anthraquinones in 1 －2-year-old cultivated Rheum tanguticum
ZHOU Li1， CHEN Gui-chen2， SHI Ping1
(1. East China University of Science and Technology，The State Key Laboratory of Bioreactor Engineering，Shanghai 200237，China;2. Nerthwest Institu-
te of Plateau Biology，The Chinese Academy of Sciences，Xining 810001，China)
KEY WORDS:cultivated Rheum tanguticum;anthraquinones;HPLC
ABSTRACT:AIM:To assay and compare contents of anthraquinones between annual and biennial cultivated
Rheum tanguticum from Qinghai Province. METHODS:The free five anthraquinone contents，including aloe-emo-
din，rhein，emodin，chrysophanol and physcion，and the total anthraquinone contents in cultivated Rheum tangutic-
um and pheum tinguticum on the market were analyzed using C18 RP-HPLC and UV spectrophotometer，respective-
ly. RESULTS:The results showed that the contents of either five free anthraquinones or the combined ones were
increased with the increase in the growth period. The physcion content in annual cultivated Rheum tanguticum
growing in Daheigou was close to the one on the market，and the rhein content in annual cultivated Rheum tangutic-
um growing both in Daheigou and Qunjia was more than the one on the market. CONCLUSION:Providing data
for the use of annual cultivated Rheum tanguticum to replace the wild one.
大黄属于蓼科植物，性寒味苦，是我国常用中
药。大黄在传统中医药理论中具有“泻热通便、凉
血解毒、逐瘀通经、利胆退黄”的功效。现代药理及
临床研究表明，大黄具有泻下、抗菌、抗肿瘤、抗高血
脂、降低血压、健胃、利胆、保肝、强心、消炎、延缓机
体衰老、清除体内氧自由基、调节免疫等诸多作
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