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HPLC法测定刺山柑果中的腺苷含量



全 文 :进行整形手术。因此,在临床中,相当一部分女性会
估计乳腺癌术后的美容效果,这也是手术方案选择
中需要考虑的因素。术中切口的数量主要根据病灶
的位置来确定,一般要做两个切口。本研究中对于
外上象限仅作了一个切口,但是美容效果欠佳,故今
后可以考虑均做两个切口,也有助于放化疗的进行。
研究效果显示,患者术中的出血量、手术时间,
平均住院时间尚可。术后患者的美容满意率较高,
达到良好及一般效果的总计为92.5%。术后随访
24个月,仅以3例发生复发,复发率为4.83%。无
死亡病例发生,2年生存率达到100%,这与欧怡[5]
的研究结果相近。可见保乳手术在治疗早期乳腺癌
患者的效果还是比较满意的。对于不适宜用保乳手
术的患者,便需要考虑采用改良根治术,但是其美容
效果确明显降低[6],研究发现其满意率不足10%,
这对于患者术后的生活质量造成一定的影响。
综上所述,在患者具备手术适应条件的前提下,
并且患者能够接受术后的放化疗治疗时,采取保乳
手术治疗早期Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌的疗效较好,满意度
高,复发率及生存率均较为理想,具有广泛的临床价
值,值得临床推广应用。
[参 考 文 献]
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[收稿日期]2014-04-21
[作者简介]张百成(1971-),男,内蒙古赤峰市人。副主任
医师。
HPLC法测定刺山柑果中的腺苷含量
聂 世 英
(内蒙古自治区妇幼保健院药剂科,内蒙古 呼和浩特 010020)
[摘要]目的 建立刺山柑果中腺苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法VP-ODS柱(150
mm×4.6 mm,5μm);磷酸盐缓冲液(PH6.5)-甲醛(17:3),检测波长260 mm,流速1.0ml/min,柱温为室
温。结果 回归方程为Y=6468x+981(Y=0.9991,n=5),平均回收率为99.5%,RSD=0.89%。结论 
本法简便,灵敏,准确,适用于刺山柑果中腺苷的含量测定。
[关键词]刺山柑果;高效液相色谱法;腺苷;含量测定
  [中图分类号]R914.1,R971.1 [文献标识码]B [论文编号]1004-0951(2014)08-0980-03
  刺山柑果主要用于治疗风寒湿痹,脾胃寒痛,浮
肿等疾病[1]。具有怯风、散寒、除湿、消肿、止痛的作
用,腺苷是刺山柑果中的主要活性成分[2],是一种很
强的心血管活性物质,能促进血管扩张,降低血压,
有镇静、催眠等作用。本文建立高效液相色谱法测
定刺山柑果中腺苷的含量,为刺山柑果的药用开发
提供实验依据。
1 仪器和试药
1.1 仪器 日本岛津高效液相色谱仪(LC-10AD
泵,SPD-10A型检测器),电子分析天平(北京赛多
利斯天平有限公司)。
1.2 试药 腺苷标准品(中国药品生物制品鉴定所
879-200001),甲醇(色谱纯,天津市光复精细化工
研究所),剌山柑果实干品(2013年6月采于甘肃
省)。
2 方法与结果
2.1 标准品溶液的制备 精密称取腺苷标准品
9.82 mg,定溶到50 ml容量瓶中,加入色谱15%甲
醇稀释至刻度,摇匀,即得(浓度为196.4 mg/L)。
2.2 供试品溶液的制备 将刺山柑果实捣碎并过
40目和60目的药典筛,取中间粉末放在真空干燥
箱内(50℃,24 h)烘干至恒重,精密称取刺山柑粉末
1.0g,置25 ml容量瓶中,加15%甲醇适量,超声处
理30 min取出放冷,加15%甲醇至刻度,用0.45
089 内蒙古医学杂志Inner Mongolia Med J 2014年第46卷第8期
DOI:10.16096/j.cnki.nmgyxzz.2014.08.001
μm滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。
2.3 精密度试验 精密吸取腺昔对照品溶液,在同
一实验条件下,重复进样5次,经测定腺苷峰面积积
分值的RSD=0.928%。
2.4 重现性试验 按供试品溶液制备的方法分别
制备5份供试样品,注入高效液相中测定其峰面积,
计算得RSD=1.07% (n=5)。
2.5 稳定性试验 精密吸取同一批次供试品溶液
5份,在常温下放置12 h,每间隔2 h测定1次,连续
共测定7次,RSD=0.96%。
2.6 回收率试验 称取已知浓度的测试样品溶液
6份精密测定,加入一定量腺昔标准品溶液,按供试
品溶液的制备方法制备,测定腺苷含量,结果见表
1。算得平均回收率为99.5%,RSD=0.89%,均符
合要求,说明该方法可以用于腺苷含量的测定。
表1 加样回收率试验结果(n=6)
样品中含量(mg) 对照品加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均值(%) RSD(%)
0.176  0.1019  0.2779  100.2
0.181  0.1019  0.2824  99.2
0.185  0.1430  0.3262  98.1  99.4  0.88
0.173  0.1431  0.3186  100.3
0.184  0.1810  0.3653  99.0
0.177  0.1809  0.3594  99.5
2.7 样品测定 吸取腺苷供试品溶液5μl,分别进
样,测定,并将其代入标准曲线回归方程分别计算
出测试样品中腺苷的浓度,结果见表2。
表2 样品含量测定
测定次数 峰面积(A) 浓度(μg/ml) 腺苷含量(mg/kg) 平均值 RSD/%
1  839107  0.003507  35.07
2  864144  0.003628  36.28
3  898752  0.003795  37.95  36.61  2.89
4  880615  0.003707  37.07
5  872312  0.003667  36.67
2.8 空白试验 取标准品、供试品溶液按上述色谱
条件各进样20μl,测定,结果表明阴性无干扰。
2.9 色谱条件 色谱柱为 VP-ODS色谱柱(150
mm×4.6 mm,5μm);流动相:磷酸盐缓冲液(pH
6.5)[取0.01 mol/L磷酸二氢钠68.5 ml与0.01
mol/L磷酸氢二钠31.5 ml,混合(pH6.5)]一甲醇
(17:3);检测波长260 mm,流速1.0ml/min,柱温
为室温。取腺苷对照品溶液和样品溶液,在上述色
谱条件下测定。精密吸取腺苷对照品2、3、4、6、8,
按上述色谱条件,分别进样20μl,测定峰面积,以峰
面积积分值(y)为纵坐标、腺苷量(x)为横坐标绘制
标准曲线,得回归方程 Y=6468X+981,r=
0.9991。结果表明腺苷出峰时间没有干扰峰出现。
3 讨 论
本实验腺苷含量测定参照了2005年版《中国药
典》中冬虫夏草的实验方法,并改进了供试品溶液的
制备方法。实验对提取溶媒水和15%、50%、90%
甲醇作了对比,认为15%甲醇是提取效果最好的溶
媒。
在实验中,我们对流动相的选择进行了比较分
析,发现参照文献[3~5]的方法,把0.1%酸酸胺-甲
醇(90:10)、乙腈-水(6:94)作为流动相,腺苷峰的
分离度不理想,把流动相改为磷酸盐冲液(ph6.5)
-甲醇(17:3),基线分离良好,效果满意。
药理研究证明[5],刺山柑有降血糖、降血脂、杀
虫、抗炎及抗氧化作用,有较广泛的药用价值,可用
于治疗痛风、风湿性关节炎等疾病[6,7]。我们采用
高效液相色谱测定剌山柑果中腺苷的含量,具有简
便易行、灵敏快速、精准度高的特点,可用于剌山柑
果的质量控制。
[参 考 文 献]
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[收稿日期]2014-06-04
帕罗西汀治疗脑梗死后抑郁的临床分析
李淑靖,胥广华
(内蒙古扎赉诺尔煤业公司总医院神经科,内蒙古 满洲里 021412)
[摘要]目的 探讨帕罗西汀治疗脑梗死后抑郁的临床疗效。方法 应用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)
评定筛查脑梗死患者,确诊抑郁患者112例,治疗组和对照组各56例,对照组给予脑梗死的基础药物治疗及
心理干预治疗,治疗组在对照组治疗的基础上给予帕罗西汀片20 mg每日1次口服,分别于给药开始前、给
药2周后及4周后再次进行评定分析,评估帕罗西汀治疗脑梗死后抑郁的疗效。结果 56例脑梗死后抑郁
的患者给予帕罗西汀治疗后病情明显改善,与对照组相比其神经功能缺损评分提高,社会生活能力明显提
高。结论 脑梗死后抑郁状态的发生是多因素作用的结果,因发病率高,影响患者神经功能恢复,重视脑梗
死后抑郁状态的发生,早期进行心理干预和药物治疗能明显改善患者的神经功能水平,提高患者的生活质
量。
[关键词]脑梗死;抑郁;帕罗西汀;心理干预;药物治疗
  [中图分类号]R971.43 [文献标识码]B [论文编号]1004-0951(2014)08-0982-02
  脑梗死后抑郁状态是脑卒中常见的并发症之
一,发病率高达34.2%~56%[1,2],机制复杂,严重
影响患者的神经功能恢复及生活质量,重者难以回
归社会,给家庭和社会带来沉重负担。本研究收集
我科于2010年10月至2013年10月住院的112例
确诊的脑梗死后抑郁患者,应用汉密尔顿抑郁量表
(HAMD)进行评估,给予帕罗西汀治疗后病情明显
改善,神经功能缺损评分(NIHSS)降低,报道如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择 2010年10月至2013年10月门
诊及住院的所有脑梗死患者,行 HAMD量表评定
后筛查出确诊的112例抑郁症患者随机分为治疗组
和对照组,每组各56例。治疗组男性22例 女性34
例;年龄48~85(55.5±6.5)岁。对照组男性20
例,女性36例;年龄在45~82(53.5±6.5)岁。脑
梗死的诊断符合1995年全国脑血管病学术会议制
定的脑血管疾病诊断标准[3],并经头颅CT或 MR
证实。抑郁状态患者均符合《中国精神疾病分类方
案与诊断标准》第3版(CCMD3)[4]制定的诊断标
准,排除发病前有相关精神病史,认知障碍、智能障
碍、记忆障碍,语言功能障碍,意识障碍、不能配合查
体,严重心、肺、肝、肾功能障碍者。
1.2 抑郁状态评定 所有入组的患者均由2名医
师行汉密尔顿(HAMD)抑郁量表测评,评定总分8
~16分为轻度抑郁,17~23分为中度抑郁,≥24分
为重度抑郁,记录分值。
1.3 药物治疗 对照组患者给予脑梗死的基础治
疗,同时给予心理干预治疗,治疗组患者除给予对照
组的治疗外同时给予帕罗西汀片20 mg每日早口
服,对照组在初次评定后的2、4周再次行 HAMD
抑郁量表测评,治疗组在给药前、给药2周后、4周
后再次行 HAMD抑郁量表测评,总结结果,治疗组
56例患者中未出现明显的药物不良反应,无中途退
出,两组在行 HAMD 测评同时行神经功能评分
(NIHSS量表评分)。
1.3 统计学分析 采用SPSS 10.0软件进行统计
学分析,数据均数±标准差(珚x±s)表示,组间比较
采用t检验,治疗前后组内比较采用配对t检验,P
<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
289 内蒙古医学杂志Inner Mongolia Med J 2014年第46卷第8期