全 文 ：刺山柑果实中脂肪酸和黄酮含量分析
蒋卉1 , 孙红专1 , 薛迎岚2 , 白红进1 ,2＊　
(1.塔里木大学生命科学学院 ,新疆阿拉尔 843300;2.塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室 , 新疆阿拉尔 843300)
摘要　[目的]分析测定刺山柑果实中脂肪酸成分和黄酮含量。[方法]用石油醚提取刺山柑果实中的粗脂肪 ,甲酯化后 ,用GC-MS法进
行分离鉴定。以甲醇为溶剂采用超声波辅助提取刺山柑果实中的黄酮化合物 ,分光光度法测定刺山柑果实中总黄酮含量。[结果]刺山
柑果实中含有 4种脂肪酸 ,其中不饱和脂肪酸占 90.09%,主要是亚油酸甲酯 ,占 49.13%。刺山柑果实中总黄酮含量为 1.218 g/kg ,平均
回收率为 102.13%。[结论]刺山柑果实中不饱和脂肪酸含量较高 ,具有较高的营养价值。采用GC-MS法分析刺山柑果实中的脂肪酸成
分 ,操作快速、简便。
关键词　刺山柑果实;脂肪酸;总黄酮
中图分类号　S 666.1　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)01-00186-02
Study on the Chemical Components of Fatty Acid and Total Flavone Content from Capparis spinosa Fruit
JIANGHui et al　(College of Life Science, Tarim University , Alar , Xinjiang 843300)
Abstract　[Objective] This study aimed to analyze the fatty acid and total flavone content of the Capparis spinosa fruit.[Methods] Using petroleum ether to
extract crude fat from the Capparis spinosa fruit and identify separately with GC-MS method after methanolysis.With ultrasonicwave as supplement , this study
used methanol solvent to extract flavone and measured its content with spectrophotometrymethod.[ Results] Four kinds of fatty acidwere identified.The con-
tent of unsaturated fatty acid was 90.09% and the content of 9 ,12-octadecadienoic acid(Z ,Z)-methyl ester was 49.13%.The content of flavones was 1.218
g/kg and average recovery was 102.13%.[ Conclusions] The content of unsaturated fatty acid in Capparis spinosa fruit was rich , which reserved to be further
exploited.Analyzing the fatty acid by GC-MC was proved to be convenient to operate and the results were accurate and reliable.
Key words　 Capparis spinosa fruit;Fatty acid;Total flavone
基金项目 　新疆生产建设兵团科技局政策成果转化与推广项目
(2006YD29);新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保
护利用重点实验室开放基金资助课题(BR0609)。
作者简介　蒋卉(1972-), 女 ,江苏徐州人 ,实验师 ,从事分析化学实
验室工作。 ＊通讯作者。
收稿日期　2008-10-23
　　刺山柑(Capparis spinosa L.)为山柑科山柑属藤本植物 ,
是荒漠 、干旱地区极有栽培价值的抗旱植物。主要分布于欧
洲 、北美 、大洋洲 、亚洲西部以及我国的新疆 、甘肃 、内蒙古 、
西藏等省区。维吾尔族民间常用其鲜果捣碎贴敷治疗关节
炎和肩周炎等疾病。国外对于刺山柑的化学成分及药理活
性研究较多[ 1-3] ,在印度 、伊朗 、北美及地中海地区等一些国
家人们将其作为调味品和开胃品使用[ 4] 。据报道研究人员
已经从 3种山柑属植物中提取并鉴定了 4种黄酮类酸水解
化合物[ 5] 。我国已有刺山柑的营养成分 、化学成分 、药理活
性和开发利用的研究报道 ,但关于新疆野生刺山柑全果脂肪
酸的分析及黄酮含量测定方面的研究较少 ,为了充分利用刺
山柑资源及揭示其药理活性 ,笔者对刺山柑果实中脂肪酸进
行分析并测定其黄酮含量 ,为进一步开发利用刺山柑提供科
学依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　试验材料。刺山柑果实于 2007年 7月采集于新疆阿
克苏 ,经鉴定为山柑科山柑属藤本植物刺山柑。
1.1.2　试剂 。丙酮 、甲醇 、氢氧化钾 、苯 、石油醚 、乙醇 、亚硝
酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、盐酸 、氨水 、镁粉 、均为国产分析纯 ,
芦丁标准品(上海山浦化工有限公司),超纯水等。
1.1.3 　 仪器。GC-MS 联用仪(Thermo Finnigan ULTRA
TRACED SQTM型 ,美国Hewlett-Packar公司);JD-500E超声波清
洗器(宁波金达超声仪器厂);T6紫外可见分光光度计(北京
普析通用有限责任公司);ZF-I 型三用紫外分析仪(上海顾村
光电仪器厂);BS1245电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限
公司);DIF-6050真空干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设
备厂);KQ-C 玻璃仪器气流烘干器(巩义英欲豫华仪器
厂)等。
1.2　方法
1.2.1　提取物的制备。刺山柑果实经阴干 、粉碎 ,过 60目筛
子 ,称取一定质量的果粉 ,以石油醚为溶剂 ,采用超声波提取
法 ,提取 3次 ,每次 1 h ,合并相应提取液 ,在 45 ℃下减压浓
缩 、真空干燥 ,获得提取物 ,密封冷藏备用。
1.2.2　脂肪酸的甲酯化。采用氢氧化钾-甲醇直接酯化
法[ 6] ,反应完后加入 10 ml超纯水 ,静置 ,待分层后取上清液 ,
丙酮稀释 10倍后 ,用无水硫酸钠干燥 ,进行GC-MS分析 。
1.2.3　脂肪酸的分析条件。①GC 条件 。TR-1MS毛细管色
谱柱(30 m×25 mm×0.25μm),进样口温度 280 ℃,柱温采用
程序升温 ,初温 160 ℃,保持 15min后以每分钟 5 ℃的速度升
至 200 ℃,保持 10min ,再以每分钟 15 ℃的速度升至 250 ℃,
保持 5 min ,载气为高纯氦气(99.999%),恒流模式 ,流速 1.0
ml/min。采用分流进样 ,分流比为 100∶1 ,进样量为 1μl ,面积
归一法定量。②MS条件。质谱传输线温度为 280 ℃,EI源 ,
分析前经FC43自动调谐 ,电子轰击能量 70 eV ,离子源温度
250 ℃,溶剂延迟 4.5 min ,扫描质量范围 50 ～ 650 。经 Wiley
(2002)质谱库和NIST(2005)质谱库检索 ,结合人工谱图识别
鉴定 。
1.2.4　黄酮的定性鉴别方法。采用试管及滤纸片预试法对
刺山柑果实中黄酮化合物定性鉴别[ 7] 。
1.2.5　黄酮的测定方法。准确称取干燥并恒重的芦丁标准
样品 5.1 mg ,用 60%的乙醇溶解并定容于 50 ml容量瓶中 ,摇
匀。芦丁的标准溶液浓度为0.102mg/ml。以芦丁为对照品 ,
选用最大吸收波长 510 nm测定刺山柑果实中总黄酮的含量 ,
根据芦丁的标准曲线来计算黄酮的含量[ 7] 。
1.2.6　标准曲线的绘制。分别精密移取芦丁标准溶液 0 、
0.50、1.00 、2.00、3.00、4.00 ml于 10 ml容量瓶中 ,分别加入
5%亚硝酸钠溶液 0.30ml摇匀 ,静置 6 min;再加 10%硝酸铝
安徽农业科学 ,Journal of Anhui Agri.Sci.2009, 37(1):186-187　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　庆 　责任校对　张士敏
溶液 0.30 ml ,摇匀 ,静置 6 min;再加 4%氢氧化钠溶液 4.00
ml ,用 60%乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,静置 12 min ,以试剂作空
白 ,于 510 nm处测吸光度 ,绘制标准曲线。
1.2.7　样品溶液的制备。准确称取烘干的甲醇提取物 1 g ,
用甲醇稀释定容于 100 ml容量瓶中 ,摇匀 ,配成 10 mg/ml的
样品溶液。
1.2.8　提取物含量的测定。精密移取样品溶液 0.50 、1.00ml
置于 10.00 ml容量瓶 ,按“1.2.6”操作测定吸光度。
1.2.9　稳定性试验。精密移取样品溶液 0.50ml于 10.00ml容
量瓶中 ,测定吸光度 ,每隔 30 min测定 1次吸光度 ,测定至 2 h。
1.2.10　回收试验。精密移取样品溶液 2.00 ml于 10.00 ml
容量瓶中 ,加入标准芦丁标准对照品 2.00 ml ,测定吸光度 。
2　结果与分析
2.1　脂肪酸的测定结果　由GC-MS 检测的刺山柑果实总
离子流图共获得 5个峰 ,经数据库检索并和标准图谱比较确
定其成分 ,共鉴定出 4种化合物 ,占总峰面积的 98.29%,总
脂肪酸含量占 98.33%。其中饱和脂肪酸有 2种 ,仅占总含
量的 8.23%,主要是硬脂酸甲酯(4.66%)和十八碳酸甲酯
(3.57%)。不饱和脂肪酸总含量为90.09%,主要是亚油酸甲
酯(49.13%)和油酸甲酯(40.96%)(表 1)。
表1　刺山柑果实中脂肪酸的组成及相对含量
Table 1　Chemical constituent and contents of fatty acid in Capparis spinosa
fruit
编号
No.
保留时间
Retention
time∥min
脂肪酸
Fatty
acid
分子式
Molecular
formula
相对含量
Relative
content∥%
相似度
Amount of
similarity∥%
1 18.67 硬脂酸甲酯 C17H34O2 　　4.66 98.12
2 22.37 亚油酸甲酯 C19H34O2 49.13 99.70
3 22.53 油酸甲酯 C19H36O2 40.96 98.90
4 23.07 十八碳酸甲酯 C19H38O2 3.57 93.50
5 23.33 未鉴定出 - 1.67 -
2.2　黄酮的定性鉴别结果　刺山柑果实黄酮成分预示结果
见表 2。由表 2可知 ,刺山柑果实甲醇提取物中含有黄酮类
化合物。
表2　刺山柑果实黄酮成分预示结果
Table 2　The preliminary test results of flavones in Capparis spinosa fruit
检测方法
Identification
method
检测试验及反应现象
Detection test and
reaction phenomena
结果
Result
B 碱液试验 ,与氨蒸汽接触变黄,移开时黄色消失 +
B 三氯化铝反应 ,天蓝色荧光斑点 +
A 盐酸-镁粉反应 ,有棕红色反应 +
　注:A 在试管中进行, B在滤纸上进行。“+”表示阳性反应 , “ -”表示
阴性反应。
　Note:Test A is done in the test tube;B is done on the filter paper.“ +”
means positive reaction, “ -” means negative reaction.
2.3　总黄酮含量的测定
2.3.1　芦丁标准曲线的绘制。根据吸光度测定结果 ,计算出
芦丁标准曲线的回归方程为 y =10.142x+0.003(R2=0.9997)。
2.3.2　提取物总黄酮含量的测定。刺山柑果实中总黄酮含
量测定结果见表 3 ,总黄酮平均含量为 1.218 g/kg。
表 3　刺山柑果实中总黄酮含量
Table 3　 The total content of flavones in Capparis spinosa fruit
编号
No.
样液∥ml
Sample
吸光度
Absorbance
浓度∥mg/ml
Concentration
黄酮含量∥mg/ g
Content of f lavone
平均值∥mg/ g
Mean value
1 0.50 0.063 0.005 9 1.18 1.218
0.50 0.060 0.005 6 1.12
0.50 0.062 0.005 8 1.16
2 1.00 0.133 0.012 8 1.28
1.00 0.134 0.012 9 1.29
1.00 0.133 0.012 8 1.28
2.3.3　稳定性试验。通过试验测得 0.5、1.0、1.5、2.0 h的吸
光度分别为 0.059、0.059、0.057、0.057。由此可知 ,该样品溶
液在 2 h基本无变化 ,在 2 h内稳定性良好。
2.3.4　回收试验 。由表 4可知 ,其平均回收率为 102.13%,
RSD为 1.18%。
表 4　回收试验结果
Table 4　The results of sample recovery test
编号
No.
样品溶液
ml
Sample
solution
标准溶液
ml
Standard
solution
测定值
mg
Measured
value
真实值
mg
Actual
value
回收率%
Recovery
平均值%
Mean
value
RSD%
1 2.00 2.00 20.890 20.204 103.40 102.13 1.18
2 2.00 2.00 20.604 20.204 101.98
3 2.00 2.00 20.406 20.204 101.00
3　结论
(1)研究分析了刺山柑果实中的脂肪酸成分 ,共鉴定出 4
种脂肪酸 ,分别是油酸甲酯 、亚油酸甲酯 、硬脂酸甲酯 、十八
碳酸甲酯。其中不饱和脂肪酸(油酸甲酯和亚油酸甲酯)含
量为 90.09%,亚油酸甲酯占 49.13%,油酸甲酯占 40.96%,
表明刺山柑果实具有良好的药用价值和食用价值。
(2)植物体内含有的黄酮类化合物对植物的生长 、发育 、
开花 、结果及防菌防病起着重要作用[ 4] 。天然来源的生物黄
酮分子量小 ,易被人体吸收 ,能通过血脑屏障 ,进入脂肪组
织 ,进而表现出多种生理和药理功能。刺山柑果实中黄酮平
均含量为 1.218 g/kg ,平均回收率为 102.13%,说明该方法可
作为测定刺山柑果实中总黄酮含量的方法。
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18737卷1期　　　　　　　　　　　　　　　　蒋卉等　刺山柑果实中脂肪酸和黄酮含量分析