全 文 ： 第 28 卷第 2 期
2009年 3月
食 品 与 生 物 技 术 学 报
Journal of Food Science and Biotechnology
Vol.28 No.2
Mar. 2009
文章编号:1673-1689(2009)02-0256-03
收稿日期:2008-01-18
作者简介:冯建光(1973-),男 , 湖南湘阴人 , 工学硕士 , 工程师 , 主要从事天然产物研究。 Email:jianguang feng@
yahoo.com.cn
山竹壳中α-倒捻子素的测定方法
冯建光 , 陈利琼
(深圳劲创生物技术有限公司 , 广东 深圳 518057)
摘 要:作者建立了山竹壳原料和山竹壳提取物中α-倒捻子素的高效液相色谱测定方法。采用
Wate rs symmetry C-18色谱柱(5μm ,D 4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-水(梯度洗脱),检测波
长 280 nm ,体积流量 1.0 mL/min ,柱温为 30 ℃。结果为α-倒念子素质量浓度在 28.952 ～ 231.6
μg/mL 的范围内呈良好线性关系(r=0.999 5),其回收率在 98.77%～ 101.39%。用高效液相色
谱法测定山竹壳原料和山竹壳提取物中α-倒捻子素的含量操作简便 、结果准确 、重复性好 ,可用于
指导原料的采购和提取物质量指标的控制。
关键词:山竹壳;高效液相色谱;α-倒捻子素
中图分类号:O 657.72 文献标识码:A
Determination of α-Mangostin Content in Mangosteen Fruit Skin
and Mangosteen Fruit Skin Extract
FENG Jian-guang , CHEN Li-qiong
(BannerBio Nutraceuticals Inc , Shenzhen 318057 , China)
Abstract:An assay method of α-mangostion content in mangosteen f rui t skin and mangosteen f rui t
skin ex t ract by HPLC was developed in this manuscript.Waters symmetry C-18 co lumn(5 μm ,D
4.6×150 mm)was used as stationary phase and methanol/water w as used as mobile phase w ith
280 nm fo r detect ion w avelength.The f low rate w as 1.0 mL/min and the column temperature
w as 30 ℃.Ex ternal standard method w as apply to quant itat ive analy sis.The linear range ofα-
mango stin w as 28.952 ～ 231.6 μg/mL (r =0.999 5) .The recovery w as f rom 98.77% to
101.39% .The method is simple , accurate , stable and reproducible , and can be applied to
contro l of mangosteen f ruit skin and mangosteen f ruit skin ex tract.
Key words:mangosteen f ruit skin , HPLC , α-mangostin
山竹是在热带气候中种植生长的长青果树 ,主
要分布于泰国 、越南 、马来西亚 、印度尼西亚 、菲律
宾等东南亚国家 ,在中国华南等地区也有栽培[ 1] 。
在东南亚传统医药中 ,山竹果皮是治疗感染 、创伤
和腹泻的良药 。研究发现 ,山竹果皮中含有大量的
氧杂蒽酮类化合物(xanthones),氧杂蒽酮类化合物
具有抗炎 、抗肿瘤 、抗氧化等活性[ 2-5] 。其中最主要
的氧杂蒽酮类化合物是α-、β-、γ-倒捻子素(mangos-
tin),藤黄酮(garcinone)等 。而山竹壳中含量最丰
富的氧杂蒽酮类化合物是α-倒捻子素 ,作者建立了
α-倒捻子素的定量分析的一种方法 。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪:美国 Waters 公司产品;甲
醇 , HPLC 级:中国医药集团上海化学试剂公司产
品;超纯水 ,美国 M illipo re 公司产品;山竹:深圳劲
创生物技术有限公司提供;α-倒捻子素对照品(纯度
96.5%):美国 Chromadex公司产品。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Waters symmetry C-18色谱柱(5μm ,D 4.6 mm
×150 mm),检测波长:λ=280 nm;体积流量:1.0
mL/min ,进样量:10μL ,柱温;30 ℃;流动相 A 为甲
醇 , 流动相B为水 ,不同时间流动相配比见表 1。
表 1 HPLC条件
Tab.1 HPLC conditions
时间/ min 体积分数/ %
A B
0 40 60
10 80 20
25 90 10
30 100 0
31 40 60
35 40 60
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品贮备液的制备 精密称取α-倒捻子
素对照品 150.0 mg(纯度 96.5%)置于 500 mL 容
量瓶中 ,加 400 mL 的甲醇溶解并超声10 min ,最后
用甲醇定溶至 500 mL 。制得质量浓度为 289.5
μg/mL 的α-倒念子素对照品贮备液。
2.2.2 山竹提取物测试样品溶液的制备 称取一
定数量已粉碎的山竹 ,加入 5倍原料体积的甲醇 ,
浸泡 2 h ,然后加热沸腾提取 2 h ,过滤获得第一次
提取液 ,料渣再加入 4 倍体积的甲醇提取第二次 ,
过滤获得第二次甲醇提取液 ,合并所有的提取液 ,
真空浓缩干燥获得山竹提取物。称取 80.0 mg 的
上述山竹提取物置于 100 mL 容量瓶中 ,加入 70
mL 左右的甲醇溶解并超声 10 min ,最后用甲醇定
溶至 100 mL 。
2.2.3 山竹原料测试样品溶液的制备 称取
1.000 g 左右已粉碎的山竹于 100 mL的容量瓶中 ,
加入 80 mL 甲醇 ,超声提取 30 min后 ,用甲醇定容
到 100 mL ,充分混匀后静置 30 min。
2.3 线性关系测定
以对照品贮备液配制质量浓度为 28.95 、
57.9 、115.8 、173.7 、 231.6 μg/mL 的α-倒捻子素
系列标准溶液。上述不同浓度的标准溶液用 0.45
μm 微孔滤膜过滤 ,分别吸取 10 μL 滤液注入高效
液相色谱仪。以对照品进样质量浓度为横坐标 ,峰
面积为纵坐标进行回归计算。回归方程为:Y =11
611X +1 157.2 ,相关系数 r=0.999 5 ,表明α-倒捻
子素在 28.952 ～ 231.6 μg/mL 的质量浓度范围内
呈良好线性关系。
2.4 稳定性试验
对同一对照品标准溶液(质量浓度为 115.8
μg/mL),每隔 2 h测定一次 ,测定结果表明平均峰
面积为 1 363 303 , RSD为 1.60%(n=7), 12 h 内
稳定 。
2.5 重复性试验
取山竹提取物适量 ,精密称定 6份 ,测定含量。
测得样品中α-倒捻子素的平均质量分数 11.20%,
RSD为 0.49%,表明本方法重复性良好。
2.6 精密度实验
精密吸取上述对照品标准溶液(173.7 μg/mL)
10 μL ,重复进样 6 次 ,峰面积平均值为 2 051 133 ,
RSD为 1.8%。结果见图 1。
图 1 α-倒捻子素对照品的 HPLC图谱
Fig.1 HPLC profile of α-mangostin standard
2.7 加样回收率试验
精密称取 6份已知含量(α-倒捻子素质量分数
为 11.20%)的山竹提取物 85.0 mg 左右 ,分别置于
100 mL 容量瓶中 ,每份样品分别加入按样品纯物
质的 80%、100%、120%的标准品物质 , 即加入
289.5μg/mL 的α-倒捻子素的对照品贮备液 26 、
33 、40 mL ,再用甲醇定容至 100 mL。测定其中α-
倒捻子素的含量 ,共测定 6次 ,结果见表 2。其回收
率在 98.77%～ 101.39%之间 ,表明本法具有良好
的回收率 。
257 第 2期 冯建光等:山竹壳中α-倒捻子素的测定方法
表 2 样品回收率试验结果
Tab.2 Results of sample recovery
样品质量/
mg
样品中标准
物质量/ mg
标准物
质量/mg
实际测得
质量/mg
回收
率/ %
85.8 9.61 7.53 16.96 98.95
85.2 9.54 7.53 16.90 99.01
86.3 9.67 9.56 19.11 99.37
87.2 9.77 9.56 19.60 101.39
84.8 9.50 11.58 20.82 98.77
84.0 9.41 11.58 21.28 101.38
2.8 样品测定
制备的溶液用 0.45 μm 过滤器过滤后精密吸
取对照品溶液和测试样品溶液各 10 μL ,分别注入
高效液相色谱仪中 ,测定其峰面积 ,结果见图 2 ～ 图
3。按照外标法计算其含量 ,结果表明山竹提取物
中α-倒捻子素的质量分数为 11.2%。山竹壳中α-
倒捻子素的质量分数为 3.8%。
3 结 语
采用高效液相色谱法可以快速有效地测定山
竹壳原料和山竹壳提取物中α-倒捻子素的含量 ,该
方法操作简便 ,结果准确 ,重复性好 ,可用于指导原
料的采购和提取物质量指标的控制。
图 2 山竹壳提取物的 HPLC图谱
Fig.2 HPLC prof ile of mangosteen fruit skin extract
图 3 山竹壳的 HPLC图谱
Fig.3 HPLC profile of mangosteen fruit skin
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(责任编辑:朱明)
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