全 文 ：HPLC法测定不同采收期小叶榕叶中异牡荆苷的含量
戴臻 ,李书渊 ,房志坚 (广东药学院 中药学院 ,广东 广州 510006)
摘要:目的 建立小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法 , 并比较不同采收期小叶榕叶的异牡荆苷的含量差异。方法 用 HPLC法
进行测定 , 流动相为甲醇-水(38∶62), 检测波长为 270 nm。 结果 不同采收期药材异牡荆苷最高含量达 0.69%, 最低为
0.18%, 7 ～ 12月份含量明显高于其他月份。结论 该方法简便 ,准确 ,重复性好 , 适于小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定。
关键词:高效液相色谱法;小叶榕叶;异牡荆苷;采收期
中图分类号:R284.1　文献标识码:A　文章编号:1006-8783(2008)03-0231-02
ContentanalysisofisovitexininFoliumFiciMicrocarpaeofdifferentgrowthstagesbyHPLC
DAIZhen, LIShu-yuan, FANGZhi-jian
(SchoolofTraditionalChineseMedicine, GuangdongPharmaceuticalUniversity, Guangzhou, Guangdong510006 , China)
Abstract:ObjectiveTodevelopaquantitativemethodtodetermineisovitexininFoliumFiciMicrocarpae, andtocomparethecontentof
isovitexininFoliumFiciMicrocarpaeofdifferentgrowthstages.MethodsHPLCmethodwasusedbyusingMeOH-H2O(38∶62)as
mobilephase.Thedetectionwavelengthwasat270 nm.ResultThehighestcontentofisovitexinfromdifferentgrowthstageswas0.
69%, andthelowestwas0.18%.Thecontentsin7 -12 mothsweresignificantlyhigherthanothermonths.ConclusionThismethod
wassimple, quickandaccuratefordeterminationofisovitexininFoliumFiciMicrocarpae.
Keywords:HPLC;FoliumFiciMicrocarpae;isovitexin
作者简介:戴臻(1983-),女 , 在读硕士研究生 , E-mail:dai
zhen@yahoo.cn;通信作者:房志坚 ,男 ,副教授 , 主
要从事中药资源与中药质量标准的研究 , Tel:
0760-88207998, E-mail:jian139@tom.com。
　　小叶榕叶 FoliumFiciMicrocarpae,又名小榕叶 、
落地金钱 , 来源于 桑科榕属植物榕树 (Ficus
microcarpaL.f.)的叶 。小叶榕叶为民间常用中草
药 ,其味淡 ,性凉 ,具有清热发表 、解毒消肿 、祛湿止
痛的功效[ 1] 。用于治疗哮喘和慢性支气管炎 ,在治
疗心血管疾病 、抗炎 、抑菌等方面也都有显著的效
果 [ 2] 。其中主要含黄酮 、三萜类和甾体化合物等化
学成分 [ 3] 。小叶榕叶中的黄酮类成分主要为异牡
荆苷(另文报道)。本实验采用 HPLC法 ,建立了小
叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法。该方法操作简
便 、快速 、重现性好 ,适用于本品的质量控制。
1　仪器与试药
美国 Waters高效液相色谱仪:Waters600型泵 ,
2487型紫外检测器 , Empower工作站 。赛多利斯电
子天平 。
小叶榕药材采自广州 ,在一年中各月份分别采
集 ,所有样品由广东药学院房志坚副教授鉴定为桑
科榕属植物小叶榕 FicusmicrocarpaL.f.的叶 。对照
品异牡荆苷为自制 ,经 UV、氢谱 、碳谱鉴定(另文报
道), 并 利用 HPLC归 一化法分 析其纯 度达
99.48%。甲醇(色谱纯 ,天津科密欧公司),其他试
剂均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
GracesmartC18色谱柱 (250 mm×4.6 mm, 5
μm);流动相:甲醇-水(体积比 38∶62);柱温:25 ℃;
流速:1.0 mL/min;检测波长:270 nm;进样量:20
μL。
2.2　对照品溶液的制备
取异牡荆苷对照品适量 ,精密称定 ,以体积分数
50%甲醇溶解 ,配制成每 1 mL含异牡荆苷 21.6 μg
的溶液 ,以此作为对照品溶液 。
2.3　供试品溶液的制备
取本品粉末(过 20目筛)约 1 g,精密称定 ,置
圆底烧瓶中 ,精密加入体积分数 50%甲醇 50 mL,称
定重量 ,加热回流 40 min,放冷 ,再称定重量 ,以体积
分数 50%甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,精密量
取续滤液 10 mL,通过聚酰胺柱(60 ～ 80目聚酰胺
231
第 24卷第 3期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.24 No.3
2008年 6月 JOURNALOFGUANGDONGCOLLEGEOFPHARMACY Jun.2008
约 2 g,装于内径 1.5 cm的小柱),以体积分数 50%
甲醇洗脱 ,洗脱液收集于 100 mL量瓶 ,并以洗脱液
定容至刻度 ,摇匀 ,即得。
2.4　线性关系考察
分别精密量取 “ 2.2”项下对照品溶液 0.25,
0.5, 1.0, 2.0, 3.5, 5.0和 10.0 mL置 10 mL量瓶 ,
加体积分数 50%甲醇稀释至刻度 ,按上述色谱条件
进样 ,测定峰面积 ,分别为 11 565、21 718、44 185、88
508、153 526、221 861、458 014,依峰面积(A)与质量
浓度 (ρ)绘制标准曲线 , 所得回归方程为 A=21
171ρ-2 585.1 , r=0.9996,表明异牡荆苷质量浓度
在 0.54 ～ 21.6 μg· mL-1范围内线性关系良好。
2.5　精密度试验
精密吸取对照品溶液 ,重复进样 5次 ,测定峰面积 ,
求得 RSD值为 0.73%,表明精密度良好 ,结果见表 1。
2.6　稳定性试验
对同一供试品溶液 ,分别于 0, 2 , 4 , 12, 24 h进
样 ,测定异牡荆苷峰面积 ,求得 RSD值为 1.84%,表
明样品在 24 h内稳定 ,结果见表 1。
2.7　重复性试验
取同一批号样品 5份 ,按供试品溶液制备方法
平行处理 ,依法测定 ,求得 RSD值为 0.42%,表明重
复性良好 ,结果见表 1。
2.8　回收率试验
精密称取已知含量的样品数份 ,精密加入一定
量的对照品溶液 , 依法测定 ,计算平均回收率为
100.51%, RSD值为 4.50%,结果见表 2。
2.9　样品含量测定
分别取不同采收期的样品按供试品溶液制备方
法处理 ,依法测定 ,计算含量 。结果见图 1及表 3。
表 1　精密度 、稳定性 、重复性试验测定结果
Tab.1　Resultsofaccuracy, stabilityandreproducibility
峰面积
1 2 3 4 5
平均值 RSD/%
精密度试验 212 061 209 895 213 569 212 072 213 721 212 264 0.73
稳定性试验 285 818 295 617 296 059 284 634 289 615 290 348 1.84
重复性试验 284 679 282 267 284 231 282 016 283 665 283 372 0.42
表 2　回收率试验测定结果
Tab.2　Resultsofrecoverytest
样品中的量 /
(μg· mL-1)
加入量 /
(μg· mL-1)
测定值 /
(μg· mL-1)
回收率 /
%
平均回收率 /
%
RSD/
%
2.431 2 1.963 6 4.453 9 103.0
2.480 8 1.963 6 4.385 7 97.01
2.493 2 1.963 6 4.491 8 101.8 100.5 4.50
2.592 4 1.963 6 4.672 3 105.9
2.443 6 1.963 6 4.305 4 94.8
A.对照品;B.样品
图 1　HPLC色谱图
Fig.1　HPLCchromatograms
(下转第 235页)
232
广东药学院学报 , 2008, 24(3)
为 3.5 μg和未检出 , 故采用本方法制备供试品
溶液 。
3.2　关于检测波长的选择
采用 SPD-M10A二极管阵列检测器 ,对蒙花苷
对照溶液和供试品溶液 ,在 200 ～ 600 nm波长处进
行扫描 ,结果在波长为 334 nm处有最大吸收 ,其他
成分没有干扰 ,故选择 334 nm作为检测波长 。见图
4、图 5。
图 4　蒙花苷对照品溶液的波长扫描图
Fig.4　UVspectrumofcontrol
3.3　流动相的选择
曾参考文献[ 2-6]分别采用不同比例的甲醇-水 、
甲醇 -水-磷酸 、甲醇-水-冰醋酸 、甲醇-0.1%磷酸 、乙
腈-0.5%磷酸作流动相 ,结果蒙花苷和本品中其他成
分未能分离。经过对不同比例的甲醇 -四氢呋喃-水
进行试验 ,结果以甲醇-四氢呋喃-水(体积比 43∶5∶
52)为流动相时 ,蒙花苷可与其他组分完全分离 ,且峰
形良好 ,该方法准确 、灵敏 ,可用于本品的质量控制。
图 5　供试品溶液的波长扫描图
Fig.5　　UVspectrumofsample
参考文献:
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京:化学工业出版社 , 2005:219.
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苷含量 [ J] .中国中药杂志 , 2005, 30(3):191-192.
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海峡药学 , 2005, 17(4):50-51.
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中药野菊花化学成分分离中的应用 [ J] .药品评价 ,
2004, 1(5):359-361.
(收稿日期:2008-03-25;修回日期:2008-05-20)
(上接第 232页)
表 3　不同月份小叶榕叶中异牡荆苷的含量
Tab.3　 ContentofisovitexininFoliumFiciMicrocarpaeof
differentgrowthstages(n=2)
月份 w/% 月份 w/%
1 0.25 7 0.61
2 0.48 8 0.57
3 0.18 9 0.67
4 0.36 10 0.69
5 0.43 11 0.54
6 0.27 12 0.69
3　讨论
3.1　异牡荆苷为小叶榕叶中含量较高的黄酮类药
效组分之一 ,故将其作为小叶榕叶质量评价的指标
成分。异牡荆苷在 270 nm处有最大吸收[ 4] ,故选择
该波长为测定的波长 。实验曾比较不同比例的甲醇
作为提取液 ,以体积分数 50%甲醇的提取液峰面积
较高 ,杂质较少 ,确定选用体积分数 50%甲醇回流
提取。提取液通过聚酰胺柱能有效去除杂质 ,减少
对色谱柱的损害 。
3.2　本试验考察了不同采收月份药材的情况 ,结果
表明 ,小叶榕叶中异牡荆苷成分的含量在 1 ～ 6月份
较低 ,在 7 ～ 12月份较高。该结果为小叶榕叶的合
理采收和利用提供了理论依据 。对于不同采收年
限 ,不同产地的药材还有待于进一步考察。
3.3　本研究建立了小叶榕叶中异牡荆苷含量的测
定方法。线性关系及重现性良好 ,方法稳定准确 ,可
作为小叶榕叶的质量控制方法 ,为进一步研究其物
质基础和作用机理打下了基础。
参考文献:
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(收稿日期:2008-04-03;修回日期:2008-05-19)
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第 3期　黄晓文 ,等.HPLC测定夏桑菊颗粒中蒙花苷的含量