全 文 ： 中国现代应用药学杂志 2009 年 6 月第 26 卷第 6 期 Chin JMAP, 2009, June Vol.26 No.6 ·499·
HPLC 测定地耳草中槲皮苷的含量

俞建平 1，陈勇 1，郑建宝 2（1.浙江省药品检验所，杭州 310004；2.浙江中医药大学中药饮片厂，杭州 310009）

摘要: 目的 测定地耳草中槲皮苷的含量。方法 采用高效液相色谱法，Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 µm)，流动相
为乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(19∶81)，检测波长为 256 nm，流速为 1.0 mL·min-1。结果 槲皮苷进样量在 0.120 4 ～
2.408 µg内呈良好的线性关系，平均回收率为 96.0％，RSD=1.3%(n=6)。 结论 该方法快速简便，稳定可靠，专属性强。
关键词:高效液相色谱法；地耳草；槲皮苷；含量测定
中图分类号：R917.101;R917.792 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2009)06-0499-02

Determination of Quercitrin in Hypericum japonicum Thunb. by HPLC

YU Jianping1,CHEN Yong1，ZHENG Jianbao2 (1. Zhejiang Institute for Drug Control, Hangzhou 310004, China; 2. TCM
for Decoction Factory of Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310009, China )

ABSTRACT: OBJECTIVE To determine the content of quercitrin in Hypericum japonicum Thunb. by HPLC. METHODS
An Agilent C18 column(250 mm×4.6 mm, 5 µm) was used. The mobile was acetonitrile-0.05 mol·L-1 potassium dihydrogen
phosphate(19∶81), and detected at 256 nm with flow rate of 1.0 mL·min-1. RESULTS A good linearity was observed for
quercitrin in the range of 0.120 4-2.408 µg. The average recovery of quercitrin was 96.0% with RSD of 1.3%(n=6).
CONCLUSION The method is convenient, stable, reliable and special for the dermination of quercitrin in Hypericum
japonicum Thunb..
KEY WORDS: HPLC; Hypericum japonicum Thunb.; quercitrin; content determination

地耳草为藤黄科植物地耳草 Hypericum
japonicum Thunb.的干燥全草。地耳草性味苦、辛、
平。有清利湿热，散瘀消肿的作用。其主要成分为
黄酮、黄烷醇及其苷类和间苯三酚衍生物，而黄酮
类成分主要为槲皮苷[1-2]。槲皮苷具有很好的抗病
毒、抗炎、利尿等作用。目前有报道测定地耳草中
黄酮苷元槲皮素的含量[3]，而关于其主要成分槲皮
苷的分析未见报道，笔者采用高效液相色谱法建立
地耳草中槲皮苷的含量测定方法。
1 仪器与试药
惠普 HP1100 系列液相色谱仪（自动进样分
析）。槲皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，
批号：111538-200403,供含量测定用）。乙腈（Merck,
色谱纯），水（重蒸水），其他试剂均为分析纯。地
耳草药材为笔者收集 5 批市场流通药材商品。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Agilent C18 (250 mm×4.6 mm，5 µm);
流动相为乙腈-0.05 mol·L-1 磷酸二氢钾溶液（19∶
81）；检测波长为 256 nm；流速为 1.0 mL·min-1；
柱温 25 ℃；样品进样量为 10 µL。理论板数按槲
皮苷峰计应不低于 3 000。对照品、样品色谱图见
图 1。


图 1 对照品(A)、样品(B)色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of reference(A) and sample(B)
2.2 供试品溶液的制备
取本品粉末 1 g，精密称定, 置具塞三角烧瓶
中，精密加入乙醇 25 mL，称重，超声处理 30 min，
放冷，称重，加乙醇补足重量，滤过，取续滤液用
微孔滤膜（0.45 µm）滤过，即得。
2.3 线性关系考察
精密称取经五氧化二磷减压干燥 24 h 的槲皮
苷对照品适量，加乙醇制成每 1 mL 含 0.120 4 mg
的溶液作为对照品溶液。
作者简介：俞建平，男，副主任中药师 Tel：(0571)86459414 E-mail：PJQYJP@126.com
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2009.06.012
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精密吸取上述槲皮苷对照品液 1，5，10，15，
20 µL，按上述色谱条件测定峰面积，以进样量(X)
对峰面积 (Y)进行线性回归，求得回归方程：
Y=2.800 3 X+1.916 2，r=1.000。槲皮苷在 0.120 4 ～
2.408 µg 内呈良好的线性关系。
2.4 仪器精密度试验
取同一供试品溶液，重复进样 6 次，测定槲皮
苷的峰面积，结果 RSD=0.9%(n=6)，表明仪器精密
度良好。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液，间隔一定时间测定 1 次，
结果峰面积 RSD=1.0%(n=6), 表明供试品溶液在
30 h 内基本稳定。
2.6 重复性试验
取同一地耳草药材样品 6 份，按“2.2”项下方
法处理，进样测定，结果槲皮苷平均含量为 0.374％，
RSD=1.3%(n =6)，表明方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验
精密称取已知含量的地耳草药材适量，精密加
入一定量的槲皮苷对照品，依本法进行含量测定并
计 算 回 收 率 ， 结 果 平 均 回 收 率 为 96.0% ，
RSD=1.3%(n =6)，结果见表 1。
表 1 回收率试验（n=6）
Tab 1 Results of recovery test（n=6）
取样量/g 样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
0.502 0 1.877 5 1.848 0 3.691 7 98.2
0.504 5 1.886 8 1.848 0 3.648 5 95.3
0.502 0 1.877 5 1.848 0 3.634 7 95.1
0.509 0 1.903 7 1.848 0 3.660 0 95.0
0.501 1
0.502 3
1.874 1
1.878 6
1.848 0
1.848 0
3.645 0
3.668 0
95.8
96.8
96.0 1.3

2.8 样品含量测定
取 5 批地耳草药材，按“2.2”项下方法处理，
分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各 10 µL，
进样，记录色谱图，测定峰面积,计算，结果见表 2。
表 2 样品测定结果(n=2)
Tab 2 Results of sample determination(n=2)
样品 来源 含量/%
1
2
3
4
5
浙江中医药大学中药饮片厂
杭州老百姓大药房有限公司
杭州天天好大药房有限公司
杭州九州大药房有限公司
杭州武林药店
0.374
0.270
0.202
0.192
0.159

3 讨论
检测波长的选择:取每 1 mL 含槲皮苷 30.1 µg
的对照品溶液, 用 UV-260 紫外分光光度计（岛津）
在 200~400 nm 处扫描，槲皮苷在 256 nm 波长处
有最大吸收，故选择 256 nm 为测定波长。
以其有效成分槲皮苷含量为指标，通过对多批
市场流通的地耳草药材测定，了解地耳草药材的内
在质量情况，发现不同批次地耳草药材的槲皮苷含
量相差较大，其原因是可能产地差异或炮制加工不
同，需进一步研究。

REFERENCES

[1] GAO Y H, YANG Y H. Chemical consitituents and pharmacy
activities of Hypericum japonicum [J]. World Notes Plant
Med(国外医药植物药分册), 2005, 20(3): 102-112.
[2] XIN Y Z，ZHANG X C，TANG W Z. The study progress on
the Chemical consitituents and pharmacy activities of
Hypericum japonicum [J]. Shandong Pharm Ind(山东医药工
业). 2003, 22(2): 28-29.
[3] TIANG G ， PENG G P. Determination of quercetin in
Hypericum japonicum Thunb. by HPLC[J]. China J Chin Mater
Med(中药材), 2004, 29(5): 476-478.
收稿日期：2008-08-11





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