全 文 ：　第 2 1卷第 1 期
2 0 0 2 年 1 月
热 带海 洋 学报
JOURNAL OF TROPICAL OCEANOGRAPHY
Vol.21 , No.1
Jan ., 2 0 0 2　
　　收稿日期:2000-07-06;修订日期:2000-12-12
　　基金项目:广东省自然科学基金项目(960012);国家自然科学基金项目(29802010);高等学校骨干教师基金项目
(415015)
　　作者简介:闫素君(1971—),女 ,内蒙古赤峰市人 ,副教授 ,博士 ,主要从事天然化合物的研究。
文章编号:1009-5470(2002)01-0092-04
厚节仙掌藻 Halimeda incrassata
化学成分研究(二)
闫素君 ,苏镜娱 ,曾陇梅 ,刘丽娟 ,王艳红
(中山大学化学与化学工程学院 ,广东广州 510275)
摘要:运用1HNMR , 13CNMR ,MS , IR等波谱方法和 GC-MS 及计算机数据库检索技术从厚节
仙掌藻 Halimeda incrassata 的乙醇提取物中分离鉴定出十六烷酸 , 十八烷酸 , 24-甲基-胆甾-
5-烯-3β-醇 , 24-乙基-胆甾-5 , 22-二烯-3β-醇 , 胆甾-5 , 24-二烯-3β-醇 , 胆甾-7-烯-3β-醇 , 胆甾-5-烯
-3β-醇和胆甾烷-3β-醇。
关键词:厚节仙掌藻 Halimeda incrassata ;脂肪酸;甾醇;色质联用;波谱分析
中图分类号:O629.21 文献标识码:A
前文报道[ 1]从采自南海西沙群岛水域的绿藻厚节仙掌藻Halimedaincrassata的乙
醇提取物中 ,分离和鉴定出海藻红素和穿贝海绵甾醇2种化合物 。我们继续对其低级性
化学成分的研究中 ,除分离得到纯化合物正十六烷酸(1)和正十八烷酸(2),又应用GC-
图 1 化合物(1—8)的结构
Fig.1 Structures of compounds(1—8)
MS-计算机数据库检索结合质谱裂解
规律鉴定出 6 个较微量的甾醇化合
物 , 分别为 24-甲基-胆甾-5-烯-3β-醇
(3), 24-乙基-胆甾-5 , 22-烯-3β-醇(4),
胆甾-5 , 24-烯-3β-醇(5), 胆甾-7-烯-3-
醇(6),胆甾-5-烯-3β-醇(7),以及胆甾
烷-3β-醇(8)(图 1),丰富了厚节仙掌藻
甾醇化合物的研究内容[ 2—4] 。
1 实　验
1.1 实验材料与仪器
材料 厚节仙掌藻 Halimeda incrassata 采自南海西沙群岛 ,由中国科学院海洋研
究所夏邦美教授鉴定 ,标本存放于中山大学天然产物研究室 。
仪器 国产 5X显微熔点测定仪(温度计未校正);NICOLET 5DX-FTIR 光谱测定
仪;JOEL 90Q核磁共振仪(TMS 做内标);VG ZAB-HS 型质谱仪;美国惠普公司色质联用
仪(HP6890气相色谱仪 , HP5973质谱检测仪器 ,HPG1701 色谱工作站),计算机数据库
检索:标准质谱库 NBS75K 。
1.2 提取与分离
厚节仙掌藻(干重 1.8kg)用 95%乙醇浸提 3次后浓缩 ,浓缩液依次以石油醚 、二氯甲
烷 、正丁醇萃取 。从石油醚萃取液中得到穿贝海绵甾醇[ 1] 。将二氯甲烷萃取液(13g)进行
减压硅胶柱层析 ,以石油醚/二氯甲烷等于 9/1 , 8/2 , 7/3 , 5/5 , 7/3和二氯甲烷依次洗
脱 ,得到 A—F 6部分。E , F 部分经柱层析及重结晶分别得到化合物海藻红素[ 1] ,化合物
1(20mg)和 2(20mg );B部分经多次柱层析再以乙酸乙酯重结晶得到无色晶体混合物
(30mg),该混合物用常规方法很难得到纯化合物 ,因而经 GC-MS 计算机数据库检索鉴定
为化合物 3—8(比例 )。
1.3 化合物的物理性质和波谱数据
化合物 1:白色粉末 , m.p.54—55℃;IR(KBr压片 , υ, cm-1):3000(s), 2917(s),
2846(s),1700(s), 1468(m), 1300(m),941(m),723(m);FAB MS(m/ z , %):257(24),239
(27);13 CNMR(δ, ppm , 氘代丙酮为溶剂):174.6(s), 34.2(t), 32.7(t), 31.5(t),30.2
(t ,多个碳),30.0(t ,多个碳),25.7(t), 23.4(t), 14.3(q);1H NMR(δ,ppm;J ,Hz;氘代丙
酮为溶剂):2.27(2H , t ,6.3), 1.67(1H , s),1.29(26个氢 , s),0.88(3H , t , 3.0)。
化合物 2;白色粉末 , m.p.97—98℃;IR(KBr压片 , υ, cm-1):3000(宽而强), 2917
(s),2846(s),1700(s),1468(m),1300(m),941(m), 723(m);1H NMR(δ,ppm;J ,Hz;氘代
丙酮为溶剂):2.27(2H , t ,6.3),1.74(1H , s), 1.29(30个氢 , s),0.88(3H , t , 3.0);EI MS
(m/ z , %):284(3),256(29),213(13),185(8), 157(8),129(22)。
化合物 3—8:无色针状晶体 ,m.p.126—134℃;IR(KBr压片 , υ, cm-1):3437(vs),
2938(s),2868(s), 1651(w),1461(m),1377(m), 1060(m);1HNMR(δ,ppm ,氘代丙酮为溶
剂):5.36(m),3.49(m),1.56(s),1.01(s),0.68(s)。
GC-MS条件:色谱柱:HP-5MS(30m×0.25mm ×0.25nm),柱温起始温度:100℃,进
样温度:280℃,程序升温 10℃·min-1;终止温度:300℃;载气:He 气 ,流速:1ml·min-1;
MSD检测器温度 280℃;EI 70eV;扫描离子质量范围 50—500aum 。各化合物衍生化(三
甲基硅烷化)后质谱数据(m/ z , %)如下:
化合物 3:472(M+72 , 11), 382(M -18 ,23.6), 367(M -33 ,12),343(27.8), 255(273
-18 ,6), 145(8.6), 95(10.8),73(10.6)。
化合物 4:484(M+72 , 3.4),394(M-18 ,4),355(2.2),281(2.9), 255(273-18 , 5),
207(5.3),129(6.8),83(9.4)。
化合物 5:456(M+72 , 3.6),386(M+72-18 ,12), 365(5.5),341(9), 296(8.4),281
(7.9),253(6.8),207(6),145(7.9),129(26),95(10.8),73(12.6)。
化合物 6:458(M+72 , 18), 443(M +72-15 ,5.2),353(M -18-15 ,3.8),281(3.2),
255(273-18 ,17.8),229(4.5),213(231-18 ,7.6)。
化合物 7:458(M+72 , 4.8),443(M+72-15 ,1.6),368(M -18 ,8.4),353(M -18-
15 ,4.8),329(10), 275(M -18-93 ,1), 247(M -18-121 , 1), 213(231-18 , 1.4), 129
(8.8),95(3),73(3.2)。
93　第 1 期　　　　　闫素君等:厚节仙掌藻 Halimeda incrassata 化学成分研究(二)
化合物 8:460(M+72 , 2.5),445(M+72-15 ,4.4),412(M +72-33 , 1.3),370(M-
18 ,1.5), 355(M -33 ,2.8),306(1.8),215(6),95(2)
2 结果与讨论
化合物 1:白色粉末 ,熔点 m.p.54 —55℃, Rf=0.47(展开剂:石油醚/丙酮=5/1)。
FAB MS 257(m/ z ,M +1)确定该化合物的分子量为 256 。结合1HNMR , 13CNMR信息可
确定该化合物的分子式为 C16H32O2 。
　　13C NMR(δ, ppm)174.6 , 1H NMR(δ, ppm)1.67(1H , s ,活泼氢), IR(υ, cm-1)3000
(s),1700(s), 941(s)说明分子中存在 -COOH;吸收峰 723(vs)说明分子中存在一个长直
链烷基;1H NMR(δ, ppm)0.88(3H , t)及13C NMR 、DEPT(δ, ppm)14.3(q)以及23.4—
34.2(t ,多个碳)显示分子中含有一个甲基和多个亚甲基 ,由此表明该化合物为直链化合
物;NMR(δ, ppm)2.27(2H , t , 6.3)和 34.2(1C , t)为与羰基碳相连的亚甲基氢及碳的信
号[ 5] 。
综合以上分析结果 ,鉴定化合物 1是已知化合物正十六烷酸 ,其薄层层析的 Rf值与
标准品正十六烷酸完全一致。该化合物在厚节仙掌藻的化学成分研究中未见有报道 。
图 2 化合物 3—8的总离子流图
F ig.2 Diagram of to tal ion cur rent of compounds 3—8
化合物 2:白色粉末 , 熔点 m.p.
97 —98℃,薄层层析显示 Rf=0.3(展
开剂:石油醚/丙酮=6/1),EIMS(m/
z , M+)284 表明化合物 2 分子量为
284。比较化合物 1 与化合物 2 的
IR , 1HNMR谱图发现两者数据极其
相近 ,判断二者为同类化合物;再根据
质谱数据推定化合物 2 是比化合物 1
多两个亚甲基的脂肪酸(-CH2 ×2)。
该化合物与标准品十八烷酸的薄层层
析 Rf值完全一致 ,从而确证化合物 2
为已知化合物十八烷酸 。该化合物在
厚节仙掌藻的化学成分研究中未见有
报道。
化合物 3 —8:无色针状晶体 ,熔
点 m .p.126—134℃。 Liebermann-
Burchard反应呈阳性 ,初步确定为甾
醇类物质 ,由于熔点间度很大 ,推断其
为甾醇混合物 。总离子流谱图见图
2。该混合物的 IR (υ, cm-1)3437
(br.),1060表明仲羟基的存在;1651 ,
94热 带 海 洋 学 报 第 21 卷　
955则说明存在取代碳碳双键 , 1HNMR(δ,ppm)中 5.36(m)为烯质子的信号 ,0.68(s),
1.01(s)的单峰分别是甾醇化合物 18 ,19位角甲基的特征信号[ 6] 。此混合物的薄层层析
结果为一个椭圆形的点 ,通过常规的分离方法很难得到纯的甾醇化合物 ,因此将其衍生化
后进行 GC-MS 计算机数据库检索分析。根据检索结果 ,结合质谱裂解规律[ 7] ,确定了该
混合物中含有的六个微量已知甾醇化合物(表 1)。相对含量最高的峰(保留时间:23.
25min)为该海藻中含有的主要甾醇穿贝海绵甾醇[ 4] 。
表 1 化合物(3—8)保留时间及相对含量
Tab.1 Retention time and relative content of compounds(3—8)
化合物 保留时间/min 相对含量/ % 化合物 保留时间/min 相对含量/ %
3 22.237 7.6 6 21.790 5.9
4 22.529 3.0 7 21.308 22.6
5 22.179 8.0 8 21.394 11.7
参考文献:
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CHEMICAL CONSTITUENTSOF ALGA
HALIMEDA INCRASSATA (Ⅱ)
YAN Su-jun , SU Jing-yu , ZENG Long-mei , LIU LI-Juan , WANG Yan-hong
(Col lege of Chemist ry and Chem ical Engineer ing , Zhongshan Univ., Guangzhou 510275 , China)
Abstract:Eight compounds , hexadecanoic acid , octadecanoic acid , 24-methyl-cholest-5-en-
3β-ol , 24-ethyl-cholest-5 , 22-dien-3β-ol , cholest-5 , 24-dien-3β-ol , cholest-7-en-3β-ol ,
cholest-5-en-3β-ol and cholestan-3β-ol , were isolated and identified f rom the green alga Hal-
imeda incrassata on the basis of spectroscopy methods.
Key words:Halimeda incrassata;fatty acid;sterol;GC-MS;spectroscopy
95　第 1 期　　　　　闫素君等:厚节仙掌藻 Halimeda incrassata 化学成分研究(二)