全 文 :沿海滩涂甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm.色素的抗氧化性研究
刘兴宽1 , 郁建平2 (1.江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室 ,江苏盐城师范学院生命科学与技术学院 ,江苏盐城 224002;2.贵
州大学生化研究所 ,贵州贵阳 550025)
摘要 [目的]为沿海滩涂甘紫菜的进一步研究与开发应用提供科学依据。[方法]采用乙醇浸提法提取沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素 ,
分别用 Fenton反应法和DPPH法测定该色素对羟自由基、DPPH·的清除率 ,研究其抗氧化性。[结果]当沿海滩涂甘紫菜藻体色素、BHT
的浓度为 0.10 g/L时 ,其对羟自由基的清除率分别为 57.2%和 67.8%。沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素对 DPPH·有较明显的清除作用 ,
且其清除作用在 0.05~ 0.80 g/ L范围内随浓度的增加而增强。0.10 g/L的BHT对DPPH·的清除率为 75.8%。当沿海滩涂甘紫菜干燥藻
体色素、BHT的浓度均为 0.10 g/L时 ,色素对羟自由基 、DPPH·的清除率分别是BHT的 84.4%和 86.0%。[结论]沿海滩涂甘紫菜干燥藻
体色素具有较强的抗氧化活性。
关键词 沿海滩涂甘紫菜;色素;抗氧化性
中图分类号 Q949.29+2.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2008)27-11809-02
Study on Oxidation Resistance of Pigment from Porphyra tenera Kjellm in Coastal Beach
LIU Xing-kuan et al (Jiangsu Provincial Key Laboratory of Coastal Beach Biological Resources and Environmental Protection , School of Life Science
and Technology , Yancheng Normal College, Yancheng, Jiangsu 224002)
Abstract [ Objective] The aim was to provide the scientific basis for the further study and the development and utilization of Porphyra tenera in coastal
beach.[Method] The dried frond pigment was extracted from P.tenera in coastal beach by ethanol extraction.The clearance rates of the pigment on hy-
droxyl radical and DPPH· were detected by Fenton reaction and DPPH·methods and its oxidation resistance was studied.[ Result] When the concn.of
frond pigment from P.tenera in coastal beach and the BHTwere 0.10 g/L, the clearance rates of the pigment and BHT on hydroxyl radical were 57.2%
and 67.8%, resp.The dried frond pigment of P.tenera in coastal beach had obvious scavenging effect on DPPH· and the scavenging effect increased
with the increase of the concn.in the range from 0.05 g/L to 0.80 g/ L.The clearance rate of 0.10 g/L BHT on DPPH·was 75.8%.When the concn.
of the dried frond pigment from P.tenera in coastal beach and the BHT were all 0.10 g/L, the clearance rates of the pigment on hydroxyl radical and
DPPH·were 84.4%and 86.0% of BHT, resp.[ Conclusion] The dried frond pigment from P.tenera in coastal beach had stronger oxidation resistance.
Key words Porphyra tenera Kjellm in coastal beach;Pigment;Oxidation resistance
基金项目 江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室资助项
目(JLCBE06027);江苏省盐城师范学院引进人才科研启动
基金资助项目。
作者简介 刘兴宽(1969-),男 ,江苏东海人 ,硕士 ,讲师 ,从事天然活
性成分的分离及检测研究。
收稿日期 2008-07-04
甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm.属红藻门红毛菜科 ,生于
海湾中潮带岩石上 ,分布于渤海至东海 ,有大量栽培。其主
要供食用 ,入药有软坚散结 、化痰利尿和降血脂作用[ 1] 。近
年来的研究表明 ,紫菜具有抗衰老 、抗肿瘤等多方面的生物
活性。探讨紫菜的药用价值 ,从紫菜中开发出具有独特活性
的海洋药物和保健食品 ,将是紫菜研究利用的新方向[ 2] 。笔
者研究了沿海滩涂甘紫菜色素的抗氧化性 ,旨在为沿海滩涂
甘紫菜的进一步研究与开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品。2007年 7月采自盐城射阳一紫菜种植户田间 ,
经盐城师范学院生命科学与技术学院于延球教授鉴定为红
藻门红毛菜科沿海滩涂甘紫菜 Porphyra tenera Kjellm.。将新
鲜藻体于日光下晒干 ,粉碎 ,样品置于 105 ℃恒温干燥 2 h
备用。
1.1.2 主要仪器与试剂。SartoriusBS210S电子天平(北京塞
多利斯天平有限公司);RE-52C 型国产旋转蒸发仪(上海亚
荣);US-VIS916型紫外可见分光光度计(澳大利亚GBC 公
司);ZK-82A型真空干燥箱等。
二苯代苦味酰基(DPPH)(Sigma公司),所用试剂均为分
析纯。水为二次蒸馏水 。
1.2 方法
1.2.1 沿海滩涂甘紫菜藻体色素的提取。通过对沿海滩涂
甘紫菜色素提取条件的优化 ,得到最佳提取方案 。称取已粉
碎 、干燥的甘紫菜藻体 50.0 g用浓度 75%的酒精 600 ml ,在
40 ℃条件下浸泡 48 h ,抽滤 ,保存滤液。滤渣用同样方法浸
提 2次 ,抽滤 ,合并滤液 ,减压浓缩。将色素浓缩液真空干
燥 ,得亮绿色色素粉末 ,提取率为 6.7%。
1.2.2 沿海滩涂甘紫菜藻体色素色谱性质的测定 。称取
0.010 0 g沿海滩涂甘紫菜藻体色素用无水乙醇配制成浓度
0.100 g/L色素乙醇溶液 ,以溶剂为参比 ,在紫外可见分光光
度计上进行 200~ 900 nm 范围内的扫描 ,得到甘紫菜藻体色
素的最大吸收峰为 335 、415、666 nm。
1.2.3 沿海滩涂甘紫菜藻体色素抗氧化活性的测定。
1.2.3.1 清除羟自由基的测定。采取Fenton反应法。按照
文献[ 3]方法进行 ,计算沿海滩涂甘紫菜藻体色素对羟自由
基的清除率。由于合成的常用食品抗氧化剂 2 ,6-二叔丁基
对甲酚(BHT)对羟自由基的清除作用已得到证实[ 4-5] 。因
此 ,按同样方法测定 BHT对羟自由基的清除率 ,以利于比较 。
清除率计算公式:
清除率=(A样-A损)/(A未损-A损)×100%
1.2.3.2 清除 DPPH·的测定。用二苯代苦味肼基自由基
法[ 6-7]测定沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体色素的抗氧化性 。
在最大波长处 ,于直径 1 cm比色皿中 ,各加入 2.5 ml浓度2.5
×10-4 mol/L DPPH 溶液 ,0.5 ml试样 ,甲醇调O测定各吸光
度(A),总体积 3.0 ml。每一吸光度平行测 2次 ,取其平均
值。按同样方法测定BHT对自由基DPPH·的清除率 ,以利于
比较 。
(1)DPPH溶液的配制。以无水甲醇为溶剂配制成浓度
为 2.5×10-3 mol/L的储液 ,存放于冰箱 ,临用时将储液以同
一种溶剂(甲醇)稀释至 2.5×10-4mol/L。
(2)试样溶液的配制 。试样为沿海滩涂甘紫菜的干燥藻
安徽农业科学, Journal of Anhui Agri.Sci.2008, 36(27):11809-11810 责任编辑 张杨林 责任校对 张士敏
体色素 ,以无水甲醇为溶剂配制成浓度分别为 0.05、0.10、
0.20、0.40、0.80 g/L的试样溶液 。
清除率计算公式:
清除率(K)=1-[(Ai -Aj)/Ac] ×100%
2 结果与分析
2.1 沿海滩涂甘紫菜藻体色素清除羟自由基的测定结果
在Fe2+邻二氮菲溶液最大吸收波长处测定的色素乙醇溶液
清除羟自由基的吸光度结果见表 1。
表 1 沿海滩涂甘紫菜藻体色素清除羟自由基的测定结果
Table 1 The determination results of scavenging hydroxyl radical by the
pigments from Porphyra tenera in the coastal beach
测定试剂
Determination reagents
参比溶液
Reference solution
吸光度测定值
Determination value
of absorbency
Tris-HCl 缓冲液+Fe2+-邻二氮菲+H2O2+色素溶液
Tris-HCl 缓冲液+色素溶液 A样=0.950
Tris-HCl 缓冲液+Fe2+-邻二氮菲+H2O2 Tris-HCl缓冲液 A损=0.148
Tris-HCl 缓冲液+Fe2+-邻二氮菲 Tris-HCl缓冲液 A未损=1.55
计算得到当沿海滩涂甘紫菜藻体色素的质量浓度为
0.10 g/L时 ,羟自由基的清除率为 57.2%。用同样方法测定
和计算得到同浓度的BHT清除羟自由基的清除率为 67.8%。
同等条件下 ,沿海滩涂甘紫菜藻体色素对羟自由基的清除率
是常用食物抗氧化剂 BHT的 84.4%。
2.2 沿海滩涂甘紫菜藻体色素清除 DPPH·测定结果 试验
结果表明 ,沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体色素浓度为 0.05、
0.10、0.20、0.40、0.80 g/L时测得清除率(K)分别为 55.4%、
65.2%、71.2%、78.5%和 85.4%。可见 ,沿海滩涂甘紫菜的
干燥藻体色素对 DPPH·有较为明显的清除作用 ,且其作用在
0.05~ 0.80 g/L浓度范围内随浓度的增加而增强。同时 ,在
BHT质量浓度为 0.10g/L时 ,对DPPH·清除率为 75.8%。同等
条件下 ,沿海滩涂甘紫菜藻体色素对DPPH·的清除率是常用食
物抗氧化剂BHT的 86.0%。
3 结论
试验结果表明 ,沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体色素有较强
的抗氧化活性。当沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体色素与常用
食物抗氧化剂BHT的质量浓度均为 0.10g/L时 ,甘紫菜的干
燥藻体色素清除羟自由基的清除率是 BHT 的 84.4%;对
DPPH·的清除率是BHT的 86.0%。甘紫菜色素清除 DPPH·
的能力随着浓度的增大而增强。因此 ,甘紫菜的干燥藻体色
素具有多功能的特点 ,不仅可以用作食物着色剂 ,还是有待
于开发的抗氧化剂和抗衰老保健品 。
参考文献
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生态环境 ,改善基地原有绿化单一 、植被种类匮乏的不利条
件 ,在绿化配置中 ,力图通过引入丰富的地方性植物的种类 ,
加大乔灌木的栽植量 ,采用成片 、成林的植物栽种方式 ,以形
成稳定的植被群落 ,并考虑不同季节开花植被的搭配 ,使四
季有不同的观赏景观。沿道路两边的绿化流线型布置 ,并注
重种植的乔 、灌 、草的层次 ,加大带状绿化的宽度 ,使其真正
成为联系各个绿地斑块的绿色廊道 ,有助于形成整个生态绿
地系统的网络结构。
2.4.2.2 水环境的优化设计。结合基地原有的水域 、地表径
流 、汇水区域等 ,方案力求通过组织使之形成一个整体 、有效
的水环境系统。采用风机为动力通过人造沟溪将湖面水提
升至南面石壁流踪景区 ,然后水依南高北低的地势从南向北
流动 ,从而形成流动 、循环有序的水系统。
对于北面水域的驳岸线进行一定的改造。驳岸的设计
不再是单纯的水泥堤坝 ,而是将其作为次一级生态系统 ,采
用自然曲线形式 ,草坡自然伸入水中 ,底下挡土墙的石块或
水泥砌块中设置一定的植物种植穴 ,保证植物从陆生到水生
的生存序列。
人造溪流周边选择乡土植物形成水生-沼生-湿生-
中生的植物群落带 ,让远离自然 、久居城市的人们能有机会
欣赏到自然生态和野生植物之美。同时随着水际植物群落
的形成 ,使许多野生动物和昆虫也得以栖息 。
3 结语
随着我国城市化进程的加快 ,城市边缘区的生态环境也
面临着前所未有的冲击 ,加强城市边缘区休闲环境的生态规
划建设 ,可将保护和开发相结合 ,既满足市民休闲活动的需
求 ,也保障环境资源的可持续利用 ,对促进生态环境的良性
发展 ,推动社会 、经济 、环境的协调发展发挥积极的作用。
参考文献
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11810 安徽农业科学 2008年