全 文 ：· · 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(7)907
Food Eng, 2010, 96(2): 222—228.
[10] Etti CJ, Yusof YA, Chin NL, et al. Flowability properties of
Labisia pumila herbal powder [J]. Agri Agri Sci Proced,
2014, 2: 120—127.
[11] Abebe W, Ronda F. Flowability, moisture sorption and
thermal properties of tef [Eragrostis tef (Zucc.) Trotter]
grain fl ours [J]. J Cereal Sci, 2015, 63: 14—20.
[12] Schüle S, Schulz-Fademrecht T, Garidel P, et al. Stabilization
of IgG1 in spray-dried powders for inhalation [J]. Eur J
Pharm Biopharm, 2008, 69(3): 793—807.
[13] Freeman R. Measuring the fl ow properties of consolidated,
conditioned and aerated powders — A comparative study
using a powder rheometer and a rotational shear cell [J].
Powder Technol, 2007, 174(1-2): 25—33.
[14] Abdullah EC, Salam AM, Raman AAA. Cohesiveness and
flowability properties of silica gel powder [J]. Phys Intl,
2010, 1(1): 16—21.
滇白珠糖浆中儿茶素和滇白珠苷 A的 HPLC测定
孙 佳1,2，孙 绪1,3，王 霞1,3，陈青凤1,2，李勇军1,3*
(1. 贵州医科大学药学院，贵州贵阳 550004；2. 贵州省药物制剂重点实验室，贵州贵阳 550004；
3. 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心，贵州贵阳 550004)
摘要：建立了高效液相色谱法测定滇白珠糖浆中的儿茶素 (1) 和滇白珠苷 A(2)。使用 Aglient Eclipse XDB-C18色谱柱，
流动相为甲醇∶ 0.1％磷酸，梯度洗脱，检测波长 230 nm。1、2在 0.01～ 0.20 g和 0.09～ 1.80 g范围内线性关系良好，
平均回收率为 98.86％和 95.98％，RSD为 1.8％和 1.6％。
关键词：滇白珠糖浆；儿茶素；滇白珠苷 A；高效液相色谱；含量测定
中图分类号：TQ460.7+2；O657.7+2 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2016)07-0907-03
DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2016.07.019
收稿日期：2015-12-21
基金项目：贵州省科技厅项目(20134001和20135062)、贵州省教育
厅项目(201304)、国家科技支撑计划项目(2013BAI11B01)
作者简介：孙 佳(1986—)，女，硕士，讲师，从事中药质量标准
研究。
E-mail：sunjia1202@126.com
通信联系人：李勇军(1973—)，男，硕士，教授，从事中药新药、
中药药效物质基础及质量标准研究。
Tel：0851-86908468
E-mail：liyongjun026@126.com
Determination of Catechin and Gaultheroside A in Dianbaizhu Syrup by HPLC
SUN Jia1,2, SUN Xu1,3, WANG Xia1,3, CHEN Qingfeng1,2, LI Yongjun1,3*
(1. School of Pharmacy, Guizhou Medical University, Guiyang 550004; 2. Guizhou Provincial Key Lab. of Pharmaceutics, Guiyang 550004;
3. Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM, Ministry of Education, Guiyang 550004)
ABSTRACT: An HPLC method was established for the determination of catechin (1) and gaultheroside A (2) in
Dianbaizhu syrup. An Aglient Eclipse XDB-C18 column was used, with the mobile phase of methanol∶0.1％ phosphoric
acid by gradient elution, at the detection wavelength of 230 nm. The linear ranges for 1 and 2 were 0.01—0.20 g and
0.09—1.80 g. Their average recoveries were 98.86％ and 95.98％, with RSDs of 1.8％ and 1.6％, respectively.
Key Words: Dianbaizhu syrup; catechin; gaultheroside A; HPLC; determination
滇白珠糖浆是由透骨香单味药材加工制备的
糖浆剂，具有祛湿化痰、活血化瘀的功效，用于眩
晕痰瘀交阻症，症见头晕、胸闷、腹胀、舌暗苔腻
等 [1]。本品对于眩晕，特别是椎 -基底动脉供血
不足性眩晕有较好疗效 [2]。国家药品标准WS3-
055(Z-012) -2006(Z) 中以 UV法测定总黄酮控制
其质量，缺乏专属性的含量测定项目。文献报道了
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(7) · ·908
HPLC法测定其中的水杨酸 [3]。参考相关文献 [4—7]，
本课题组从透骨香药材乙醇提取物的正丁醇萃取有
效部位分离得到含量较高的活性成分儿茶素 (1) 和
滇白珠苷 A(2)。据此，本研究建立了 HPLC法同
时测定滇白珠糖浆中的 1和 2，旨在为本品的质量
控制提供参考。
1 仪器与试药
Prominence LC-20A型高效液相色谱仪，包括 CBM-
20Alite型系统控制器、LC-20AD型二元梯度溶剂输送泵、
SPD-20A型紫外检测器、SIL-20A型自动进样器和 CTO-
10ASvp型柱温箱 (日本 Shimadzu公司 )。
1、2对照品 [ 自制，HPLC纯度 ( 峰面积归一化法 )
大于 98％ ]；滇白珠糖浆 (贵州同济堂制药有限公司，规格
100 ml，批号见表 1) ；甲醇为色谱纯，水为纯净水，其他
试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱 Aglient Eclipse XDB-C18柱 (4.6 mm×
150 mm，5 m) ；流动相 甲醇 (A) ∶ 0.1％磷酸
(B)，梯度洗脱 (0→30 min，A∶ B=20∶ 80～
26∶ 74) ；流速 1.0 ml/min；柱温 35 ℃；检测波长
230 nm；进样量 10 l。
2.2 溶液配制
对照品溶液：精密称取 1、2对照品 5和 3 mg，
各置 25和 10 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容，制成 1、
2浓度为 0.2和 0.3 mg/ml的对照品贮备液。准确量
取上述 1、2对照品贮备液 1和 6 ml，置同一 20 ml
量瓶中，加甲醇定容，制得 0.01和 0.09 mg/ml的 1、
2对照品溶液。
供试品溶液：精密量取滇白珠糖浆 5 ml，置
100 ml回流瓶中，精密加入蒸馏水 20 ml，用乙酸
乙酯回流提取 0.25 h(25 ml×5)，合并乙酸乙酯提取
液，蒸干，剩余物用适量甲醇溶解，转移至 5 ml量
瓶中，加甲醇定容，摇匀，离心 (9 100×g)10 min，
取上清液，即得。
阴性对照溶液：按本制剂的处方、工艺制成缺
透骨香药材的阴性样品，按供试品溶液制备方法制
成阴性对照溶液。
2.3 系统适用性试验
取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，
分别进样，记录色谱图。可见1、2与其他峰分离良好，
其他成分均不干扰测定。见图 1。
2.4 线性试验
精密吸取 1、2对照品溶液 1、2、4、8、16和
20 l分别进样测定，记录色谱图。以峰面积 A为
纵坐标，进样量 m为横坐标，进行线性回归，得
1、2的回归方程 A=1.13×105m-1.06×105(r=0.999 9)
和 A=6.95×105m-6.51×105(r=0.999 8)。1、2分别在
0.01～ 0.20 g和 0.09～ 1.80 g范围内线性关系
良好。检测限(LOD)为5和10 g/ml，定量限(LOQ)
为 10和 20 g/ml。
2.5 精密度、重复性和稳定性试验
取同批供试品溶液，连续进样6次，测定峰面积。
结果 1、2峰面积的 RSD为 0.5％和 0.6％。
A：供试品溶液，B：对照品溶液
1-1；2-2
图 1 典型色谱图
Fig.1 Typical Chromatograms
· · 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(7)909
取同批滇白珠糖浆，共 6份，按“2.2”项下方
法制备供试品溶液，分别进样测定。结果 1、2含
量的 RSD为 1.9％和 1.7％。
按“2.2”项下方法制备供试品溶液，分别于 0、
2、4、8、12和 24 h进样测定。结果 1、2峰面积
的 RSD为 1.6％和 1.7％，表明供试品溶液在 24 h
内稳定。
2.6 回收率试验
精密量取已知含量的滇白珠糖浆 2.5 ml( 含 1
12.7 g/ml，2 87.5 g/ml)，共 6份，各置 100 ml
回流瓶中，分别精密加入 1、2对照品溶液适量 (相
当于 100％供试品溶液含量 )。按“2.2”项下方法
制备供试品溶液，分别进样测定，计算得 1、2的
回收率为 98.86％和 95.98％ (n=6)，RSD为 1.8％
和 1.6％。
2.7 样品测定
取 3批滇白珠糖浆，按“2.2”项下方法制备供
试品溶液，分别进样测定。结果见表 1。
表 1 样品含量测定结果 /g·ml-1(n=2)
Tab.1 Determination Results of Samples/g·ml-1(n=2)
批号 1 2
20120801 12.7 87.5
20120901 18.9 126.4
20121102 16.1 114.2
3 讨论
试验选择以甲醇、水直接稀释离心提取样品，
但进样后色谱图基线不平稳。选用乙酸乙酯萃取富
集样品，产生了大量的乳化层，且长时间放置也不
能消除。经试验，最终选择用水稀释样品后加乙酸
乙酯多次回流提取样品，结果表明本法简便可行。
根据文献报道 [4]，试验前期确定测定其中的 3
个主要有效成分，即 1、白珠树苷和 2。但在试验
过程中观察到，白珠树苷是水杨酸甲酯苷，在滇白
珠糖浆制备过程中已被水解，在制剂中未能检测到。
因此本研究选择含量较高的专属性活性成分 1和 2
进行控制。
采用光电二极管阵列检测器 (PDA) 在 190～
400 nm进行 UV扫描，1、2在 230 nm处均有较大
吸收。且试验结果显示，选用该波长，色谱图基线
平稳。
参考文献：
[1] 国家药典委员会 . 新药转正标准第 72册 [S] . 北京 : 中国
医药科技出版社 , 2009: 21—22.
[2] 李 琰 , 管得宁 , 王 翀 , 等 . 滇白珠糖浆治疗痰瘀交阻型眩
晕临床观察 [J]. 上海中医药杂志 , 2008, 42(5): 18—19.
[3] 冯宝琦 , 周 宁 . 高效液相色谱法测定滇白珠糖浆中水杨酸
含量 [J]. 贵州医药 , 2006, 30(8): 732.
[4] 熊玉兰 , 肖 冰 , 马小军 , 等 . 滇白珠抗风湿性关节炎活性
成分研究 [J]. 中国中药杂志 , 2009, 34(19): 2516—2519.
[5] 张治针 , 果德安 , 李长龄 , 等 . 滇白珠抗菌抗炎和镇痛活性
的实验研究 [J]. 西北药学杂志 , 1999, 14(2): 60—61.
[6] 陈青凤 , 刘 佳 , 乔 里 , 等 . 一测多评法测定透骨香中儿茶
素、白珠树苷、滇白珠苷 A的含量 [ J] . 中国实验方剂学
杂志 , 2013, 19(18): 126—130.
[7] 贾智若 , 李 兵 , 李耀华 , 等 . 反相高效液相色谱法测定
杜仲中儿茶素的含量 [ J] . 中国实验方剂学杂志 , 2013,
19(5): 117—119.
B47-17 高转化率和高产率蛋白质 PEG化的集合工艺 Pfi ster
D等 [Biotechnol Bioeng, 2016, 113(8): 1711]
蛋白质的 PEG化是提高治疗性蛋白质药物体内循环半衰
期、保持其活性的有效方法。新治疗性蛋白质药物的发展对蛋
白质 PEG化技术提出了更高的要求，以达到更好的选择性和更
高的产率，降低生产成本。本研究选择溶菌酶作为模型蛋白，
考察了 PEG化过程集约化策略的可行性。通过将色谱步骤和蛋
白质单一位点 PEG修饰的转化过程集合，提高产率和转化效率。
在集合反应 /分离过程中，色谱作为分馏技术，可从 PEG化产
物中分离和回收未反应的蛋白。这不仅大大缩短反应时间，还
可以尽可能减少多位点 PEG化产物的生成——即在目的产物进
一步反应前结束反应，控制产物的进一步转化，提高产率。同
时，通过回收未反应蛋白，可提高总的转化率。上述策略的应
用前景良好，不仅可以促进 PEG化过程，而且能控制产物的转
化，避免生成非目的产物。
[吴霖萍 编译 ]