全 文 ：2015年 第33卷 第4期
2015 Vol.33 No.4
新疆中医药
Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine
表 5 样品含量测定结果（n＝3）
批 号
含黄芪甲苷的量（mg/mL）
20110216
0.146
20110504
0.148
20110506
0.141
由表 5可见，三批样品的黄芪甲苷的含量在
0.141 mg·mL-1-0.146 mg·mL-1范围内。
3 结论
据文献报道，黄芪制剂中黄芪甲苷含量测定方
法有薄层色谱一分光光度法、荧光分光光度法、紫
外法[1]、HPLC法[2-7]、HPLC-ELSD法[9-11]等，前三种方
法都不同程度具有方法不简便、干扰因素多、准确
度低、重复性差等缺点，HPLC法具有分离效能高、
分析速度快、检测灵敏度高等特点，但因检测波长
近紫外对外界条件要求较高，ELSD是近几年应用
在色谱方面的新型检测器，为质量通用型检测器，
它的响应值取决于被测物质颗粒的数量和大小，特
别是对无紫外吸收或紫外末端吸收物质具有较高
的检测灵敏度，已成为中药分离分析的重要有效方
法，因此采用蒸发光检测器。
试验中流动相比例为乙腈∶水（30∶70）时，分离
度也达到了《中国药典》[12-13]的要求，但出峰时间较
长，为节约时间，在其他色谱条件不变的前提下，尝
试将乙腈与水的比例调整为（32∶68）、（33∶67）、（34∶
66）、（35∶65），结果分离度、理论塔板数均达到药典
要求，且在标准品出峰时间未见阴性对照出峰，总
体对比之后乙腈比水为（35∶65）时出峰时间较短，且
拖尾因子达到药典要求，从操作方面考虑，故采用
乙腈∶水（35∶65）为流动相。
本实验采用 HPLC-ELSD法测定阿胶强骨口服
液中黄芪甲苷的含量，方法学考察结果表明，本方
法灵敏度高，方法准确可靠。可用于阿胶强骨口服
液的质量控制。
参考文献：
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京：中国医药科技出版社，2010:283-284.
（收稿日期：2014-04-21；修回： 014-05-21）
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HPLC法测定洋甘菊药材野生和栽培品种中绿原酸的含量
苏钟慧
（新疆医科大学附属中医医院幸福路分院药房， 新疆 乌鲁木齐 830002）
摘要：目的 测定维吾尔药材洋甘菊野生和栽培品种绿原酸的含量，为洋甘菊的质量标准和规范化栽培提供依据。方法
采用高效液相色谱法（HPLC）测定，色谱条件：色谱柱CosmosilC18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈：0.1%磷酸溶
液（7∶93）；流速：1.0mL·min-1；柱温：30℃；进样量10μL。结果 测定了野生和栽培品种各5批市售的洋甘菊药材，野生
和栽培品种绿原酸的含量分别在0.163～0.293和0.146～0.189mg·g-1之间。结论 该方法测定洋甘菊种绿原酸含量操作
简便，重复性好，可用于规范和控制洋甘菊药材的质量。
关键词：洋甘菊；绿原酸；HPLC；含量测定
作者简介：苏钟慧（1969—），女，中药师，研究方向：临床药学。Tel：13999291819 E-mail：stxyyyqq.com
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2015年 第33卷 第4期
2015 Vol.33 No.4
新疆中医药
Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine
洋甘菊 Matricaria recutita 又称德国甘菊或母
菊，学名 Matricaria recutita L.，为菊科母菊属越冬
性一年生草本植物[1]。原产地中海沿岸，主要分布在
英、法、德、摩洛哥、匈牙利、葡萄牙、南斯拉夫等国。
洋甘菊是最古老的芳香植物之一，具有消炎、抑制
真菌、解痉等作用[2-3]。维吾尔医药记载其具有补益
神经、止痛消肿、发汗通便、利尿通经的功效[4]。用于
机体异常腐败体液、头痛久治不愈、大便秘结、汗出
不畅、小便不利、月经不调等症状[5]。国内学者对洋
甘菊的研究主要集中在对其药理药效的研究上[6-8]，
对其含量测定研究未见文献报道，为此本文给针对
维吾尔药材洋甘菊野生和栽培品种测定绿原酸的
含量，为洋甘菊的质量标准和规范化栽培提供依
据，该方法操作简便，重复性好，可用于规范和控制
洋甘菊药材的质量。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Shimadzu-LC2010C 高效液相色谱仪
（日本岛津）；Shimadzu CLASS-VP V6.14 SP4数据
工作站；色谱柱：Cosmosil C18（4.6 mm×250 mm，5
μm）；BP211D分析天平（德国赛多利斯，d=0.01mg）；
BS124S电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公
司）；SB-2200超声波清洗器（上海必能信超声有限
公司）；DK22型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设
备有限公司）。
1.2 试药 所用试剂均为药典[1]规定试剂；配制方
法均采用 2010药典附录规定的方法；磷酸为分析
纯（AR，浙江建德化工厂）；乙腈（美国 MERCK 公
司）和甲醇（上海陆都化学试剂厂）为色谱纯；水为
为双蒸水（自制）；绿原酸对照品（购于中国药品生
物制品检定所，批号：110753-200413）；洋甘菊（购
自和田维吾尔药材市场和乌鲁木齐维吾尔药材市
场），经新疆医科大学附属中医医院药房苏钟慧药
师鉴定为洋甘菊 Matricaria recutita L. 的干燥地上
部分。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Cosmosil C18（4.6 mm×250
mm，5 μm），流动相为乙腈∶0.1%磷酸溶液（7∶93）；检
测波长 327nm；流速为 1.0 mL· min-1；柱温为 30℃；
进样量 10 μL。
2.2 系统适用性实验 绿原酸理论板数 n=5.54（tR/
Wh/2）×2=11 539，测定效果良好。绿原酸：R=2（tR2-tR1）
/（W1+W2）=6.92，按中国药典 2010年版一部附录Ⅵ
D规定，分离度应大于 1.5，分离度符合要求。在上述
色谱条件下，药材中绿原酸的色谱峰与其他成分分
离度良好。结果如图 1、图 2。
图1 绿原酸对照品
图2 洋甘菊色谱图
2.3 供试品和对照品溶液的制备 供试品溶液：洋
甘菊药材粉碎过一号筛粉末约 0.5 g，精密称定，置
具塞锥形瓶中，精密加入 70 %乙醇溶液 50 mL，称
定重量，超声处理 60min（功率 250W，频率 40KHz），
放冷，再称定重量，用 70%乙醇溶液补足减失的重
量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45μm）滤
过，取续滤液作为供试品溶液，即得。对照品溶液：
取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加
甲醇制成每 1mL含绿原酸 30 μg的溶液，即得。
2.4 线性关系考察 精密称取绿原酸对照品适量，
置棕色量瓶中，加甲醇制成每 1 mL 含绿原酸
0.251 6 mg的溶液，即为对照品储备液。精密吸取
此储备液 0.2，0.4，0.8，1.0，1.5，2.0，3.0 mL 分别置
10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。分
别精密吸取上述溶液各 10 μL注入液相色谱仪，记
录色谱峰面积。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标
进行线性回归方程：Y=31 305 641X -638 5 R2=
1，线性范围：绿原酸对照品溶液浓度在 0.005 032～
0.075 48 mg·mL-1范围内，与峰面积线性关系良
好。
2.5 日内及日间精密度实验 取同一批洋甘菊药
材供试品，在上述色谱条件下，分别在同一天的不
同时间（每隔 2h）和不同天（连续 5天）用含量测定
方法进行重复测定，记录色谱峰面积，结果洋甘菊
中绿原酸的平均含量为 0.23％，RSD为 0.36％。
2.6 重复性实验 精密称取同一批洋甘菊药材的
供试品 6份，按所确定的样品制备方法和色谱条件
测定，注入液相色谱仪，进样量 10 μL，结果绿原酸
的平均含量为 0.28%，RSD为 0.38%，表明本方法重
复性较好。
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表 1 绿原酸准确度试验结果
样品
/编号
1
2
3
4
5
6
样品含量
（mg）
0.762
0.777 9
0.781 9
0.761 5
0.760 1
0.745 7
RSD
（%）
1
加入量
（mg）
0.805 1
0.805 1
0.805 1
0.805 1
0.805 1
0.805 1
称样量
（g）
0.258 61
0.264 02
0.265 37
0.258 44
0.257 96
0.253 07
回收率
（%）
103.72
102.51
102.19
103.27
100.74
102.53
测得量
（mg）
1.597
1.603 2
1.604 7
1.592 9
1.571 2
1.571 2
平均回收率
（%）
102.49
2.7 稳定性实验 取同一批洋甘菊药材的供试品
溶液，分别在 0，1，5，8，24和 32h进样测定，绿原酸
的平均含量为 0.30%，RSD为 0.40%，表明供试品溶
液在 32 h内稳定性符合测试要求。
2.8 回收率测定 分别精密称取已测含量的同一
批洋甘菊粉末 6份，每份约 0.1g，分别加入质量浓
度为 0.023 98（mg·mL-1） 的绿原酸对照品溶液
5.0mL，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，再按
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算
加样回收率，结果见表 1。
2.9 含量测定 分别取栽培和野生各 5批洋甘菊
药材，按 2.2项下方法制备供试品溶液和 2.1项色
谱条件下进行测定，用外标法计算样品中绿原酸含
量，结果见表 2。
3 结论与讨论
本研究采用高效液相色谱法对洋甘菊中的绿
原酸进行含量测定。在流动相选择中[9-11]，考察了甲
醇—磷酸水溶液、乙腈—磷酸水溶液的梯度洗脱系
统，结果表明，乙腈对洋甘菊样品中各成分的分离
度和峰形更好，因此采用乙腈—磷酸水溶液系统。
以不同溶剂为提取溶剂，采用超声提取法，分别考
察了甲醇、体积分数 30％的甲醇、体积分数 50％的
乙醇、体积分数 70％的乙醇对洋甘菊中绿原酸含量
测定的影响，以绿原酸的峰面积和峰形为判断依
据，以 70％乙醇提取效果最佳。本研究采用 HPLC
法测定了 10批次不同产地洋甘菊野生和栽培品种
药材中绿原酸的含量，平均含量 0.196mg· g-1，实验
结果为洋甘菊质量标准的提高及规范薰衣草药材
市场提供了理论依据。该方法可作为洋甘菊原料及
药品快速、准确的检测方法。
结果表明，不同产地洋甘菊野生和栽培品种成
分含量差异较大，伊宁、和田维吾尔市场绿原酸含
量均较高，且不同批次栽培品中各成分含量差异不
显著，说明其由野生转化为家种，有利于保证药材
的有效性和稳定性。如果能够建立规范化的 GAP
基地，更能保证其药材质量的稳定性，为市场提供
安全有效的原药材，保证临床用药的需求。但其栽
培品是否能够完成替代野生品，还需要进行药效学
和毒理学的研究。
参考文献：
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（收稿日期：2015-07-07）
表 2 栽培和野生洋甘菊药材中绿原酸的含量
品种
野生
栽培
批 号
伊宁大西沟
和田维吾尔药市场 1
喀什
和田维吾尔药市场 2
昌吉
伊宁霍城县
伊宁 65团
库尔勒
和田
喀什
含量（mg·g-1）
0.225
0.293
0.163
0.21
0.224
0.157
0.181
0.146
0.171
0.189
平均值（mg·g-1）
0.223
0.169
61