全 文 ：中国药业 China Pharmaceuticals ·29·
2011年第 20卷第 10期
高效液相色谱法测定朱砂七中虎杖苷含量
杨海燕 1，张 成 2
( 1． 陕西省药品检验所，陕西 西安 710061; 2． 陕西省医疗器械检测中心，陕西 西安 710061)
摘要:目的 建立测定朱砂七中虎杖苷含量的高效液相色谱法。方法 采用 Shimadzu VP － ODS色谱柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm)，流动相为乙
腈 －水( 15 ∶ 85)，流速 1． 0 mL /min，柱温 30 ℃ ，检测波长 317 nm。结果 虎杖苷峰与其他峰分离良好，进样量在 0． 082 05 ～ 0． 820 50 μg 范
围内与峰面积线性关系较好，平均加样回收率为 98． 70%，RSD = 1． 60% ( n = 6)。结论 该法可以用于测定对朱砂七中虎杖苷含量，从而达
到控制药材质量的目的。
关键词:朱砂七;高效液相色谱法;虎杖苷;含量
中图分类号: R284． 1; R282． 71 文献标识码: A 文章编号: 1006 － 4931 (2011 )10 － 0029 － 02
Determination of Polydatin in Polygonum Cillinerve (Nakai ) Ohwl by HPLC
Yang Haiyan1， Zhang Cheng2
( 1． Shaanxi Provincial Institute for Drug Control， Xi  an， Shaanxi， China 710061;
2． Shaanxi Provincial Medical Equipment Examination Center， Xi  an， Shaanxi， China 710061 )
Abstract: Objective To establish the quantitative determination method of polydatin in Polygonum Cillinerve ( Nakai ) Ohwl by
HPLC． Method Polydatin was determined by HPLC carried on the Shimadzu VP － ODS column (250 mm × 4． 6 mm，5 μm) with the mobile
phase of acetonitrile － water (15 ∶ 85 ) and the flow rate at 1． 0 mL /min． The column temperature was 30 ℃ and the detection wavelength
was 317 nm． Results The peak of polydatin was separated well with other peaks，showing the better linear relation between the sample size
in the range of 0． 082 05 － 0． 820 50 μg with the peak area． The average recovery rate was 98． 70% ， RSD 1． 60% ( n = 6 ) ． Conclusion This
method can be used to determine the polydatin content in Polygonum Cillinerve (Nakai ) Ohwl for controlling the quality of the medicinal
material．
Key words: Polygonum Cillinerve ( Nakai )Ohwl; HPLC; polydatin; content
率最高，这点与文献报道一致 [ 8 ]。氟喹诺酮类曾被广泛应用于治疗
尿路感染，但近年发现大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物耐药性迅速
上升，且该类药物存在明显的交叉耐药性，故临床医生在得到药物
敏感性试验结果前，不宜首选此药 [ 9 ]。氨基苷类药物 (阿米卡星 )虽
然敏感性较高，但因具有肾毒性、耳毒性，使用需慎重。头孢菌素中
以头孢吡肟的抗菌作用最强，本组耐药率为 33． 33%，原因可能是
第 4 代头孢菌素对 β －内酰胺酶的亲和力较低，应用时间较短，且
能快速地通过细菌的外膜屏障与青霉素结合蛋白结合而发挥较强
的抗菌作用。头霉类抗生素对大肠埃希菌的抗菌活性优于第 1 代、
2 代头孢菌素和多数 3 代头孢菌素。亚胺培南是所有被测药物中对
大肠埃希菌抗菌作用最强的抗生素，本组非产 ESBLs菌株对亚胺
培南的敏感率为 100%，产 ESBLs 菌株对亚胺培南的敏感率为
96． 77%。可见亚胺培南对大肠埃希菌具有较强的抗菌作用，可作
为本地区大肠埃希菌重症感染的首选抗菌药物。本组 β －内酰胺类
加 β －内酰胺酶抑制剂氨苄西林舒巴坦和哌拉西林他唑巴坦的耐
药率均低于 20%，可能是由于加用 β －内酰胺酶抑制剂后提高了抗
生素对大肠埃希菌所产 β －内酰胺酶的稳定性，增强了抗菌作用 [10 ]。
总之，对于产 ESBLs大肠埃希菌的尿路感染，经验用药可选择
β －内酰胺类加 β －内酰胺酶抑制剂和头霉类抗生素，对重症感染
一般首选碳青霉烯类抗生素，但最好根据药物敏感性试验结果选
择敏感药物治疗。
作者简介:李剑，男，主治医师，从事泌尿外科临床工作，(电子
信箱 ) chenh1969@ 126． com。
参考文献:
[ 1 ] 袁春雷，叶国华，李冬秀，等 ． 尿液标本中大肠埃希菌的耐药性分析及
其产超广谱 β －内酰胺酶 ( ESBLs )检测 [ J ] ． 中国抗生素杂志，2005，30
(4 ) : 241 － 243．
[ 2 ] 吴伟元，陈民钧，王 辉 ． 阴沟肠杆菌去阻遏持续高产 AmpC酶和超广
谱 β －内酰胺酶 ( ESBLs )的检测 [ J ] ． 中国临床药理学杂志，2001，17
(2 ) : 104．
[ 3 ] 付维婵，赵德军，王宝佳，等 ． 尿源性大肠埃希菌产超广谱 β －内酰胺
酶的检测及耐药监测 [ J ] ． 中国药房，2008，19 (5 ) : 350 － 351．
[ 4 ] 陆 坚，唐英春，吴本权，等 ． 华南地区质粒介导超广谱 β －内酰胺酶
的基因分型研究 [ J ] ． 中华微生物学和免疫学杂志，2002，22 (6 ) : 638 －
643．
[ 5 ] Chanawong A，M’Zali FH，Heritage J， et al ． Three cefotaximases，CTX －
M － 9 ，CTX － M － 13 and CTX － M － 14，among Enterobacteriaceae in the
People’s Republic of China [ J ] ． Antimicrob Agents Chemother， 2002， 46
(3 ) : 630 － 637．
[ 6 ] 洪艳华，陈前进 ． 尿路感染致病菌的耐药性监测 [ J ] ． 中华医院感染学
杂志，2006，16 (10 ) : 1 181 － 1 182．
[ 7 ] Bret L， Claris CC， Sitot D， et al． Chromosomally encoded AmpC － typeβ －
Lactamase in aclinical isolate of Proteusmirabilis [ J ] ． Antimicrobial． Agents
Chemother，2005，42 (5 ) : 1 110 － 1 114．
[ 8 ] 胡龙华，贾坤茹，胡晓彦，等 ． 大肠埃希菌临床分离株耐药性分析 [ J ] ．
中国抗感染化疗杂志，2004，4 (4 ) : 239 － 241．
[ 9 ] 杨念生，武庆庆，陈冬梅，等 ． 复杂性尿路感染病菌的耐药性趋势 [ J ] ．
中华肾脏病杂志，2002，18 (3 ) : 1 947．
[ 10 ] 祝 进，陆 军，徐礼锋，等 ． 泌尿系感染大肠埃希菌耐药性监测和酶
型分析 [ J ] ． 检验医学，2006，21 (4 ) : 405 － 408．
(收稿日期: 2010 － 01 － 23 )
朱砂七为蓼科植物毛脉蓼 Polygonum Cillinerve ( Nakai ) Ohwl的
干燥块根，临床上多用于胃炎、急性菌痢 [ 1 ]，疗效确切。现代药理学
证实，本品具有抑菌、抗病毒及抗氧化活性作用 [ 2 － 3 ]。近年来研究还
发现，朱砂七含有较多的白黎芦醇、白黎芦醇苷(虎杖苷)等二苯乙
烯类成分 [ 4 ]，因此其在抗肿瘤 [ 5 ]、调节心血管和调血脂 [ 6 ]方面的应
用有待于进一步研究。为控制药材质量，笔者建立了测定朱砂七中
药物研究
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
中国药业 China Pharmaceuticals·30·
2011年第 20卷第 10期
0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50
A B
1． 虎杖苷
A． 对照品溶液 B． 供试品溶液
图 1 高效液相色谱图
表 1 虎权苷加样回收试验结果( n = 6)
虎杖苷含量的高效液相色谱图。
1 仪器与试药
LC － 2010 HT 型全自动高效液相色谱仪 (日本岛津 ) ; AG ME
235S 型电子分析天平，BS 224S 型电子分析天平 (德国赛多利斯 ) ;
HH － 4 型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)。乙腈(色谱纯，美
国 Tedia公司)，水(超纯水)，其他试剂(分析纯) ;虎杖苷对照品(中
国药品生物制品检定所，批号为 111575 － 200301) ;朱砂七药材( 部
分为市售药材，部分由陕西盘龙药业有限公司提供)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱 : Shimadzu VP － ODS 柱 ( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ; 柱
温 : 30 ℃ ; 流动相 : 乙腈 －水 ( 15 ∶ 85) ; 流速 : 1． 0 mL /min; 检测波
长: 317 nm;进样量: 10 μL。在此色谱条件下，虎杖苷峰与其他峰分
离良好，理论板数以虎杖苷峰计不低于 3 000，色谱图见图 1。
2．2 溶液制备
精密称取虎杖苷对照品 10． 94 mg，置 100 mL 量瓶中，用甲醇
溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取 5 mL，置 20 mL量瓶中，加甲
醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取朱砂七药材细粉 0． 2 g，置索
氏提取器中，用乙酸乙酯回流提取至无色，提取液回收至干，残渣
用甲醇溶解并定容至 10 mL量瓶中，摇匀，用 0． 45 μm的微孔滤膜
滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2．3 方法学考察
线性关系考察:分别精密吸取对照品溶液 3，5，10，15，25，30 μL，
进样测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标、进样量( μg)为横坐标
绘制标准曲线，回归方程为 Y = 6． 114 3 × 106 X － 4． 904 2 × 105，r =
0． 993。结果表明虎杖苷进样量在 0． 082 05 ～ 0． 820 50 μg范围内与
峰面积积分值有较好的线性关系。
精密度试验: 精密吸取对照品溶液，重复进样 6 次，测定峰面
积积分值。结果的 RSD为 0． 59% ( n = 6 )，表明仪器精密度良好。
稳定性试验: 精密吸取同一供试品溶液 10 μL，每隔 2 h 进样
1 次，测定峰面积积分值。结果的 RSD 为 1． 3% ( n = 7 )，表明供试
品溶液在 12 h内基本稳定。
重复性试验:取同批朱砂七药材细粉 6 份，按供试品溶液制备
方法制备溶液，测定含量。结果平均含量为 1． 099 8 mg / g，RSD 为
3． 4% ( n = 6 )，表明方法重复性较好。
加样回收试验:取朱砂七细粉 0． 1 g，置索氏提取器中，分别精
密量取 0． 101 6 mg /mL的虎杖苷乙酸乙酯溶液 1，2，3 mL，按供试
品溶液制备方法制备溶液并测定含量，计算回收率。结果见表 1。
2．4 样品含量测定
测定了 7 批朱砂七药材的含量，结果虎权苷含量分别为 2． 82，
2． 66，1． 10，3． 65，1． 54，6． 90，1． 81 mg / g，根据所测结果，规定每1 g
药材含虎杖苷应不低于 1． 0 mg。
3 讨论
取加入虎杖苷对照品的流动相溶液，以流动相为空白，在
200 ～ 400 nm波长范围内扫描，结果在 317． 00 nm波长处有最大吸
收，故将检测波长定为 317 nm。
在选择提取溶剂时，分别以乙醚、乙酸乙酯、甲醇回流提取依
法测定。结果乙醚的提取率只有乙酸乙酯和甲醇提取率的 1 /10，
乙酸乙酯和甲醇的提取率基本一致，但乙酸乙酯提取的样品杂质
较少，虎杖苷与周围峰的分离明显好于甲醇提取，故选乙酸乙酯为
提取溶剂。
选择提取方法时，以乙酸乙酯为溶剂，比较了超声 ( 1 h )和索氏
提取的效果，结果索氏提取的样品含量几乎是超声提取的 4 倍，故
采用索氏提取法。
测定了 4 批市售饮片的含量，结果分别为 9． 77，7． 37，10． 98，
9． 96 mg / g(含量均较高 )，炮制是否能使虎杖苷含量增加，有待进
一步研究。由于所测药材和饮片的含量差异较大，当所测溶液含量
过高(质量浓度超过 0． 082 mg /mL) 时，将样品溶液稀释 2 倍或 5
倍体积后再测定，可以保证每一测量结果均在线性范围内。
参考文献:
[ 1 ] 袁鲜云，武希桃 ． 朱砂七抗炎及抗溃疡作用的实验研究 [ J ] ． 陕西中医
学院学报，2003，26 (2 ) : 48 － 49．
[ 2 ] 中医药管理局《中华本草》编委会 ． 中华本草 [M ] ． 上海:上海科学技术
出版社，2000: 650．
[ 3 ] Jong PL，Ryung SM，Ren BA，et al． Stilbenes from the roots of Pleuropterus
ciliinervis and their antioxidant activities [ J ] ． Phytochemistry，2003，64 (5 ) :
759．
[ 4 ] 戚欢阳，张朝凤，张 勉，等 ． 毛脉蓼化学成分及抑菌活性的研究 [ J ] ．
中国药学杂志，2005，40 (11 ) : 819 － 822．
[ 5 ] Jang M，Cai L，Geoge OU，et al． Cancer chemopreventive activity of resvera-
trol， a natural product devived from grapes [ J ] ． Science，1997，275: 218 －
220．
[ 6 ] 舒仕瑜 ． 白藜芦醇苷生物活性及药理作用 [ J ] ． 儿科药学杂志，2002，8
(1 ) : 9 － 11．
(收稿日期: 2010 － 07 － 19; 修回日期: 2011 － 01 － 25 )
药物研究
t / mint / min
11
称样量( g)
0． 100 6
0． 100 9
0． 100 4
0． 101 9
0． 099 6
0． 101 1
样品含量( μg)
0． 110 6
0． 111 0
0． 110 4
0． 112 1
0． 109 5
0． 111 2
加入量( μg )
0． 101 6
0． 101 6
0． 203 2
0． 203 2
0． 304 8
0． 304 8
测得量( μg )
0． 213 4
0． 211 1
0． 312 6
0． 313 0
0． 404 5
0． 407 9
回收率(% )
101． 18
98． 52
99． 51
98． 87
96． 78
97． 34
X(% )
98． 70
RSD (% )
1． 60
《中国药业》杂志被评为重庆市第六届期刊综合质量考核一级期刊