全 文 ：HPLC法同时测定三七花中 3 种皂苷
朱艳琴1， 殷勤红2， 虞 泓2， 曾文波2， 赵方允2
(1． 昆明理工大学分析测试研究中心，云南 昆明 650093;2． 云南大学中草药生物资源研究所云百草实验
室，云南 昆明 650093)
收稿日期:2012-03-20
作者简介:朱艳琴 (1977—) ，女，工程师，硕士，主要从事天然产物研究。Tel:(0871)5119674，E-mail:zyq23788@ sohu． com
摘要:目的 建立三七花中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1和人参皂苷 Rb1的测定方法。方法 采用 Hypersil ODS (4. 6
mm × 250 mm，5 μm)色谱柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，检测波长 203 nm，体积流量为 1. 0 mL / min。结果 3
个成分线性关系良好，各成分的平均回收率在 97. 0% ～ 99. 0%。结论 本方法简便、快速，结果准确，可用于三七花
的质量控制。
关键词:三七花;三七皂苷 R1;人参皂苷 Rg1;人参皂苷 Rb1;高效液相色谱
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)02-0339-03
Simultaneous determination of three ginsenosides in Notoginseng Flos by HPLC
ZHU Yan-qin1， YIN Qin-hong2， YU Hong2， ZENG Wen-bo2， ZHAO Fang-yun2
(1． Research Center for Analysis and Measurement，Kunming University of Science and Technology，Kunming 650093，China;2． Herbal Laboratory，In-
stitute of Herb Biotic Resources，Yunnan University，Kunming 650091，China)
KEY WORDS:Notoginseng Flos;notoginsenoside R1;ginsenoside Rg1;ginsenoside Rb1;HPLC
三七花是传统名贵中药五加科植物三七 Panax
Notoginseng (Burk)F． H． Chen 的干燥花蕾。三
七花中含有各种人参皂苷［1］、三七花苷元［2］等。
三七花作为药材已载入 《云南中草药选》，“甘凉，
清热平肝，降压。治疗高血压，头昏，目眩，耳
鸣，急性咽喉炎”;同时 《中华本草》记载三七花
“性甘味凉。清热生津，平肝降压。主治津伤口
渴，咽痛音哑，高血压病”。三七花［3-4］仅作为民
间用药材，其药用价值未被充分利用。文献中尚未
有同时测定三七花中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1和
人参皂苷 Rb1的研究，本实验建立同时测定三七花
中 3 种皂苷的方法，为完善该药材质量标准提供
依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 DIONEXP680 液相色谱仪 (P680 四元
梯度混合泵、ASI—100 自动进样器、UVD170U 四
通道紫外检测器、TCC—100 柱温箱、CHROME-
LEONTM色谱信息管理软件) ;BP211D 电子天平
(德国 Sartorius公司) ;D101 型大孔树脂 (天津树
脂厂)。
1. 2 试药 三七皂苷 R1 (批号 110745-200415)、
人参皂苷 Rg1 (批号 110703-200726)、人参皂苷
Rb1 (批号 110704-200420)对照品均由中国药品
生物制品检定所提供;三氯甲烷、石油醚、乙醇、
甲醇为分析纯，乙腈为色谱纯，水为重蒸水。
1. 3 药材 三七花于 2009 年 8 月采于云南省各地
州，经云南大学中草药生物资源研究所云百草实验
室虞泓教授鉴定为五加科植物三七 Panax Notogin-
seng (Burk)F． H． Chen的干燥花蕾。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Hypersil ODS 色谱柱 (4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ;流动相 A 相为乙腈，B 相为水，
梯度洗脱，0 ～ 10 min (25% A) ，10 ～ 45 min
(25% ～ 40% A) ，45 ～ 60 min (40% ～ 55% A) ;
检测波长 203 nm;体积流量 1. 0 mL /min;柱温 35
℃;进样量 10 μL。色谱图见图 1。
2. 2 对照品贮备液和对照品溶液的制备 分别精
密称取三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1和人参皂苷 Rb1
对照品适量，分别加甲醇制成质量浓度为 470
μg /mL三七皂苷R1对照品贮备液、810μg / mL人参
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2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
February 2013
Vol． 35 No． 2
1． 三七皂苷 R1 2． 人参皂苷 Rg1 3． 人参皂苷 Rb1
1． notoginsenoside R1 2． ginsenoside Rg1
3． ginsenoside Rb1
图 1 混合对照品 (A)、样品 (B)HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference sub-
stances (A)and sample (B)
皂苷 Rg1、1 220 μg /mL 人参皂苷 Rb1对照品贮
备液。再精密吸取贮备液适量，加甲醇制成质
量浓度为 9. 4 μg /mL 三七皂苷 R1、40. 5 μg /mL
人参皂苷 Rg1、610 μg /mL 人参皂苷 Rb1的混合
对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品粉末，精密称定
1. 0 g置索氏提取器中，加三氯甲烷 100 mL，加热
回流 4 h，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，
加甲醇 100 mL，加热回流 4 h，提取液挥干，加水
20 mL使溶解，加石油醚 (30 ～ 60 ℃)提取 2 次，
每次 20 mL，弃去醚液，水液通过 D101 型大孔树
脂柱 (内径 1. 5 cm，长 15 cm) ，以水 100 mL 洗
脱，弃去水液。再用 20%乙醇 100 mL 洗脱，弃去
20%乙醇洗脱液，继用 80%乙醇 150 mL 洗脱，收
集洗脱液 140 mL，蒸干，残渣加甲醇溶解并定量
转移至 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤
过，取续滤液，即得。
2. 4 线性关系考察 分别进样 2、5、10、20、40
μL的上述混合对照品溶液，以峰面积为纵坐标，
进样量 (μg)为横坐标绘制标准曲线。三七皂苷
R1的回归方程为 Y = 3. 236 8X + 0. 014 4， r =
0. 999 7，在 0. 018 8 ～ 0. 376 μg 范围内峰面积与进
样量呈良好的线性关系;人参皂苷 Rg1的回归方程
为 Y = 1. 042 6X － 0. 009 2， r = 0. 999 7，在
0. 081 ～ 1. 62 μg 范围内峰面积与进样量呈良好的
线性关系;人参皂苷 Rb1 的回归方程为 Y =
0. 647 6X + 0. 011 2，r = 0. 999 9，在 1. 22 ～ 24. 4
μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 分别吸取混合对照品溶液，连
续进样 6 次，测定峰面积，RSD 分别为三七皂苷
R1 1. 66%，人参皂苷 Rg1 1. 40%，人参皂苷 Rb1
0. 94%。表明精密度良好。
2. 6 稳定试实验 取供试品溶液，照上述色谱条
件，分别于 0、2、4、6 h 测定峰面积，RSD 分别
为三七皂苷 R1 1. 34%，人参皂苷 Rg1 1. 36%，人
参皂苷 Rb1 0. 89%。表明样品中 3 种成分在 6 h 内
稳定。
2. 7 重复性试验 按供试品溶液制备方法项下操
作，平行制备 6 份样品，照上述色谱条件，分别测
定 3 种成分，RSD 分别为三七皂苷 R1 1. 41%，人
参皂苷 Rg1 1. 23%，人参皂苷 Rb1 0. 63%。表明供
试品溶液的重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 精密称取三七皂苷 R1对照
品 6. 3 mg至 100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至
刻度，再分别精密量取 10 mL至 50 mL 量瓶并用甲
醇定容，作为三七皂苷 R1加样对照品溶液;精密
称取人参皂苷 Rg1对照品 9. 1 mg 至 100 mL 量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，再分别精密量取
20 mL至 50 mL 量瓶并用甲醇定容，作为人参皂苷
Rg1加样对照品溶液;精密称取人参皂苷 Rb1对照
品 38. 6 mg至 50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至
刻度，作为人参皂苷 Rb1加样对照品溶液。称取已
知含有量的砚山县维摩乡样品 6 份各 0. 5 g，精密
加入上述 3 种加样对照品溶液各 5 mL，按供试品
溶液制备项下方法制成加样回收供试液，在上述色
谱条件下进样分析，计算回收率。结果见表 1。
2. 9 样品测定 精密吸取对照品溶液与供试品溶
液按上述色谱条件，注入液相色谱仪，记录峰面
积，用外标法计算样品中三七皂苷 R1、人参皂苷
Rg1和人参皂苷 Rb1的量。结果见表 2。
3 讨论
3. 1 实验中参考《中国药典》2010 年版一部中三
七［5］的质量标准并参考相关文献［6-14］，选择乙
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表 1 加样回收率试验结果
Tab. 1 Results of recovery tests
成 分
称样量 /
mg
原有量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
RSD /
%
三七皂苷 R1 0. 501 2 0. 063 2 0. 063 0 0. 125 8 99. 37
0. 502 3 0. 063 3 0. 063 0 0. 123 9 96. 19
0. 511 4 0. 064 4 0. 063 0 0. 126 5 98. 57
0. 505 6 0. 063 7 0. 063 0 0. 124 4 96. 35 1. 5
0. 500 8 0. 063 1 0. 063 0 0. 125 9 99. 68
0. 512 1 0. 064 5 0. 063 0 0. 126 2 97. 94
人参皂苷 Rg1 0. 501 2 0. 183 9 0. 182 0 0. 361 2 97. 42
0. 502 3 0. 184 3 0. 182 0 0. 361 8 97. 53
0. 511 4 0. 187 7 0. 182 0 0. 361 5 95. 49
0. 505 6 0. 185 6 0. 182 0 0. 364 8 98. 46 1. 0
0. 500 8 0. 183 8 0. 182 0 0. 361 2 97. 47
0. 512 1 0. 187 9 0. 182 0 0. 365 7 97. 69
人参皂苷 Rb1 0. 501 2 3. 835 7 3. 860 0 7. 653 4 98. 90
0. 502 3 3. 844 1 3. 860 0 7. 667 5 99. 05
0. 511 4 3. 913 7 3. 860 0 7. 695 3 97. 97 0. 7
0. 505 6 3. 869 4 3. 860 0 7. 723 2 99. 84
0. 500 8 3. 832 6 3. 860 0 7. 650 8 98. 92
0. 512 1 3. 919 1 3. 860 0 7. 763 4 99. 59
表 2 三七花中 3 种皂苷的测定结果
Tab. 2 Determination of 3 ginsenosides in Notoginseng Flos
产 地
三七皂苷 R1 /
(mg·g － 1)
人参皂苷 Rg1 /
(mg·g － 1)
人参皂苷 Rb1 /
(mg·g － 1)
砚山县维摩乡 0. 126 0. 367 7. 653
砚山县腻脚乡 0. 102 0. 318 7. 067
砚山县江娜镇 0. 113 0. 358 7. 016
文山县东山乡 0. 094 0. 304 7. 125
文山县老回龙镇 0. 159 0. 406 7. 237
腈-水为溶剂系统，并对梯度洗脱时间和比例进行
适当调整，以满足 3 种成分获得较好的分离效果。
3. 2 三七花中所含成分较多，并含有大量叶绿素，
因此参照《中国药典》2010 年版一部中人参叶的
样品处理方法，选用 D101 型大孔吸附树脂进行洗
脱，先用水洗去多糖，再用 20%乙醇洗去黄酮类
物质，最后收集 80%乙醇洗脱液，表明此法可起
到较好的纯化作用。
3. 3 上述实验结果表明，采于云南各地的三七花
药材各成分之间略有差别，其中人参皂苷 Rb1含有
量差异不大，而三七皂苷 R1和人参皂苷 Rg1含有量
差异较大，这可能与三七花药材的产地、种植条
件、采收期等有关。
参考文献:
［1］ Taniyasu S，Tanaka O，Yang T R，et al． Dammarane saponins
of flower buds of Panax notoginseng (Sanchi-Ginseng) ［J］．
Planta Med，1982，44(2) :124-125．
［2］ 魏均娴，刘 莉，徐榕雪． 三七花皂甙元的研究［J］． 中
药通报，1984，9(5) :223-225．
［3］ 张燕丽，左冬冬． 三七花的现代研究进展［J］． 中医药信
息，2011，28(1) :116-118．
［4］ 殷勤红，朱艳琴，虞 泓，等． 三七花化学成分和药理作
用的 研 究 进 展［J］． 光 谱 实 验 室， 2011， 28 (3) :
1194-1197．
［5］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社，2010:11-12．
［6］ 沈 岚，冯 怡，徐德生，等． 比色法测定三七花中总皂
苷的含量［J］． 中成药，2007，29(9) :1368-1370．
［7］ 沈 岚，冯 怡，徐德生，等． 反相高效液相色谱法测定
三七花中人参皂苷 Rb1的含量［J］． 时珍国医国药，2009，
20(6) :1482-1483．
［8］ 张 冰，陈晓辉，毕开顺． HPLC 法同时测定三七花中人
参皂苷 Rb1和三七皂苷 Fe 的含量［J］． 药物分析杂志，
2010，30(2) :233-235．
［9］ 张 敏，胡 坪，罗国安，等． 三七剪口指纹图谱研究及
应用［J］． 中草药，2007，38(3) :442-445．
［10］ 缪 红，张海欢，王小萍． 大孔吸附树脂富集纯化三七花
总皂苷工艺研 究［J］． 中 国 药 房，2011，22 (39) :
3680-3683．
［11］ 韩 杰，孔祥文，李东辉． HPLC 法同时测定骨刺宁胶囊
中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1［J］． 中成
药，2011，33(5) :824-826．
［12］ 高明菊，王 强，张 勤，等． 七丹胶囊中 4 个成分的
HPLC分析［J］． 中成药，2010，32(5) :782-786．
［13］ 宋金玉，康博欣，朱鸿敏，等． HPLC-ELSD同时测定灯银
脑通胶囊中白果内酯、银杏内酯 A、三七皂苷 R1、人参皂
苷 Rg1 的含量［J］． 药物分析杂志，2009，29 (4) :
532-535．
［14］ 何选林，王群英． 三七胶囊含量测定方法的改进［J］． 中
成药，2011，33(3) :461-463．
143
2013 年 2 月
第 35 卷 第 2 期
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Chinese Traditional Patent Medicine
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