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国槐槐枝及槐叶中芦丁含量比较



全 文 :中国药业 China Pharmaceuticals·22·
2011年第 20卷第 18期
国槐槐枝及槐叶中芦丁含量比较
熊维政 1,2,金燕飞 1,2,姜家书 1,石 磊 1,张春霞 1
(1. 河南羚锐制药股份有限公司,河南 信阳 465550; 2. 河南中医学院,河南 郑州 450008)
摘要:目的 为获得优质药材,充分利用槐枝和槐叶,扩大芦丁资源提供参考依据。方法 按照 2010 年版《中国药典(一部)》槐花项下含量测
定方法,测定槐枝不同部位及槐叶中芦丁的含量。结果 不同生长年限的槐枝,嫩枝中芦丁含量最高;槐枝的不同部位中,枝皮的含量最高,
木质部中也含有芦丁;不同植株槐叶中芦丁含量不同。结论 该研究揭示了不同生长年限槐枝、槐枝不同部位以及槐叶中芦丁含量的差异,
为获得优质药材和芦丁的开发提供了参考依据。
关键词:高效液相色谱法;槐枝;槐叶;芦丁
中图分类号:R284. 1;R282. 71 文献标识码:A 文章编号:1006 - 4931 (2011 )18 - 0022 - 02
Comparative Study on Rutin Content in Branches and Leaves of Sophora Japonica L.
Xiong Weizheng1, 2, Jin Yanfei1, 2, Jiang Jiashu1, Shi Lei1, Zhang Chunxia1
( 1. Henan Lingrui Pharmaceutical Co.,Ltd.,Xinxian, Henan, China 465550;
2. Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou, Henan, China 450008 )
Abstract:Objective To provide the theoretic reference for obtaining high quality medical materials,making full use of Sophora japonica
L. branches and leaves and expanding the resources of rutin. Methods According to the Chinese Pharmacopeia ( edition 2010,VolⅠ) ,the
rutin content in different parts of Sophora japonica L. branches and leaves was determined. Results Among the branches with different
growth years,the rutin content was the highest in young branches. Among the different parts of branches,the rutin content was the highest
in skin of branch. Xylem also contained rutin. The leaves in different plants had different contents of rutin. Conclusion The result revealed
the diversity of the rutin content in different growth years of branches,different parts of branches and leaves,which provides the reference
basis for choosing the best medicinal materials and developing rutin.
Key words:HPLC; sophora japonica L. branch; sophora japonica L. leave; rutin
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
槐枝为豆科植物中槐 Sophora japonica L. 的干燥嫩枝,其叶
为槐叶。槐枝最早收载于《名医别录》,槐叶最早收载于《食疗本
草》,二者在《本草纲目》等一些本草文献中均有论述 [ 1 ]。近年来民
间用槐枝治疗烧伤有较好的疗效,也是治疗烧伤药紫槐烧伤膏的
主要药物组成之一; 适量地食用槐叶及其制剂,对人体保健能起
到积极的作用 [ 2 ]。槐枝、槐叶均含有较多的黄酮类化合物,其中以
芦丁为主 [ 3 - 4 ]。芦丁又名芸香苷,有镇痛作用 [ 5 ],还具有抗癌、抗感
染、抗过敏、抗菌、抗病毒、抗糖尿病、抗骨质疏松、抗血栓、抗辐射、
抑制增生、保护肝脏和心血管等多种生理活性,因而在药品及食品
的开发应用中越来越受到关注。为获得优质药材,更好地开发和利
用芦丁资源,笔者对槐枝、槐叶中的芦丁含量进行了考察,现报道
如下。
1 仪器和材料
岛津 LC - 2010AHT 型高效液相色谱系统,包括四元泵、在线
真空脱气机、自动进样器柱温箱、LC - Solution 色谱工作站 (日本
Shimadzu 公司);KQ - 250DE 型数控超声波清洗器 (昆山市超声仪
器有限公司 )。芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所,供含量测定
用,批号为 100080 - 200707 );甲醇为色谱纯(天津市四友精细化学
品有限公司),冰醋酸为分析纯(国药集团化学试剂有限公司),水
为娃哈哈纯净水。槐枝为采集在同一植株、同为春季、不同生长年
限的枝条,同一植株、嫩枝的枝条木质部,同为春季、不同植株的嫩
枝;槐叶,采集时间为槐叶中芦丁含量高的五月[2 ]。将所采集的槐枝
(切段)、槐叶低温干燥,粉碎,过三号筛备用。采集地点为河南省信
阳市新县城郊,原植物经河南省信阳市药品检验所潘永峰教授鉴
定均为豆科植物中槐 Sophora japonica L.。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 [ 6 ]与系统适用性试验
色谱柱:Agilent C18 柱 ( 250 mm × 4. 6 mm,5 μm ); 流动相: 甲
醇 - 1%冰醋酸 ( 32 ∶ 68 );检测波长:257 nm;流速:1. 0 mL /min;柱
温:35 ℃;进样量:10 μL。在此条件下,色谱图见图 1。
作者简介:高倩,女,硕士研究生,主要研究方向为濒危和道地
药材的培育与分子生物学研究,(电话)024 - 23986501(电子信箱)
a072885@ 126. com; 贾景明,男,博士研究生,教授,博士研究生导
师,主要研究方向为濒危和道地药材的培育与分子生物学研究,本
文通讯作者,(电话)024 - 23986501(电子信箱)jmingjia@ sina. com。
参考文献:
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(收稿日期:2011 - 04 - 22 )
药物研究
中国药业 China Pharmaceuticals ·23·
2011年第 20卷第 18期 药物研究
本栏目由
协 办
重庆药友制药有限责任公司
表 1 芦丁加样回收试验结果(n = 9)
样品含量(g / L)
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
0. 620 0
加入量(g / L)
0. 221 0
0. 221 0
0. 221 0
0. 331 5
0. 331 5
0. 331 5
0. 552 5
0. 552 5
0. 552 5
测得量 ( g / L )
0. 837 4
0. 829 7
0. 832 5
0. 949 3
0. 947 7
0. 950 1
1. 163 4
1. 162 3
1. 170 3
回收率(%)
98. 37
94. 89
96. 15
99. 34
98. 85
99. 58
98. 35
98. 15
99. 60
X (% )
98. 14
RSD(%)
1. 64
注:A,B,C,D分别代表 4 个不同植株。
表 2 槐枝与槐叶中芦丁含量比较结果
组别
1
2
3
4
比较范围
同一植株、不同生长年限的枝条
不同槐树植株的嫩枝
同一植株嫩枝、不同部位
不同槐树植株槐叶
槐树部位
嫩枝
2 年生枝条
3 年生枝条
嫩枝 A
嫩枝 B
嫩枝 C
嫩枝 D
枝条
枝皮
木质部
槐叶 A
槐叶 B
槐叶 C
槐叶 D
芦丁含量(%)
0. 28
0. 13
0. 09
0. 28
0. 26
0. 10
0. 05
0. 28
0. 43
0. 07
0. 05
0. 34
0. 11
0. 14
t / mint / min t / min
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
A B C
A. 对照品溶液 B. 供试品溶液 (嫩枝 ) C. 供试品溶液 (槐叶 )
图 1 高效液相色谱图
2.2 溶液制备
精密称取在 120 ℃减压干燥至恒重的芦丁对照品 10 mg,加甲
醇 100 mL,制成每 1 mL 含 0. 1 mg 的溶液,摇匀,即得对照品溶
液。取各样品粉末 0. 5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲
醇 50 mL,称定质量,超声处理 (功率 250 W,频率 25 kHz ) 30 min,
放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的质量,滤过,精密量取续滤液
2 mL,置 10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,0. 45 μm滤膜滤
过,作为供试品溶液。
2.3 方法学考察
线性关系考察: 精密吸取对照品溶液2,4,6,8,10,14,16,
20 μL,按拟订的色谱条件测定,以峰面积 ( Y )为纵坐标、进样量 ( X )
为横坐标绘制标准曲线,得回归方程 Y = 4. 010X - 3. 567,r = 0. 999
( n = 8 )。结果表明,芦丁质量浓度在 0. 2210 ~ 2. 210 g / L范围内与
峰面积线性关系良好。
精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μL,按 2. 1 项下色谱条
件重复进样 6 次,测定槐枝中芦丁的峰面积。结果峰面积的 RSD
为 1. 06% ( n = 6 ) ,表明仪器精密度良好。
稳定性试验: 精密吸取供试品溶液10 μL,分别在 0,3,6,8,
12,24 h 时测定槐枝中芦丁的峰面积。结果峰面积的 RSD 为
1. 21% ( n = 6 ),表明供试品溶液在 24 h内稳定。
重复性试验:取槐枝药材粉末,按2. 2 项下方法同时制备 6 份
供试品溶液,测定峰面积。结果峰面积的 RSD为 1. 18% ( n = 6 ) ,表
明该方法重复性较好。
加样回收试验:精密称取已知含量的槐枝药材粉末0. 25 g,共
9 份,分别精密加入对照品贮备液 2,2,2,3,3,3,5,5,5 mL,按照供
试品溶液制备方法制备溶液并测定芦丁峰面积,计算回收率。结果
见表 1。
2.4 样品含量测定
分别精密量取各供试
品溶液 10 μL,按拟订的
色谱条件测定槐枝、槐叶
中芦丁的峰面积,计算芦
丁含量。结果见表 2。
3 讨论
试验结果显示,同一植株、不同生长年限的槐枝中芦丁的含量
不同,嫩枝中芦丁含量最高,2 年生枝条次之,3 年生枝条中芦丁含
量最低。说明槐枝中芦丁的含量随着其生长年限的增加而减少,这
为寻找芦丁含量高、优质的镇痛药物槐枝提供了依据。不同槐树植
株中嫩枝的芦丁含量也不相同,这说明槐树嫩枝中芦丁含量的高
低与槐树生长环境、植株的大小有关,提示在寻找中药材槐枝时要
注意这一问题。而在同一植株嫩枝的不同部位中,槐枝枝皮中芦丁
的含量最高,木质部中也含有芦丁。虽然木质部中芦丁含量较低,
但为了扩大芦丁来源,提高槐枝各部位的利用率,木质部也具有利
用价值。
本试验还对不同植株的槐叶中芦丁含量进行了测定,有些植
株的槐叶中芦丁含量比枝条中含量还要高,说明槐叶也可作为芦
丁提取的一个重要来源,这为进一步扩大芦丁的天然来源提供了
参考,同时也为进一步开发槐叶制剂奠定了基础。
作者简介:熊维政(1956 -),男,主任药师,硕士研究生导师,
河南羚锐制药股份有限公司董事长,主要从事新药开发研究和制
药企业管理,(电话)0376 - 2976759(电子信箱)xuelian - abc2009@
163. com。
参考文献:
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1982:2 005 - 2 006.
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(收稿日期:2010 - 07 - 02;修回日期:2011 - 01 - 20 )