全 文 ：　　
基金项目:国家科技部资助项目(99-929-01-05)
作者简介:郑友兰 ,女 ,教授 ,硕士生导师　　Tel:(0431)4533304　　Fax:(0431)4845181　　E-mail:youlanda5626@sina.com
RP-HPLC测定西洋生晒参和西洋红参中人参皂苷含量
郑友兰1 ,杨春花1 , 2 ,鲍建才1 ,3 ,肖杨1 ,刘刚1 ,3(1.吉林农业大学中药材学院,长春 130118;2.长春医学高等专科学校 ,长春 130031;
3.承德颈复康药业集团 ,河北 承德 067000)
摘要:目的　RP-HPLC测定西洋生晒参和西洋红参中人参皂苷含量。 方法　利用 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪进行测
定。色谱柱为德国Nudeosil-C18(4.6 mm×150 mm , 5μm);流动相为乙腈-水梯度洗脱 , 流速为 1.5 mL·min-1;检测波长203 nm 。
结果　西洋生晒参和西洋红参均含有较高的人参皂苷 Rb1 , Re ,与西洋生晒参比较 ,西洋红参在保留时间 27 ～ 28 min 处的 Re ,
51 min 的 Rb1 及64 min处的一未知化合物的含量均有明显变化 ,此点在以往的西洋红参研究中鲜见报道。结论　本方法简便
可靠 、快速 、重现性好 ,适用于西洋生晒参和西洋红参中人参皂苷含量测定 ,为进一步研究西洋红参的成分及其药理作用提供
了参考数据。
关键词:高效液相色谱法;西洋生晒参;西洋红参;人参皂苷
中图分类号:R284　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2006)19-1494-03
Determination of Ginsengnosides in Dry Radix quinguefolii and Red Radix quinguefolii By RP-HPLC
ZHENG You-lan1 , YANG Chun-hua1 ,2 ,BAO Jian-cai1 , 3 , XIAO Yang1 ,LIU Gang1 ,3(1.College of Chinese Medicinal Material ,
Jilin Agriculture University , Changchun 130118 , China;2.Changchun High Medical Science Training School , Changchun 130031 , China ;3.
Chengde Jing fu kang Pharmaceutical Group , Chengde 067000 , China)
ABSTRACT :OBJECTIVE 　 To develop a HPLC method for the determination of Ginsenosides in Dry Panax quinguefolius L.and Red
使得萃取率下降 。
4　讨　论
反胶束的萃取率与水相 pH 的调节方式有关 。
用缓冲溶液调节时 ,萃取率与 pH无关 ,用氨水调节
时水相的 pH 与反胶束的萃取率密切相关 。
盐浓度是影响卡那霉素萃取率的主要因素之
一。萃取时在两相分层清楚的基础上尽可能的低盐
浓度是保持高萃取率的关键。
反胶束萃取卡那霉素是可行的 ,在 KCl为 0.05
mol·L-1 ,萃取前发酵滤液的 pH 10.0时 ,1 mol·L-1
HDEHP-TBP-异辛烷反胶束萃取卡那霉素发酵滤液
的萃取率 88.6%。而日前工业上离子交换法提取
卡那霉素发酵滤液的单级萃取率一般为 82%～
86%左右 。重要的是反胶束在萃取过程表现极为稳
定 ,不会由于萃取中的机械混合而破坏导致生化物
质返回到料液;反胶束可反复使用;反胶束可实现连
续化生产 。因此该工艺在深入研究的基础上有一定
的实用价值。
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(收稿日期:2005-11-22)
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Panax quinguefolius L.METHODS 　Agilent 1100 Series instrument was used.The separation was performed on a Nudeosil-C18(4.6 mm×150
mm , 5μm)with gradient elution.The mobile phase consisted of acetonitrile-H2O(48∶52);the flow rate of 1.5 mL·min-1;the detection wavelength
was at 203 nm.RESULTS　The contents of ginsenosides-Rb1 and ginsenosides Re were both high in Dry Panax quinguefolius L.and Red Panax
quinguefolius.Compared with Dry Panax quinguefolius L, the contents of ginsenosides Re with the retention time of 27～ 28 min , ginsenosides-Rb1with
the retention time of 51 min and an unknown compound with the retention time of 64 min were changed obviously.CONCLUSION 　This method is
simple , convienent , rapid and suitable for the determination of Ginsenosides in Dry Panax quinguefoliu L.sand Red Panax quinguefolius L..
KEY WORDS:HPLC;Radix quinguefolii L.;Red Panax quingefolius L.;Ginsenosides
　　西洋参为五加科(Araliaceae)植物西洋参 Panax
quinguefolium L.的干燥根 ,具有益肺阴 、清虚火 、生津止
渴 ,治肺虚久咳、失血 、咽干口渴、虚热烦倦等作用[ 1-2] 。
人参皂苷是其主要有效成分 ,主要为人参皂苷Ro ,Rb1 ,
Rb2 ,Rb3 ,Rc ,Rd ,Re ,Rf ,Rg1 ,Rg2 , Rh2等[ 3-5] ;西洋红参为
鲜西洋参的加工品 ,其有效成分的研究鲜见报道。本
实验应用 RP-HPLC对西洋生晒参和西洋红参中人参皂
苷含量进行比较测定 ,为西洋参两种加工品中人参皂
苷含量和临床应用提供参考数据。
1　材料与仪器
1.1　材料
西洋参(Panax quinguefolium L.)根 ,由吉林农业
大学张崇禧教授购于吉林省抚松县一参场并鉴定 。
自行加工西洋红参。
1.2　试剂
乙腈(色谱纯);甲醇 、正丁醇均为分析纯 ,水为
三重蒸馏水。人参皂苷 Rb1 , Rb2 , Rd , Re , Rg1 , Rg2标
准品(中国药品生物制品检定所)。
1.3　仪器
Agilent1100Series高效液相色谱仪;色谱柱为德
国Nudeosil-C18(4.6 mm×150 mm ,5μm)。
2　方　法
2.1　色谱条件
乙腈-水梯度洗脱 ,流速为 1.5 mL·min-1 ,检测
波长 203 nm。
2.2　对照品溶液的制备
精密称定人参皂苷 Rb2 ,Rd ,Re ,Rg2各5.00 mg ;
Rb1 4.30 mg , Rg1 6.05 mg分别加甲醇定容置 5 mL 量
瓶中 ,摇匀 ,待测 。
2.3　样品溶液制备
取过 60目筛的西洋参粉末 3份 ,每份 1 g ,精密
称定 ,用滤纸包后分别置于索氏提取器中 ,用 60 mL
氯仿浸泡脱脂 12 h ,水浴加热回流提取 12 h后将滤
纸包取出 ,挥干氯仿;再用 60 mL 甲醇置索氏提取器
中回流提取 12 h。将甲醇液滤过 ,滤液挥干后加水
溶解 ,用水饱和正丁醇萃取 3 次 ,合并正丁醇层 ,减
压回收至干 。将残余物加少许甲醇(约 10 mL)溶
解 ,再次滤过 ,将滤过液转置 10 mL 量瓶中定容 ,待
测 。西洋红参样品液处理方法同上。
2.4　线性关系考察
将各对照品母液逐一按照标准曲线法配制成系
列浓度 ,用甲醇定容到2mL ,摇匀 ,得到系列浓度的对
照品溶液。分别进样3次每次 20 μL ,记录峰面积;以
对照品质量浓度(mg·L-1)为横坐标(ρ),以对照品的
峰面积为纵坐标(A),得到如下标准曲线:
人参皂苷 Rb1:A=3 485.984 01ρ+2.913 206 3 ,
(r=0.999 5 ,线性范围:0.05 ～ 1.00 mg·L-1);人参皂苷
Rb2:A=3 507.154 97ρ+14.437 603(r=0.999 6 ,线性范
围:0.05 ～ 0.8 mg·L-1);人参皂苷 Rd:A=4 091.526 86
ρ+55.075 282(r=0.998 8 ,线性范围:0～ 1.00mg·L-1);
人参皂苷Re:A=3 448.61ρ-31.32(r=0.999 8 ,线性范
围:0.05 ～ 1.00 mg·L-1);人参皂苷 Rg1:A=4 683.38ρ-
103.44(r=0.999 4 ,线性范围:0.1 ～ 1.5 mg·L-1);人参
皂苷Rg2:A=5 668.11ρ+33.322 646(r=0.999 4 ,线性范
围:0.05 ～ 1.00 mg·L-1)。
2.5　精密度实验
取同一对照品溶液按“2.1”色谱条件重复进样 6
次测定峰面积 ,得各人参皂苷 RSD值如下:Rb10.41%
(n=6), Rb2 0.44%(n =6), Rd 0.49%(n =6), Re
0.32%(n=6),Rg1 0.41%(n=6),Rg2 0.49%(n=6)。
2.6　回收率实验
经回收率实验测定 ,人参皂苷 Rb1为 100.05%
(n=6),人参皂苷 Rb2为 101.32%(n =6),人参皂苷
Re 为 99.90%(n=6),人参皂苷 Rd为 98.00%(n=
6),人参皂苷 Rg1为 100.01%(n=6),人参皂苷 Rg2
回收率为99.98%。
2.7　色谱系统适应性
以 Re 计算理论塔板数为 27 256 ,与相邻峰的分
离度 R=3.042 ,待测的另几组组分之间的 R值均大
于 1.5 ,理论塔板数大于 2 000。
2.8　含量测定
按“2.3”制备的供试液 ,每次取 20 μL 注入色谱
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仪 ,重复 3次 。记录色谱峰面积 ,利用标准曲线方程
计算含量[ 6] 。
3　结　果
结果见HPLC谱图 1 ～ 3和表 1。
图 1　人参皂苷 Rb1 , Rb2 , Rd , Re , Rg1 , Rg2 HPLC 谱
Fig 1　HPLC separate spectrum of ginsenosides Rb1 , Rb2 , Rd , Re ,
Rg1 , Rg2
图 2　西洋生晒参 HPLC 谱图
Fig 2　HPLC separate spectrum of dry Panax quinquefolius L.
图 3　西洋红参 HPLC 谱图
Fig 3　HPLC separate spectrum of the red HPLC separate spectrum
of the red Panax quinquefolius L.
4　讨　论
4.1　西洋鲜参加工成西洋红参过程中人参皂苷
Rb1转化成 Rd , Rg3 , Rh2致使 Rb1的含量由生晒参的
2.212 9%减少到 1.430 3%;人参皂苷 Re 转化成
Rg1 ,Rg2 ,Rh1致使Re含量由生晒参的0.918 8%减少
　　
表 1　西洋生晒参和西洋红参中人参皂苷含量.%
Tab 1　Content of ginsengnosides in two kinds of Panax quingue-
folium L..%
Samples Rb1 Rb2 Rd Re Rg1 Rg2
Dry P.quinguefolium L. 2.212 9 0.011 2 0.296 5 0.918 8 0.090 4 0.137 5
Red P.quinguefolium L. 1.430 3 0.058 9 0.237 8 0.536 9 0.116 3 0.120 9
到 0.536 9%;人参皂苷 Rg2 , Rd的含量亦有所减少;
而 Rg1 ,Rc ,Rb2的含量却有明显增加。
4.2　由表 1分析可知西洋鲜参加工成西洋红参后 ,
其有效成分有所改变 ,在保留时间 27 ～ 28 min处的
Re ,51 min处的 Rb1含量有明显变化;特别是在保留
时间64 min处有一未知峰有待于进一步研究 。
4.3　人参加工成红参后 ,人参皂苷 Rb1转化成 Rd ,
Rg3 、Rh2 ,致使红参的免疫功能和抗癌活性强于生晒
参;人参皂苷 Re 转化成 Rg1 , Rg2 ,Rh1 ,致使红参的强
心作用和改变微循环的功效也强于生晒参 。西洋参
加工成西洋红参也发生了类似的成分转化 ,西洋红
参的上述药理作用是否会增强 ,有待进一步研究 。
本方法简便可靠 、快速 、重现性好 ,适用于西洋
生晒参和西洋红参中人参皂苷含量测定 ,为进一步
研究西洋红参的成分及其药理作用提供了参考数
据 。
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(收稿日期:2005-07-18)
《中国医院药学杂志》2007年征订启事
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