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天台乌药叶应用概述及其采收期的考察



全 文 :【中药研究】
天台乌药叶应用概述及其采收期的考察
何国庆1  王 丽2  王 利1  陈方标1  张 晓1
1 浙江天台山乌药生物工程有限公司 浙江 天台 317200
2 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053
摘要 目的:摸清乌药叶所含标志性成分槲皮苷含量随季节的变化的规律从而确定最佳采收期。方法:
对乌药叶应用加以概述 , 定点采集全年 12 个月份天台乌药叶 , 及时晒干 , 采用高效液相色谱法 ,
ZORBAX ECLIPSE XDS-C18色谱柱 (4.6*150mm , 5μm);流动相:乙睛-0.5%冰醋酸 (18∶82);
检测波长:254nm;流速:1m l/min;柱温:30℃, 测定天台乌药叶中槲皮苷的含量。结果:天台乌药
叶具有较广泛的食药价值 , 12个月中天台乌药叶槲皮苷的含量在 0.27%~ 0.74%之间变化。结论:槲
皮苷的含量随采摘时间的不同有较大差异 , 通常以含量及产量相对较高的 7 、 8月采摘为宜。
关键词 天台乌药叶 高效液相色谱法 槲皮苷含量 采收期
  乌药叶为樟科植物山胡椒属植物乌药 (Lindera
agg regate Kosterm)的干燥叶 。乌药为浙江传统道地
常用中药材 , 天台山区域民间常采其嫩叶作茶饮 , 能
补中行气 、健胃消食 。王军伟等[ 1] 对乌药植化及药理
活性分析表明 , 乌药及其叶具有广泛的药理活性 , 在
临床上已得到了广泛的应用 。多种本草典籍记载及现
代研究表明 , 乌药叶具有较高的食 、药用价值 , 目前
尚没有对其采摘期考察的报道。本文将对乌药叶的应
用情况加以概述 , 并参照肖梅等[ 2] 采用高效液相色谱
法测定不同月份乌药叶中标志性的黄酮成分槲皮苷含
量 , 比较后再确定天台乌药叶的最佳采收期 , 以便于
更好地开发和利用它。
1 天台乌药叶的应用概述
1.1 典籍应用记载:最早收载乌药的宋 《开宝本
草》[ 3] 载:“乌药……其叶及根嫩时采作茶片炙碾 , 服
能补中益气 , 偏止小便滑数。” 明 《食物本草》[ 4] 载:
“今人采 ……南烛 、 乌药诸叶皆可为饮 , 以乱茶云。”
明 《本草纲目》[ 5] 载:“ ……乌药以产天台者为胜 , 其
嫩叶炙碾煎饮代茗 , 补中益气 , 止小便滑数” 。上述
典籍记载表明 , 乌药叶在宋代已有作茶饮的习惯 , 并
延续至今。
1.2 现代应用研究:张茂江[ 6] 用乌药叶捣敷治疗痈
疽 , 同时利用乌药叶 “上理脾胃元气 , 下通少阴肾
经” 的功效治疗胃痛取得良好效果 。日本利用乌药叶
为原料制成的产品如 “徐福茶” 、 “徐福酒” 等早已上
市 , 梁向明等[ 7] 对日本产的乌药叶茶在健康人体环境
下的抗氧化作用进行了研究 , 结果表明乌药叶茶能使
机体抗氧化能力得到明显提高 。陶曙等[ 8] 对乌药叶的
安全性进行了研究 , 各项指标表明乌药叶属实际无毒
级 , 未见遗传毒性 , 长期服用是安全的。周立东等[ 9]
对乌药叶中所含 SOD 的活性进行了测定 , 表明天台
乌药叶含有 SOD , 含量与采摘季节和保存方法有关。
张朝风等[ 10] 对乌药叶的化学成分进行了研究 , 表明乌
药叶主要含有黄酮类物质 。顾莉蕴等[ 11]考察了乌药叶
黄酮的抗氧化作用 , 初步探讨其抗氧化机制 , 结果表
明天台乌药叶总黄酮能通过清除自由基 , 抑制脂质过
氧化产生 , 从而保护 CCl4 所致小鼠急性肝损伤 , 其
机制可能与调节抗氧化相关基因的表达有关 。
2 天台乌药叶采收期的考察
2.1 仪器与试药:分述如下 。
2.1.1 仪器:安捷伦 1200液相色谱仪 , UV检测器 ,
AS2060B 超声波清洗仪 (天津奥特思斯仪器有限公
司)。
2.1.2 试药:槲皮苷对照品 (批号 111538-200403 ,
购自中国药品生物制品检定所), 天台乌药叶 (共 12
个批次 , 采收时间全部在全年中每月下旬 , 样品全部
是采自浙江省天台县三州乡固定的野生天台乌药。乌
药叶采摘后及时晒干 , 密封保存), 乙腈为色谱纯
(美国天地公司), 冰醋酸为分析纯 (浙江巨化股份有
限公司), 水为超纯水。
2.2 方法与结果:分述如下 。
2.2.1 色谱条件:色谱柱:ZORBAX ECLIPSE XDS
-C18 (4.6*150mm , 5μm);流动相:乙腈-0.5%
冰醋酸 (18∶82);检测波长:254nm;流速:1ml/
min;柱 温:30℃;进 样 量:10μl;分 析 时 间:
30min 。在上述色谱条件下 , 理论踏板数大于 4000 ,
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分离度大于 1.5 , 标准品色谱图及样品色谱图如下图 1。
A:槲皮苷对照品;B:乌药叶样品;1:槲皮苷
图 1 槲皮苷对照品与乌药叶液相色谱图
2.2.2 对照品溶液的制备:精密称取槲皮苷对照品
5mg , 置入 5m l容量瓶中 , 加甲醇溶解并定容至 5m l ,
即得对照品储备液 。精密量取槲皮苷对照品储备液
1m l , 置于 10m l容量瓶中 , 甲醇定容 , 得到 0.1mg/
ml的槲皮苷对照品溶液。
2.2.3 供试品溶液制备:称取天台乌药叶粗粉 1g ,
置于圆底烧瓶中 , 加入 100ml70%的乙醇回流提取
1h , 过滤 , 置 100ml 容量瓶中 , 放置至室温 , 定容 ,
摇匀后过 0.45μm滤膜 , 滤液即为供试品溶液。
2.2.4测定结果:对全年 12个批次天台乌药叶槲皮苷
含量测定结果按 1 ~ 12 月份 , 槲皮苷含量分别为:
0.39%、 0.39%、 0.41%、 0.27%、 0.74%、 0.45%、
0.67%、 0.69%、 0.38%、 0.67%、 0.57%、 0.43%。
槲皮苷变化趋势如图 2。
图 2 不同月份天台乌药叶中槲皮苷含量趋势图
从上图表可见 , 不同月份采摘的其槲皮苷含量有
较大差别 , 5 月份含量最高 , 7月 、 8 月次之。其中 ,
5月份含量高叶嫩 , 宜作茶饮 , 与典籍记载 “嫩叶代
茶” 相符 。但 5月叶嫩产量少 , 用作食药原料的乌药
叶采摘时间则以 7 、 8两月为宜。
3 讨论
自有天台乌药记载以来 , 就有了天台乌药叶用作
药食的记载。其含有的黄酮类 、 SOD 类成分有效成
份 , 具有的补中益气 、行气止痛 、 抗氧化 、抗炎等作
用。日本利用乌药叶开发出来的产品已广泛销售 , 在
国内尽管部分乌药产区均有利用乌药叶作茶的习惯 ,
但其功用 、 有效成分含量 、 采摘季节 、标准等的研究
整理还相对缺乏 , 本文对其应用作了概述 , 对其以标
志性有效成分含量为指标做了采摘期的初步考察 , 为
更好 、更大规模地开发天台乌药叶 , 提供一定的参考
依据 。
利用高效液相色谱法测定乌药叶含量的过程中参
考了肖梅等[ 2]的色谱条件 , 同时做了色谱条件的系统
适用性试验 , 实验过程中如果按照本实验室仪器定量
环进样 20μl , 槲皮苷标准品色谱图出现明显的前延 ,
对称度大于 2 , 通过稀释标准品之后再进样 , 槲皮苷
峰的性能没有好转 , 当用进样针进样 10μl时 , 标准
品 、 样品槲皮苷峰对称因子为 1.11 , 塔板数大于
4000 , 分离度大于 1.5 , 色谱各性能参数较为理想 。
4 参考文献
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收稿日期 2010-11-03
·147·浙江中医杂志 2011 年 2月第 46 卷第 2 期