全 文 ：三七叶苷的提取分离与纯化
吴少雄1 , 2　王保兴3 　郭祀远1　李　琳1
1(华南理工大学食品与生物工程学院 , 广州 , 510640)　2(昆明医学院营养与食品研究所 , 昆明 , 650031)
3(云南瑞升科技有限公司 , 昆明 , 650223)
摘　要　以总皂苷为指标 , 探讨了三七叶苷提取分离与纯化工艺条件。结果表明 , 乙醇体积分数为 80%,用量
为药材质量的 10倍 , 回流时间为 1.5 h , 乙醇洗脱体积分数为 70%为佳 , 皂苷提取率 90%。测定了 AB-8树脂吸
附容量为 104.8 mg/ g干树脂。
关键词　三七叶 , 皂苷 ,分离纯化
第一作者:博士研究生 ,副研究员。
收稿时间:2004-09-10 ,改回时间:2004-11-30
　　三 七 叶 苷 为 五 加 科 植 物 三 七 [ Panax
notoginseng(Burk)F .H.Chen]的茎叶提取得到的
总皂苷 ,是三七茎叶中的主要有效成分 ,现已从中分
得7 种皂苷成分 , 其中 4 种为已知人参皂苷 Rb1 、
Rb3 、Re和七叶胆苷 IX , 还有 3种为新皂苷:三七皂
苷Fa、Fc和 Fe , 它们都是以原人参二醇为苷元的系
列皂苷[ 1] 。三七茎叶总皂苷有延寿和增强机体活力
的作用[ 2] ,此外三七叶皂苷能显著降低血清总胆固
醇和血清甘油三酯的含量[ 3] , 并具有镇痛与镇静作
用。目前 , 主要用乙醇加热回流提取 , 再用正丁醇
萃取或大孔吸附树脂纯化等[ 4] 。文中以总皂苷为考
察指标 , 采用醇提-树脂法对三七叶苷的提取分离与
纯化工艺进行了研究 。
1　材料与方法
1.1　原料与试剂
三七叶购自云南省医药公司;人参皂苷 Re对照
品购置中国生物制品检定所;AB-8大孔吸附树脂 ,
南开大学化工厂;其他试剂均为分析纯。
1.2　仪　器
UV-752型紫外分光光度计:上海第三分析仪器
厂;LXJ-Ⅱ型离心沉淀机:上海医用分析仪器厂;岛
津 UV-210A型紫外-可见分光光度计。
1.3　方　法
1.3.1　三七叶苷的提取分离
将一定量三七茎叶经清洗 、粉碎后 , 用不同体积
分数乙醇回流提取一定时间 , 过滤 、脱色素 、浓缩 ,
浓缩后的提取液减压蒸馏除去乙醇溶液 , 上 AB-8大
孔吸附树脂柱 , 水洗脱 , 去多糖等杂质 , 弃去洗脱
液 , 再用不同体积分数乙醇洗脱得洗脱液 ,减压回收
乙醇 , 真空干燥 , 即得三七叶苷 。
1.3.2　三七叶苷的含量测定[ 5]
(1)标准溶液的配制 。精密称取人参皂苷 Re 对
照品 0.020 0 g ,用甲醇溶解并定容至 10.0mL ,即每
毫升含人参皂苷 Re 2.0mg 。
(2)测定波长的选择。精密吸取标准溶液 0.5mL
及同样浓度的三七叶苷样品溶液 0.5mL ,分别置于
具塞磨口试管 , 沸水浴中蒸干甲醇 ,加人质量分数
5%香草醛冰醋酸溶液 0.2mL ,高氯酸 0.8mL ,摇匀 ,
密塞 ,于 60℃水浴加热 10 min , 取出后用流水冷却 ,
再加人冰醋酸5.0mL 摇匀 ,用岛津 UV-210A 型紫外
一可见分光光度计于 500 ～ 600 nm 波长处分别测定
其吸收图谱 ,结果在 560 nm 波长处均有最大吸收 ,故
选择 560 nm 为测定波长。
(3)样品测定。精密吸取 1.3.1 中洗脱液 1.0
mL , 抽滤后 , 置于 60℃水浴挥干;同样精确吸取人
参皂苷 Re标准溶液100μL 于蒸发皿中 ,置于 60℃水
浴挥干。在已挥干的蒸发皿中 ,分别准确加入 0.2
mL 质量分数为 5%香草醛冰醋酸溶液 ,0.8mL 高氯
酸 ,混匀后移入 5mL 具塞刻度离心管中;于 60℃水
浴加热 10min , 取出后用流水冷却 ,再准确加人冰醋
酸 5.0mL 摇匀 ,以 1 cm 比色池于 560 nm 波长处测
定吸收值 ,通过计算求出含量。
总皂苷含量(μg/g)=对照品量 ×A样 / A对样品量
式中:A样 , 样品吸收值;A对 , 对照品吸收值;
对照品量 ,标准管人参皂苷 Re 的量(μg);样品量 ,试
样质量/体积(g/mL)。
提取液中皂苷量=总皂苷含量×溶液体积
皂苷提取率/ %=提取液中皂苷量/三七叶中皂
苷量＊×100
＊经测定三七叶中皂苷含量为 38mg/g 。
生物活性物质提取
2005年第 31卷第 1期(总第 205期) 149　
DOI :10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2005.01.042
2　结果与讨论
2.1　醇提工艺
2.1.1　醇提体积分数对三七叶苷的影响
精密称取干燥的三七茎叶 5.0 g ,加入确定体积
分数的乙醇溶液 50mL 。回流提取 1.5 h ,过滤 ,脱色
素得供试液 。用 1.3.2方法进行皂苷含量测定 ,并计
算出总皂苷量及皂苷提取率。结果见图 1 、图 2。从
图 1 、图 2中可以看出 80%乙醇提取时皂苷含量及皂
苷提取率相对较高。
图 1　乙醇浓度对皂苷含量的影响
图 2　乙醇浓度对皂苷提取率的影响
2.1.2　不同提取时间对提取结果的影响
精密称取干燥的三七茎叶 5.0 g ,加入体积分数
80%的乙醇溶液 50 mL , 分别回流提取 0.5 、 1.0 、
1.5 、 2.0 、 2.5 h。过滤 ,脱色素得供试液。用 1.3.2
方法进行皂苷含量测定 ,并计算出总皂苷量及皂苷提
取率 。结果见图3 、图4 。回流提取 1.5 h能把三七茎
叶皂苷提取完全 。
2.1.3　乙醇用量对三七叶苷的影响
精密称取干燥的三七茎叶 5.0 g ,按不同固液比
(g∶mL)用体积分数 80%的乙醇分别回流提取 1.5
h , 过滤 ,脱色素得供试液 , 用 1.3.2 方法进行皂苷
含量测定 ,并计算出总皂苷量及皂苷提取率。结果见
图5 、图 6。从图 5、图 6中可以看出固液比为 1g∶10 mL
提取时皂苷含量及皂苷提取率相对较高。
2.1.4　醇提最佳工艺的确立
图 3　皂苷含量随提取时间的变化
图 4　皂苷提取率随提取时间的变化
图 5　乙醇用量对皂苷含量的影响
图 6　乙醇用量对皂苷提取率的影响
　　10倍质量 80%乙醇 , 回流提取 1.5 h 。皂苷提
取率 90%。
食品与发酵工业 FOOD AND FERMENTAT ION INDUSTRIES
150　 2005 Vol.31 No.1(Total 205)
2.2　纯化工艺
2.2.1　样品制备及预处理
精密称取干燥的三七茎叶 50.0 g ,按醇提最佳工
艺条件提取 ,提取液经过滤 、脱色素浓缩 、减压蒸馏除
去乙醇溶液后作为样液(总皂苷含量16.75mg/mL)。
2.2.2　吸附容量的测定
精密称取已处理好的 AB-8大孔吸附树脂约 5 g ,
水充分溶胀 ,装入层析柱 ,精密吸取样液 100mL ,等
量水稀释 ,定容样 ,水洗 50mL , 再用乙醇洗脱 , 洗至
醋酐-浓硫酸反应为阴性 , 收集洗脱液 , 定容 。用
1.3.2方法进行皂苷含量测定 。利用其差值 ,计算出
树脂的吸附容量 。平行 3份 ,结果见表 1。
表 1　AB-8 大孔吸附树脂的吸附容量
干树脂 吸附前皂苷 吸附前皂苷 吸附容量 精密度
重/ g 总含量/mg 总含量/mg /mg.g -1 / %
5.086 2 1 675 1 140.50 105.5
5.087 9 1 675 1 142.16 104.7 0.67
5.027 1 1 675 1 145.65 104.1
　　饱和吸附量=(原液皂苷量一吸附后皂苷量)/树脂质量
　　由表 1可知 ,树脂 AB-8 平均吸附容量为 104.8
mg/g 干树脂。
2.2.3　乙醇体积分数对皂苷洗脱的影响
精密称取干燥的三七茎叶 5.0 g ,按上述最佳工
艺条件处理;浓缩后的提取液减压蒸馏除去乙醇溶
液;上 AB-8大孔吸附树脂柱 , 水洗 50 mL , 再用不
同体积分数乙醇洗脱 , 洗至醋酐-浓硫酸反应为阴
性 , 收集洗脱液 , 用 1.3.2 方法进行皂苷含量测定 ,
并计算出总皂苷量。结果如图 7所示。可以看出 ,在
70%乙醇洗脱液中皂苷含量最高。
图 7　乙醇洗脱体积分数对皂苷提取的影响
3　结　论
研究了利用醇提 、AB-8大孔吸附树脂纯化工艺
分离提取三七茎叶皂苷的方法 。采用紫外光谱法测
定了总皂苷的含量 。考查了乙醇体积分数 、提取时
间 、溶剂用量以及乙醇洗脱浓度对三七茎叶皂苷提取
的影响 , 确立了分离提取三七茎叶皂苷最佳工艺条
件:10倍质量 80%乙醇 , 回流提取 1.5 h;最佳乙醇
洗脱体积分数 70%。皂苷提取率 90%;AB-8树脂吸
附容量为 104.8mg/g 干树脂 。
参 考 文 献
1　Tsung Ren Yang , Ryoji Kasai , Jun Zhou et al.Dammarane
saponins of leaves and seeds of Panax no toginseng[ J] .Phy-
tochem , 1983 , 22(6):1 473 ～ 1 478
2　徐　庆 , 赵　一.三七叶总皂苷对果蝇寿命的影响[ J] .广
西中医药 , 1990(4):433
3　徐　庆 ,赵　一 , 成桂仁.三七叶总皂苷降血脂作用的研
究[ J] .中国中药杂志 , 1993(6):367
4　唐第光.大孔吸附树脂法提取三七总皂苷工艺探讨[ J].
中成药 , 1990 , 12(8):5 ～ 7
5　王光亚主编 , 保健食品功效成分检测方法[ M] , 北京:中
国轻工业出版社 , 2002.76 ～ 83
Study on Extraction &Purification Processes of Total
Saponins of Panax Notoginseng Leaves
Wu Shaoxiong1 , 2 　Wang Baoxing3 　Guo Siyuan1 　Li Lin1
1(College of Food and Bio logical Engineering , South China University of Tech No logy , Guangzhou , 510640 , China)
2(Institution of Nutrition and food science , Kunming Medical College , Kunming , 650031 , China)
3(Yunnan reascend science & Technology Ltd , Kunming , 650223 , China)
ABSTRACT　The routine assay of ext raction and purification of to tal saponin f rom leaves of Panax notoginseng
(Burk)F.H.Chen w as selected using the total saponin as an index.The opt imal parameters of ex traction were
that:adding 10 t imes quantities of 80% alcohol , ref luxed for 1.5h;the ext racting rate of total saponin w as more
than 90%.The purification process of total saponin w ith AB-8 resin w as studied by taking adsorption ratio , ratio
of elution.The results show that the good process of the saponin purification were 70%eluting alcohol concentra-
tion.The adsorption ratio w as 104.8 mg.g-1 dried resin.
Key words　Panax notoginseng(Burk)F H Chen , saponin , ext raction and purification
生物活性物质提取
2005年第 31卷第 1期(总第 205期) 151