全 文 ：书云南大学学报(自然科学版)，2014，36(5):734 ～ 739 DOI:10． 7540 / j． ynu． 20140004
Journal of Yunnan University
文山、红河三七花皂苷含量的比较研究*
刘 英1，2，曲 媛1，2，崔秀明1，2，朱 琳3，朱 艳3，冯光泉3
(1．昆明理工大学 生命科学与技术学院，云南 昆明 650500;2．中药质量与资源开发滇澳联合实验室，云南 昆明 650500;
3．文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663000)
摘要:对三七道地产区文山州与新产区红河州三七花皂苷含量进行比较．采用 HPLC同时测定三七花中单
体人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2 和 Ｒb3 的含量，采用紫外分光光度法测定其总皂苷含量．不同产地三七花中的人参皂苷
Ｒb1 和 Ｒb3 有一定差异;同一产地不同年生三七花单体皂苷含量差异不大．三七花中总皂苷含量相比，红河州
建水县三七花总皂苷含量最高，为 17． 58% ．红河新产区三七花质量与文山道地产区三七花质量无明显差异．
关键词:三七花;高效液相色谱法;紫外分光光度法;皂苷;含量测定
中图分类号:Ｒ 932 文献标志码:A 文章编号:0258 － 7971(2014)05 － 0734 － 06
三七花为五加科人参属植物三七(Panax noto-
ginseng(Burk)F． H． Chen)花序的干燥品，主产于
我国云南、广西［1］． 三七花既是名贵中药材，也可
作为优等食品、保健品，常用于泡茶、炒肉、煲
汤［2 ～ 3］．现代药理学研究发现，三七花皂苷类成分
具有抗炎、镇痛、活血化瘀、抗高血压等作用［4 ～ 6］．
三七花民间使用历史悠久，近年来许多企业以三七
花为原料加工成各种食品、饮料以及保健食品［7］，
获得巨大的经济效益．由于三七社会需求量的不断
增加，加之三七种植需要较长时间的轮作，近几年，
三七产地由文山道地产区向周边如红河州等地扩
展．现阶段红河州已经成为仅仅次于文山州的第二
大三七主产地．前人对产于文山州的三七花皂苷含
量有过研究［8 － 9］，但对红河新产区三七花皂苷含量
未见报道，为考察新产区三七花质量，比较新产区
三七花质量，本研究比较了文山三七产区与红河三
七产区三七花中 3 个单体皂苷及总皂苷的含量．
1 材料与仪器
UV －2600 紫外分光光度计(日本岛津公司) ;
LC －20AB高效液相色谱仪(日本岛津公司，包括
在线脱气机 DGU －20A3Ｒ(C)、二元泵 LC －20AB、
自动进样器 SIL － 20A、柱温箱 CTO － 20A、检测器
SPD － 20A) ;Thermo Scientific Hypersil GOLD C18
色谱柱(美国 Thermo Scientific 公司，250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ;FLB －200 型万能高速粉碎机(上
海菲力博食品机械有限公司) ;优普系列超纯水器
UPT － I － 20T(成都超纯科技有限公司) ;CP114 电
子天平(上海奥豪斯仪器有限公司) ;TD25 － WS台
式低速离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公
司)．
对照品人参皂苷 Ｒb1 由中科院昆明植物研究
所陈纪军老师提供，人参皂苷 Ｒb2(批号:MUST—
12110602)购自北京北纳创联生物技术研究院，人
参皂苷 Ｒb3(批号:111686—201002)购自中国药品
生物制品检定所;对照品三七总皂苷由文山学院文
山三七研究院提供． 乙腈(美国 Sigma 公司) ;甲醇
(美国 Sigma公司) ;超纯水(来自优普系列超纯水
器) ，其他所有试剂均为国产分析纯．
三七花样品分别采自文山州文山市、丘北县、
马关县、砚山县;红河州泸西县、建水县、个旧市．
* 收稿日期:2014 － 01 － 14
基金项目:云南省应用基础研究重点项目(201301PH00028) ;云南省级人才培养项目(KKSY201326022) ;昆明理工大学分析测试基
金(20140699)．
作者简介:刘 英(1988 －) ，女，河北人，硕士生，主要从事天然产物方面的研究． E － mail:308168275@ qq． com．
通信作者:崔秀明(1963 －) ，男，云南人，研究员，主要从事生药学方面的研究． E － mail:sanqi@ vip． sina． cn．
2 方法与结果
2． 1 单体皂苷含量测定
2． 1． 1 色谱条件 色谱柱:Thermo Scientific Hy-
persil Gold (4． 6 mm × 250 mm) ;流动相:水(A)
－乙腈(B) ，进行线性洗脱:0 min 19% B，12 min
19% B，60 min 36% B，67 min 100% B;流速:1 mL /
min;柱温:30 ℃;检测波长:203 nm．按照上述色谱
条件进行测定，对照品及样品的色谱图见图 1，色
谱图基线平稳，人参皂苷 Ｒb1、Ｒb2、Ｒb3 分离程度
较好．
1．人参皂苷 Ｒb1;2．人参皂苷 Ｒb2;3．人参皂苷 Ｒb3
图 1 混合对照品(A)和三年生三七花样品(B)高效
液相色谱图
Fig． 1 HPLC chromatograms of mixed standard sample
(A)and the sample of the triennial flowers of Pa-
nax notoginseng (B) (1． ginsenoside Ｒb1;2． gin-
senoside Ｒb2;3． ginsenoside Ｒb3)
2． 1． 2 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷
Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 对照品，加甲醇溶液配置成各含人参
皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 分别为 1． 12，1． 1，0． 96 mg /L的
混合液，浓度均为 1 mmol /L，作为对照品溶液．
2． 1． 3 供试品溶液制备 将采集于不同产地的干
燥三七花粉碎，精密称取 0． 6 g粉末，加 50 mL甲醇
浸泡，静置过夜，75 ℃水浴，保持微沸 2 h，冷却，混
匀，离心，经 0． 45 μm 滤芯过滤，加甲醇定容至 50
mL，作为供试品溶液．
2． 1． 4 线性关系考察 分别精密吸取三七花对照
品人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 溶液各 1，5，50，100，
250，500 μL，加甲醇配置成浓度分别为 0． 002，
0． 01，0． 1，0． 2，0． 5，1． 0 mmol /L 的对照品溶液，测
定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，样品量为横
坐标，作线性回归，得回归方程，结果见表 1． 分析
人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 的 Ｒ
2 值均大于 0． 999，且
在 0． 002 ～ 1． 0 mmol /L范围内呈良好的线性关系，
检出限均大于最小浓度．
2． 1． 5 精密度、重现性、稳定性考察 取 2． 1． 2 中
对照品溶液各 100 μL，混合，连续进样 5 次，测得
人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 质量分数的 ＲSD 分别为
0． 70%，0． 08%，0． 19%，表明仪器精密度良好;按
1． 2． 3 条方法平行制备 5 份供试品测定含量，测得
人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 质量分数，其 ＲSD 分别为
2． 64%，3． 27%，2． 24%，均小于 4%，表明该试验
方法重现性良好;取 2． 3 供试品溶液，分别在 0，2，
4，6，8，12，24 h 进样，计算 3 种所测皂苷成分的质
量分数以及 ＲSD 值，结果得人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，
Ｒb3 质量分数的 ＲSD 分别为 2． 03%，3． 09%，2．
76%，说明供试品溶液在 24 h内稳定．
2． 1． 6 加样回收率试验 精密量取已知含量的
样品 1 mL，分别精密加入人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3
对照品适量，用甲醇定容至 2 mL，混匀，取 15 μL连
续进样 3 次，记录色谱图．根据所测峰面积，按照各
自的线性方程计算含量，以检出量、初始量之差与
加入量的比值作为加样回收率，并求 ＲSD值，结果
见表 2．
2． 1． 7 三七花单体皂苷含量测定及结果分析 分
别取采集于云南省不同产地和不同年限三七花供
试品溶液，按照 2． 1． 1 色谱条件进行测定，将测得
的峰面积积分值代入各自的线性方程，计算人参皂
苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 的质量分数，结果见表 3． 不同产
地不同生长年限三七花中单体皂苷含量参见表 3．
文山州二年生与三年生三七花中人参皂苷 Ｒb1，
Ｒb2，Ｒb3 的平均质量分数比较可见图 2(A) ，三年
生不同产地三七花中 Ｒb1，Ｒb2 和 Ｒb3 单体皂苷之
和参见图 2(B)．
含量测定结果表明，不同产地不同生长年限三
七花中单体皂苷 Ｒb1 的质量分数为 1． 30% ～
2． 19%，单体皂苷 Ｒb2 的质量分数为 0． 90% ～
1． 23%，单体皂苷 Ｒb3 的质量分数为 3． 96% ～
5． 66%，在所测定三七花样品中的单体人参皂苷
Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 中，以人参皂苷 Ｒb3 的质量分数最高
(见表 3 和图 2) ，与文献［8，9］报道结果一致．所测
3 种单体皂苷成分的质量分数均有差别，差异性主
要体现在人参皂苷Ｒb1、Ｒb3的质量分数上，而人
537第 5 期 刘 英等:文山、红河三七花皂苷含量的比较研究
表 1 标准曲线的回归方程
Tab． 1 Ｒegression equation of standard curve of three monomer ginsenosides
名称 线性范围 /(mmol·L －1) 回归方程 Ｒ2 检出限 /(mol·L －1)
Ｒb1 0． 002 ～ 1 Y = 3 × 106X + 2 027． 5 0． 999 7 0． 000 7
Ｒb2 0． 002 ～ 1 Y = 3 × 106X + 21 203 0． 999 6 0． 000 4
Ｒb3 0． 002 ～ 1 Y = 2 × 106X + 24 077 0． 999 2 0． 000 8
表 2 回收率试验(n =3)
Tab． 2 Ｒecoveries of three monomer ginsenosides (n = 3)
名称 初始量 /mg 加入量 /mg 检出量 /mg 平均回收率 /% ＲSD /%
Ｒb1 6． 26 5． 97 12． 73 108． 38 0． 82
Ｒb2 4． 26 4． 84 9． 36 105． 41 5． 43
Ｒb3 14． 63 11． 66 26． 14 98． 72 4． 53
表 3 不同产地不同年限三七花皂苷含量测定
Tab． 3 Determination of ginsenosides of the flowers of Panax notoginseng from different productive area and with different growth
years
编号 产地 生长年限
Ｒb1
w /% ＲSD /%
Ｒb2
w /% ＲSD /%
Ｒb3
w /% ＲSD /%
1 文山州文山市 1 二年生 2． 05 0． 21 1． 14 0． 16 4． 12 0． 06
2 文山州文山市 2 二年生 1． 46 0． 17 0． 91 0． 22 4． 85 0． 10
3 文山州丘北县 1 二年生 1． 67 0． 20 1． 00 0． 15 5． 39 0． 07
4 文山州丘北县 2 二年生 1． 51 0． 09 1． 03 0． 09 5． 56 0． 09
5 文山州砚山县 三年生 1． 35 0． 13 0． 90 0． 10 3． 96 0． 05
6 文山州马关县 三年生 1． 54 0． 12 0． 91 0． 21 4． 51 0． 13
7 红河州泸西县 三年生 2． 19 0． 22 1． 23 0． 07 5． 66 0． 06
8 红河州建水县 三年生 1． 49 0． 18 0． 93 0． 13 4． 49 0． 15
9 红河州个旧市 三年生 1． 30 0． 19 0． 95 0． 11 4． 46 0． 11
(A) :文山州二年生与三年生三七花中人参皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 的平均质量分数比较;
(B) :三年生不同产地三七花中(Ｒb1 + Ｒb2 + Ｒb3)%含量比较
图 2 文山州二年生与三年生三七花单体皂苷含量分析(A)与三年生不同产地三七花单体皂苷含量分析(B)
Fig． 2 Content comparison of monomer ginsenosides of the biennial and triennial flowers of Panax notoginseng in Wenshan Pre-
fecture (A)and the content comparison of monomer ginsenosides of the triennial flowers in different productive areas(A:
Content comparison of ginsenoside Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 from the biennial and triennial flowers of Panax notoginseng in Wenshan
Prefecture;B:Content comparison of (Ｒb1 + Ｒb2 + Ｒb3)% from the triennial flowers in different productive areas)
637 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 36 卷
参皂苷 Ｒb2 的质量分数差异性不大．其中红河州泸
西县三七花中的单体皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 质量分数
均高于其它产地，分别为 2． 19%，1． 23%，5． 66%，
而其它 3 个产地的质量分数均相差不大．
对相同产地不同生长年限的三七花单体皂苷
Ｒb1、Ｒb2 和 Ｒb3 的质量分数测定表明，文山州二年
生三七花(1 ～ 4 号)中单体皂苷 Ｒb1，Ｒb2，Ｒb3 的平
均值分别为 1． 67%，1． 02%，4． 98%，三年生三七
花(5 ～ 6 号)中 3 者质量分数平均值分别为
1． 44%，0． 91%，4． 24%(见图 3(A) )．两者相比较
可得，相同产地二年生三七花中单体皂苷 Ｒb1，
Ｒb2，Ｒb3 的质量分数略高于三年生，且质量分数差
异性主要体现在 Ｒb3 的质量分数上．对同一生长年
限不同产地的三七花皂苷质量分数比较得知(见
图 3(B) ) ，5 ～ 9 号样品均为三年生三七花，产地不
同，Ｒb1，Ｒb2 和 Ｒb3 单体皂苷质量分数之和分别为
6． 21%，6． 96%，9． 08%，6． 91%，6． 71%，其中红河
州泸西县三年生三七花单体皂苷质量分数之和最
高，但与其它 3 个产地的差异不显著．
2． 2 总皂苷质量分数测定及结果分析 按照文献
方法［9］制备三七花供试品溶液，并采用紫外分光
光度计法测定其总皂苷质量分数．不同产地三七花
总皂苷质量分数分析结果参见表 4 和图 3．
表 4 不同产地不同年限三七花总皂苷质量分数测定
Tab． 4 Determination of the total saponin of the flowers of
Panax notoginseng from different productive area
and with different growth years
编号 w(总皂苷)/% 编号 w(总皂苷)/%
1 16． 89 6 17． 53
2 14． 66 7 13． 73
3 17． 65 8 17． 58
4 11． 83 9 15． 43
5 15． 40
结果显示，红河州建水县三七花(8 号)总皂苷
质量分数最高，为 17． 58%;红河州泸西县三七花
(7 号)总皂苷质量分数最低，为 13． 73% ． 二年生
三七花(1 ～ 4 号)总皂苷质量分数为 11． 83% ～
16． 89%，三年生三七花(5 ～ 9 号)总皂苷质量分数
为 15． 40% ～ 17． 58%，平均值相比较，二年生总皂
苷含量略低于三年生，分别为 15． 26%和 15． 93% ．
图 3 不同产地三七花总皂苷质量分数分析
Fig． 3 Content comparison of the total saponin of the flow-
ers of Panax notoginseng from different productive
area
3 讨 论
本研究利用 HPLC 法同时测定不同产地三七
花中人参皂苷 Ｒb1、Ｒb2 和 Ｒb3 的含量． 在以上实
验条件下，仪器精密好、标样稳定性好、方法重复性
和加样回收率好，适合作为三七花中单体皂苷的定
量研究．
9 批次三七花中指标性成分人参皂苷 Ｒb1、
Ｒb2 和 Ｒb3 的含量测定结果显示:不同产地三七花
中 3 种单体皂苷成分含量均有差别，但差异性主要
集中于人参皂苷 Ｒb1、Ｒb3 的含量，而人参皂苷 Ｒb2
的含量差异性不显著．人参皂苷 Ｒb3 为三七花中主
体皂苷之一，含量高于 Ｒb1 和 Ｒb2 ． 现有文献
［8 ～ 10］
报道主要讨论三七花中主成分人参皂苷 Ｒb1 和
Ｒb3 的含量，但未对 Ｒb2 进行分析． 我们认为三七
花中人参皂苷 Ｒb2 含量也较高，所测样品均在
0． 9%以上，应该作为三七花的检测指标加以检测，
从而提高三七花质量标准的特征性及可控性．
云南省文山州是中药三七的道地产区，其种植
面积占全国 98%以上． 据相关文献［11］报道，三七
在种植上具有十分严重的连作障碍问题，土地需要
的轮作周期为 7 ～ 10 a，这直接导致了三七种植土
地周转困难，进而使适宜种植三七的地区十分紧
张．已有文献［9］分析了不同产地三七花的皂苷含
量，但局限于主产区云南省文山州，而未涉及新产
737第 5 期 刘 英等:文山、红河三七花皂苷含量的比较研究
区云南省红河州． 本研究通过对比发现，红河州泸
西县三七花(7 号)的单体皂苷含量高于文山州任
一三七花样品，红河州建水县三七花(8 号)总皂苷
含量为 17． 58%，与最高含量文山州文山三七花(3
号)含量 17． 65%相比无差异性．因此，从三七花皂
苷含量来看，红河州作为三七的第二大种植区域，
其三七花的质量是有保障的．
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837 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 36 卷
Content comparison of ginsenosides from the flowers of Panax notoginseng
in Wenshan Prefecture and Honghe Prefecture
LIU Ying1，2，QU Yuan1，2，CUI Xiu-ming1，2，ZHU Lin3，ZHU Yan3，FENG Guang-quan3，
(1． Faculty of Life Science and Technology，Kunming University of Science and Technology，Kunming 650500，China;
2． Wenshan Sanqi Ｒesearch Institute，Wenshan College，Wenshan 663000，China;
3． United Laboratories of Quality and utilization of TCM resources in Dian and Macao，Kunming 650500，Yunnan，China)
Abstract:Compare the Ginsenosides’content of the flowers of Panax notoginseng from Wenshan Prefecture
which is called Geo － authentic producing areas of Panax notoginseng and Honghe Prefecture which is a new pro-
ducing area of Panax notoginseng． HPLC was used for the determination of three monomer ginsenosides called
Ｒb1，Ｒb2 and Ｒb3，and UV spectrophotometry was used for the determination of the total saponin． The content of
Ｒb1 and Ｒb3 from flowers of Panax notoginseng which are form different productive area has certain difference;
the content of three monomer ginsenosides from flowers of Panax notoginseng which are form the same productive
area but with different growth years has no significant difference． Compared with the content of the total saponin，
flowers from Jianshui County whose content is 17． 58% is highest． The quality of the flowers of Panax notoginseng
between Honghe Prefecture which is a new producing area of Panax notoginseng and Wenshan Prefecture which
is called Geo － authentic Producing Areas of Panax notoginseng has no significant difference．
Key words:flowers of Panax notoginseng;HPLC;UV spectrophotometry;saponin;content determination
937第 5 期 刘 英等:文山、红河三七花皂苷含量的比较研究