全 文 :雪莲果中绿原酸含量的测定
严和平 1, 2 ,马学海 3
(1.红河学院化学系 ,云南蒙自 661100;2.红河学院分析测试中心 ,云南蒙自 661100;3.红河学院化学系 2004级 ,云南蒙自 661100)
摘要 [目的 ]为雪莲果的开发利用提供理论依据。 [方法 ]称取 10.0g雪莲果 ,洗净、切碎 ,加入 40%的乙醇 180ml,回流提取其中的绿
原酸 ,自然冷却后过滤。波谱定性检验选择适宜的测定波长 ,以 95%乙醇为参比溶液 ,用配制好的一系列不同浓度的绿原酸标准溶液绘
制标准曲线 ,测定提取液的吸光度 ,计算滤液中绿原酸的含量。 [结果 ]绿原酸标准品和雪莲果样品提取液在 330nm处有特征吸收峰 ,
故选定 330nm为最大吸收波长 ,测定雪莲果样品液的吸光度。雪莲果中绿原酸的平均吸光度值为 1.105,含量为 0.052%。采用分光光
度法测得雪莲果中绿原酸的 RSD值为 3.07%,平均回收率为 105.85%。 [结论]雪莲果中绿原酸的含量为 0.052%。
关键词 雪莲果;绿原酸;分光光度法;含量
中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)02-00659-02
DeterminationonChlorogenicAcidContentinSmalanthussonchifolius
YANHe-pingetal (ChemistryDepartmentofHongheUniversity, Mengzi, Yunnan661100)
Abstract [ Objective] ThestudywastoprovidethetheoreticalbasisfordevelopmentandutilizationofSmallanthussonchifolius.[ Method]
10.0gS.sonchifoliuswastakenandthechlorogenicacidinitwasextractedby40%ethanolat180mlafteritwaswashedandshreded, and
theextractingsolutionwasfilteredafternaturalcooling.Thesuitabledetectionwavelengthwasselectedthroughqualitativedeterminationof
wavespectrum.With95%ethanolasthereferencesolution, thestandardcurvewasdrawedwithaseriesofdifferentconcn.ofstandardsolu-
tionofchlorogenicacid, andtheabsorbanceofextractingsolutionwasdeterminedandthechlorogenicacidcontentinfiltratewascalculated.
[ Result] ThestandardofchlorogenicacidandextractingsolutionfromS.sonchifoliussampleallhadcharacteristicabsorptionpeakat330nm,
so330nmwasselectedtobethemaximumabsorptionwavelengthtodeterminetheabsorbanceofS.sonchifoliussamplesolution.Theaverage
absorbancevalueofchlorogenicacidinS.sonchifoliuswas1.105anditscontentwas0.052%.TheRSDvalueofchlorogenicacidinS.son-
chifoliusdeterminedbyspectrophotometrywas3.07%anditsaveragerecoverywas105.85%.[ Conclusion] Thecontentofchlorogenicacid
inS.sonchifoliuswas0.052%.
Keywords Smalanthussonchifolius;Chlorogenicacid;Spectrophotometry;Content
基金项目 红河学院科研项目(XJIY0706)。
作者简介 严和平(1976-),女 ,云南石屏人 , 在读硕士 ,讲师 , 从事天
然产物化学方面的研究。
收稿日期 2008-11-05
雪莲果(Smalanthussonchifolius),又称雪莲薯 、亚龙果 、
亚贡 ,果实似红薯 ,春天种植 ,秋季收获 ,植物学分类上属菊
科向日葵属双子叶草本植物 [ 1] 。雪莲果含有酚酸 、黄酮 、酯
类 、挥发油 、多糖 、20种人体必需的氨基酸等成分 [ 2] 。因其具
有保健作用而深受人们的喜爱。
雪莲果中含有绿原酸 ,绿原酸具有抗菌 、抗病毒 、止血 、
抗氧化 、消除自由基 、抑制突变和抗肿瘤等多种生物活性 [ 3] ,
在医药 、卫生等领域具有很大的应用价值。因此 ,该实验旨
在测定雪莲果中绿原酸的含量 ,为雪莲果的进一步开发利用
提供理论依据 。
1 材料与方法
1.1 试剂和材料 95%乙醇(分析纯)、绿原酸标准品(长沙
康隆生物制品有限公司)、雪莲果(市售)。
1.2 仪器 1901双光束紫外可见分光光度计(上海龙柯尼
仪器有限公司)、电子天平(梅特勒 -托利多仪器有限公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 样品液的制备。称取 10.0g洗净 、去皮 、切碎的雪莲
果样品 3份 ,向其加入 40%的乙醇 180 ml,于沸水浴上连续
回流提取 2.5 h。自然冷却后过滤 ,滤液浓缩后定容于 250
ml容量瓶 ,避光 ,待测。
1.3.2 雪莲果提取物的波谱定性检验。精确称取绿原酸标
准品 10.0 mg,用 95%乙醇溶解 ,定容于 25 ml的容量瓶中 ,
得浓度为 0.4 mg/ml的绿原酸贮备液。分别取 1.0 ml绿原
酸贮备液和雪莲果样品提取液 ,适当稀释 ,在紫外可见分光
光度计上 ,于 200 ~ 800nm波长范围进行扫描 。
1.3.3 绿原酸标准溶液的配制。从贮备液中分别移取 0.8、
1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 ml于 25 ml容量瓶 ,用 95%的乙
醇稀释至刻度线 ,得到一系列不同浓度的绿原酸标准溶液 。
2 结果与分析
2.1 雪莲果提取物的波谱定性检验结果 在 200 ~ 800 nm
波长范围内分别对绿原酸标准溶液及雪莲果样品提取液进
行波谱扫描 ,结果如图 1所示。
注:1为绿原酸标准品 , 2为雪莲果样品提取液。
Note:1.Standardsampleofchlorogenicacid;2.Extractionliquidof
snowlotuses.
图 1 紫外光谱曲线
Fig.1 CurvesofUVspectrum
从紫外光谱曲线可以看出 ,绿原酸标准品和雪莲果样品
液在 330 nm处有特征吸收峰 ,故选定 330nm为最大吸收波
长 ,测定雪莲果样品液的吸光度。
2.2 绿原酸标准曲线的绘制 用 95%的乙醇作参比溶液 ,
将所配制好的一系列不同浓度的绿原酸标准溶液 0.012 8、
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(2):659-660 责任编辑 孙红忠 责任校对 吴晓燕
0.016 0、0.019 2、0.022 4、0.025 6、0.028 8、0.032 0 mg/ml在
紫外可见分光光度计上 ,于 330 nm测定其吸光度 ,并绘制工
作曲线。标准曲线线性方程为:A=-0.125 75+59.185 27C,
r=0.999 7。
2.3 绿原酸含量测定结果 取 “1.3.1”样品液 ,于 330 nm
处测定其吸光度。 3次平均吸光度值为 1.105。带入标准曲
线中计算 ,浓度为 0.020 8 mg/ml。雪莲果中绿原酸的含量
为 0.052%。
2.4 精密度实验 按 “1.3.1”的方法制备样品液 , 3次测定
的吸光度值分别为 0.964 2、0.915 2、0.967 0, RSD为 3.07%。
2.5 回收率实验 在 3份样品液中 ,分别加入浓度为
0.016 0、0.019 2、 0.022 4mg/ml的绿原酸标准溶液 9 ml,摇
匀后于 330nm处测定其吸光度。回收率结果见表 1。
表 1 加标回收率实验结果
Table1 Testresultoftherecoveryrateofstandard
序号
Code
样品量∥mg
Sampleamount
加标准样品量∥mg
Standardsampleamount
理论值∥mg
Theoreticalvalue
测定值∥mg
Measuredvalue
回收率∥%
Recoveryrate
平均回收率∥%
Averagerecoveryrate
1 0.199 8 0.144 0 0.343 8 0.351 2 105.14 105.85
2 0.199 8 0.172 8 0.372 6 0.392 8 105.90
3 0.199 8 0.201 6 0.401 4 0.414 5 106.50
3 结论
采用分光光度法测定雪莲果中绿原酸的含量 , RSD值为
3.07%,平均回收率为 105.85%。该方法操作简单 ,精密度 、
回收率高。测得雪莲果中绿原酸的含量为 0.052%。
参考文献
[ 1] 李卓亚.雪莲果的化学成分及其药理作用的研究进展 [ J].食品与药
品, 2007(9):41-43.[ 2] 饶之坤,封良燕,张虽栓,等.雪莲果营养成分分析研究 [ J].云南化工 ,
2007, 34(1):52-53.
[ 3] 刘军海 ,裘爱泳.绿原酸的提取分离及含量测定 [ J] .中国油脂, 2005 ,
30(3):54-56.
[ 4] 刘青.高效液相色谱法测定银翘解毒片中绿原酸的含量 [ J] .时珍国医
国药, 2007, 18(4):873.
[ 5] ZHOUJY, LIAOH, LILP, etal.Determinationofemodinandchry-
sophanolcontentsincalusofCasiatoraL.leaf[J] .AgriculturalScience
&Technology, 2008, 9(2):60-62.
[ 6] 赵润琴 ,方东军,马旭.HPLC法测定银翘解毒颗粒中绿原酸的含量[ J].中医药学报 , 2004, 32(5):31-32.
(上接第 658页)
糖苷酶抑制剂微量筛选模型 ,并将总提取液和分离所得组分
分别进行筛选和生物活性评价 ,结果显示总提取液具有不同
程度的 α-葡萄糖苷酶抑制活性。这与其他文献结果相
符 [ 2-4] 。这说明马齿苋降血糖作用机制之一是抑制 α-葡萄
糖苷酶活性 ,可能具有阿卡波糖的作用特性和药效机理 。同
时 ,该研究首次发现 ,马齿苋多糖和生物碱分别具有不同程
度的 α-葡萄糖苷酶抑制活性 ,特别是生物碱类抑制作用 ,足
够剂量时几乎可完全抑制 α-葡萄糖苷酶的活性 ,而马齿苋总
黄酮和不饱和脂肪酸无抑制作用。这与该课题组正在观察
的动物药理试验结果相似 。由此可以推论 ,生物碱和多糖是
α-葡萄糖苷酶活性抑制的主要有效成分 。至于马齿苋生物
碱和多糖的具体化学成分与结构 ,以及有无其他降糖机制等
问题尚待深入研究。
综上所述 ,该研究提示马齿苋降糖作用与马齿苋中的生
物碱类和多糖类组分的 α-葡萄糖苷酶抑制活性有关 ,阐明了
马齿苋降血糖作用的机制 ,并为更好地开发利用马齿苋提供
了试验依据。
参考文献
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M].上海:上海科学技术出版社, 1992:
289.[ 2] WANGH.DiabeticmelitustreatedwithsinglePortulacaolerace[J] .Zhe-
jiangJournalofTraditionalChineseMedicine, 1990, 25(11):516-518.
[ 3] XIAOFY, LUFE, XULJ.EfectsofthediferentfractionsofPortulaca
oleraceonmorphologicalchangesofpancreasisletsintype2diabeticrats
[J].ChinJBasicMedTraditChinMed, 2006, 12(5):392-395.
[ 4] SHENL, LUFE.EfectsofPortulacaoleraceaoninsulinresistancein
type2diabeticrats[J].ChinHospPharmJ, 2005, 25(4):293-295.
[ 5] ZHOUJ, LIUJW, FUJW, etal.Isolationandasayingofpolysaccharides
inPortulacaoleracea[ J].ChinTraditHerbDrugs, 2001, 32(2):124-
125.[ 6] SHANGGUANXC, LIJS, CHENJP, etal.Polyunsaturatedfatyacid
separationfromtheseedkerneloilofPinusarmandiviaureaclathration
[J].ActaBotBorea1OccidentSin, 2004, 24(7):1303-1307.
[ 7] HUANGA, SHIHF, WEIH, etal.Acomparativestudyonbloodlipidreg-
ulatoryfunctionbetweenflavonoidsandalkaloidsfromlotusleaf[J].Cul-
inaryScienceJournalofYangzhouUniversity, 2006, 3:23-25.
[ 8] PIERREC, ROLANDR, TREMBLAYD,etal.P-Nitrophenol-α-glucopyra-
mosideassubstrateformeasurementofmaltaseactivityinhumansemen
[J].JClinChem, 1978, 24(2):208-211.[ 9] FLORISA, PETERL, REINIERP,etal.α-glucosidaseinhibitorsforpients
withtype2diabetes[J].DiabetesCare, 2005, 28(1):154-163.
[ 10] LEVETANC.Oralantidiabeticagentsintype2diabetes[J].CurMed
ResOpin, 2007, 23(4):945-952.
[ 11] HORIS, FUKASEH.Synthesisofα-glucosidaseinhibitoryactivityofN-
substitutedvaliolaminederivativesaspotentialoralanti-diabeticagents
[J].TheJournalofMedicalChemistry, 1986, 29:1038-1046.
[ 12] CHENXL, FANYX, ZHENGYG, etal.Propertiesandproductionof
valienamineanditsrelatedanalogues[J].ChemRev, 2003, 103:1955-
1977.[ 13] MARTINAE,MONTGOMERYPA.Acarbose:Anα-glucosidaseinhibi-
tor[J].AmJHealthSythPharm, 1996, 53(9):2277-2290.
[ 14] LINGYH, WANGXL, WANGY, etal.Inhibitionof34kindsofChinese
herbalmedicinesonα-glucosidaseactivity[ J].JournalofDalianPoly-
technicUniversity, 2004, 4:36-38.
660 安徽农业科学 2009年