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白花蛇舌草与水线草中齐墩果酸的含量测定



全 文 :白花蛇舌草与水线草中齐墩果酸的含量测定
辛爱学 金鑫
【摘要】 目的 白花蛇舌草及水线草定性鉴别及齐墩果酸的含量测定 。方法 CMC硅胶 G为固定
相 ,氯仿:甲醇(19:1)为展开剂 ,测定波长为 548 nm。结果 在 21.2 ~ 106μg范围内有良好线性吸收 ,样
1 r=0.9999 ,方法回收率为 98.7% , RSD=1.54% ;样 2 r=0.9999, 方法回收率为 98.8% , RSD=
1.69%。结论 白花蛇舌草与水线草薄层鉴别色谱斑点相一致 ,含量测定对比实验白花蛇舌草中齐墩果
酸含量高于水线草 。
【关键词】 紫外分光光度法;白花蛇舌草;水线草;齐墩果酸;含量测定
Determinationofoleanolinoldenlandiadiffusa(wild)roxbandoldenlandiacorymbosel XINGAi-xue,
JINGXin.DepartmentofPharmaceuticalandEquipment, HarbinPeople sArmedPoliceGoldenHospital, Hei-
longjiang150086 , China 
【Abstract】 Objective Thequalitativeidentificationofoldenlandiadifusa(Willd)Roxbandoldenlan-
diacorymbosel.Method ApplyingCMCphasecolumnandchloroform-methanol(19:1)asmobilephase
  作者单位:150086 哈尔滨武警黄金医院药械科
最深处与肿瘤所得肺支气管 ,血管束方向相延续 ,
周围胸膜无增厚 ,亦无粘连 ,在肺癌中的出现率为
57.7%,在良性病变中仅为 4.2%[ 14] 。有作者认为
直径≥2cm的肿块出现完整胸膜凹陷征时 ,恶性可
能;在直径≤1 cm的肿块出现胸膜凹陷征时 ,良性
可能 ,理由是肿瘤小时反应性纤维增生轻 ,不足以 X
线察觉出来 [ 9] 。胸膜凹陷征应结合肿块大小分析
对孤立结节定性 。
阳性支气管征:表现为有通向肿块的支气管影
或肿块本身含有支气管影。有研究表明 ,肺内孤立
结节与支气管的关系有 5种情况;支气管伸达肿瘤
边缘时被肿瘤切断;支气管伸入瘤体内 ,肿瘤沿支
气管壁浸润 ,支气管受肿瘤推挤;支气管壁增厚 ,管
腔光滑狭窄;支气管壁增厚 ,管腔不规则狭窄。所
以阳性支气管征多见于恶性结节 [ 4] 。本文资料统
计亦显示此征在良 、恶性结节中的差异。
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·7·中国现代药物应用 2009年 1月第 3卷第 2期 ChinJModDrugAppl, Jan2009, Vol.3, No.2DOI :10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2009.02.024
detectingat548nm.Result Thestandardcurvesofoleanolwaslinearintheconcentrationrangeof21.2 ~
106μg.Thefirstr=0.9999.Theaveragerecoverywas98.7%.RSD=1.54%.Thesecondr=0.9999.The
averagerecoverywas98.8%.RSD=1.69%.Conclusion Oldenlandiadiffuse(Wild)Roxbhasthin-layer
spotsbyTLCinagreementwitholdenlandiacorymbosel.Thecontentofoleanolinoldenlandiadifuse(Willd)
Roxbishigherthanthecontentofoleanolinildenlandiacorymosel.
【Keywords】 UV-spectrophotometer;Oldenlandiadifusa(Willd)roxb;OldenlandiaCorymboseloleanol
(oleanolicacid);Determination
  白花蛇舌草 [ 1] (oldenlandiadifusa(Wild)
roxb)为一种常用的药材 ,为茜草科植物白花蛇舌草
的带根全草 ,又名二叶葎 ,具有清热利湿 、解毒 、治
肺热喘咳 、扁桃体炎 、咽喉炎 、阑尾炎 、痢疾 、黄疸 、
盆腔炎 、附件炎 、痈肿疔疮 、毒蛇咬伤等功效 。另有
同属植物水线草 [ 2] (oldenlandiacorymbosel)又名伞
房花耳草 ,与白花蛇舌草同属茜草科植物 ,是药用
水线草的全草 。本品在福建 、广东 、广西等地作为
白花蛇舌草使用 ,其工效与白花蛇舌草基本相同 。
两中药的成分比较复杂 , 但它们都含有齐墩果
酸 [ 3] ,因此利用薄层层析及含量测定法对两种药物
进行对比测定实验。
1 仪器与药品
1.1 仪器 日本岛津 UV-210可见紫外分光光度
仪 ,超声器(SY2200 -T上海声源超声波仪器设备
有限公司),微型植物粉碎处理机(河北省黄骅市齐
家务科学仪器厂)。
1.2 试药和供试品  乙醚(分析纯)(哈尔滨市新
达化工厂),无水乙醇 ,冰乙酸 ,高氯酸(天津市东方
化工厂);香草醛(远东化工试剂厂);齐墩果酸对
照品(中国生物制品鉴定所);硅胶 G(青岛海洋化
工有限公司制造);羧甲基纤维素钠(上海化学试剂
采购供应站)。
2 方法
2.1 实验条件
2.1.1 样品来源 白花蛇舌草 ,佳木斯市药材有限
责任公司;水线草;市场抽样。
2.1.2 药材处理 取水线草和白花蛇舌草 ,挑选 ,
粉碎 ,经标准药筛 1号 、3号处理后 , 装入锥形瓶
备用。
2.1.3 试验条件 展开剂:CCL4 ~ CH3OH(19:1)
硅胶 G-CMC(0.3%)板;显色剂:碘蒸气 90℃烘箱
烤 5 min。
2.2 鉴别实验
2.2.1 供试品溶液制备 将两种草药粉碎 ,各称取
2 g分别加入乙醚 、甲醇 、氯仿 20 ml,超声处理 20
min,过滤 ,取滤液作供试品溶液 。
2.2.2 对照品溶液制备 称取齐墩果酸对照品
0.5mg,置 5ml量瓶中加甲醇溶液并稀释至刻度作
为对照品溶液。
2.2.3 点样 分别取上述供试品溶剂各 10 μl,与
对照品溶液点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿:甲
醇(19:1)为展开剂展开 ,晾开 ,放入碘蒸气中显色 。
结果见下图。
注:1、白花蛇舌草 2、水线草 3、齐墩果酸标准品
由图可见 ,以乙醚为溶剂提取齐墩果酸 ,分离
效果最佳 。因此本实验均采用以乙醚为溶剂提取 。
2.3 含量测定
2.3.1 水分测定 取干燥至恒重的称量瓶 ,取样 ,
干燥 5 h后称重 ,再干燥 1 h后称重 。测定结果如
下:白花蛇舌草水分含量为 6.97%,水线草水分含
量为 7.98%。
2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取在 105℃干
燥恒重的齐墩果酸对照品 0.00486g置 5 ml容量瓶
中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1 ml
中含齐墩果酸 0.972mg)。
2.3.3 标准曲线制备  精密吸取对照品溶液
(0.972 mg/ml)20、40、60、80、 100 μl置干燥试管
中 ,挥尽溶液 ,分别加入新配制 5%香草醛的冰醋酸
溶液 0.2ml,高氯酸 0.8 ml,于 70℃水浴中加热 15
分钟 ,流水冷却 ,加冰醋酸 5 ml,混匀。以试剂作为
空白 ,照分光光度法[ 4]试验 ,在 548 nm[ 5]波长处测
定吸收度 ,以浓度为横坐标 ,吸收度为纵坐标 ,绘制
标准曲线 。
  得回归方程
Y=0.0184+3.3962X, r=0.9999
2.3.4 精密度实验 精密吸取同一对照品溶液 ,重
复进样 5次 ,每次 10 μl以齐墩果酸含量计:RSD=
1.02% (9.67 , 9.54 , 9.49 , 9.46 , 9.42)。
2.3.5 重复性实验 同一批样品取 5份 ,分别按样
品测定方法操作 ,结果表明含量结果差异较小 ,重
复性较好 。
·8· 中国现代药物应用 2009年 1月第 3卷第 2期 ChinJModDrugAppl, Jan2009, Vol.3, No.2
2.3.6 稳定性实验 样品制成供试品液 ,每隔 1 h
测一次 , 5 h内值无明显变化 ,稳定性良好 。
2.3.7 样品测定 精密称取白花蛇舌草 、水线草粗
粉各 5g,加入乙醚 40 ml回流提取 2h,过滤蒸发定
容于 10 ml容量瓶中 ,精密吸取样品溶液与对照品
溶液各 20 μl点于同一硅胶 G薄层板上使成条状 ,
以氯仿:甲醇(19:1)为展开剂展开 ,碘蒸气熏 ,标出
斑点位置 ,加热使碘加速挥散后 ,刮取与对照品相
应的条纹 ,置离心管中 。同时刮取同一块板上与供
试品条纹等面积的硅胶 G作为空白 ,分别加入新配
制的 5%香草醛的冰乙酸溶液 0.2 ml,高氯酸 0.8
ml,于 70℃水浴加热 15 min流水冷却 ,加冰乙酸 5
ml混匀 ,以试剂作空白 ,在 548 nm波长处测定吸收
度 。计算结果见表 1。
2.3.8 加样回收率测定 精密吸取样品 1(白花蛇
舌草)液 40 μl,样品 2(水线草)40 μl,样 1、样 2分
别加齐墩果酸标准液 3μl,点于同一薄层板上 ,以氯
仿:甲醇(19:1)展开 ,按样品测定方法操作 。计算
结果见表 2。
表 1 样品中齐墩果酸的含量测定结果
项目 NO. 含量% 平均含量%
白花蛇舌草 1 0.102 0.103
2 0.104
3 0.105
4 0.101
水线草 1 0.082 0.075
2 0.074
3 0.070
4 0.076
  测定结果表明白花蛇舌草中齐墩果酸含量高
于水线草 。
表 2 样品中齐墩果酸加样回收率实验结果
项目 NO. 样品含量(μg) 加样量(μg) 测得量(μg) 回收率(%) 平均值(%) RSD(%)
1 38.253 2.916 41.105 97.8
样 1 2 37.893 2.916 40.821 100.4 98.775 1.54
3 37.564 2.916 38.477 99.7
4 31.399 2.916 34.235 97.2
1 30.627 2.916 33.449 96.8
样 2 2 27.566 2.916 30.505 100.8 98.800 1.69
3 25.845 2.916 28.738 99.2
4 23.513 2.916 26.382 98.4
  加样量:齐墩果酸标准品 3 μl的量为 0.00486
g)×3(μl)÷5(ml)=2.916(μg)
回收率:(测得量 -样品含量 )÷加样量
×100%
3 讨论
白花蛇舌草为常用中药 ,除具有清热 、利湿 、解
毒之功效 , 还有良好的抗肿瘤作用。水线草在福
建 、广东 、广西等地常代替白花蛇舌草入药 ,但在本
省不用 。本实验通过对白花蛇舌草和水线草的定
性鉴别及所含成分齐墩果酸进行含量测定 ,结果证
明 ,二者薄层鉴别色谱相同 ,含量测定结果白花蛇
舌草中齐墩果酸含量高于水线草 。通过实验结果
认为水线草可以作为白花蛇舌草入药 ,但名称应予
以区别 。虽然二者成本基本一致 ,但含量有所区
别 ,如果作为同一种药而入药势必会造成药量减
少 、药效降低 ,而影响疗效 ,因此二者不能混用 。
目前 ,白花蛇舌草还应用于对肿瘤的预防与治
疗中 ,并有一定的效果 ,有报道 [ 1]在体外对急性淋
巴细胞型 、粒细胞型 、单核细胞型白血病以及慢性
粒细胞型白血病的肿瘤细胞有较强的抑制作用 。
本实验仅从定性鉴别及部分成分含量进行了质量
标准的探讨 ,对于此品种的药理实验还有待于进一
步的研究探索 。
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