全 文 ：等优点 ,适用于不同菌类食品培养基中微量有害元
素砷 、汞的检测 ,是一种值得推广应用的好方法。
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国国家标准(GB15618-1995).土壤环境
质量标准[S] .北京:国家环境保护总局 、国家质量技术
监督局 ,1996.3.
[ 2] 祝建国 ,柴自渊 ,毛振才.还原气化—原子荧光光谱法快
速测定绿色食品基地土壤中的砷与汞[ J] .分析测试技
术与仪器 ,2002 ,8(2):103-106.
[ 3] 祝建国 ,毛振才 ,胡小耕.绿色食品蔬菜中砷与汞的原子
荧光法快速测定研究[ C] .甘肃省化学会第二十二届年
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[ 4] 杨惠芬主编.食品卫生理化检验标准手册[M ] .北京:
中国标准出版社 , 1997.89.
收稿日期:2010-04-28
基金项目:国家自然科学基金项目(30960503);贵州省科学技术基金项目(黔科合丁字[ 2008] 2143号)作者简介:何　平(1958-), 男 ,实验师 , 大专 ,从事实验室工作。
责任作者:董立莎。
贵州不同产地红土茯苓中薯蓣皂苷元的含量测定
何　平1 ,任广聪1 ,韦　欣2 ,董立莎1
(1.贵阳中医学院 ,贵阳　550002;2.贵阳医学院 ,贵阳　550004)
摘要:目的:测定贵州不同产地的红土茯苓中指标性成分薯蓣皂苷元。方法:采用 RP-HPLC 法测定红土茯
苓中薯蓣皂苷元的含量 , 色谱条件为依利特 Hypersil ODS2 色谱柱(5μm , 4.6×250 mm), 流动相甲醇—0.2%
磷酸(76∶24), 流速 1.0 ml/ min;检测波长 203 nm , 柱温 30℃, 薯蓣皂苷元理论塔板数不得低于 5000。结果:
在此色谱条件下 , 薯蓣皂苷元在 0.010525 ～ 2.105μg范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=
9)为 100.4%(RSD=1.85%), 贵州不同产地的红土茯苓中薯蓣皂苷元的含量在 0.0024%～ 0.0035%之间。
结论:RP-HPLC 法简单易行 , 专属性强 ,准确度高 , 重复性好 ,可作为红土茯苓药材内在质量控制方法。
关键词:红土茯苓;薯蓣皂苷元;反相高效液相色谱法
中图分类号:R284.1　文献标识码:B　文章编号:1005-5320(2010)04-0047-02
　　百合科菝葜属(Smilax L .)中红土茯苓(菝葜
S .china Linn)的根茎在贵州省为少数民族用药 ,蕴
藏量较大[ 1] ,又名金刚藤。由于具有抗炎 、祛风湿 、
利小便 、消肿毒等功效 ,长期以来被广泛用于治疗关
节疼痛 、淋病 、肿毒等症 ,其中主要指标性成分之一
是其甾体皂苷元及苷 ,如薯蓣皂苷元类。药理研究
表明 ,薯蓣皂苷元具有抗血小板聚集 、降血脂 、抗肿
瘤 、祛痰及溶血等作用[ 2] 。关于贵州不同产地红土
茯苓的研究迄今未见报道 ,本实验以 05版药典收载
菝葜中薯蓣皂苷元为指标性成分 ,对贵州不同产地
红土茯苓中薯蓣皂苷元的含量进行了分析研究 ,旨
在对我省民族药的进一步研究提供依据 。
1　仪器 、试药及药材
1.1　仪　器
岛津 LC20A 液 相色 谱 仪 , 紫 外 检 测 器
(SER1AL NO 20134405524),依利特Hypersil ODS2
色谱柱(5μm ,4.6×250 mm),大连依利特分析仪器
有限公司;SK8310LH 型恒温超声波提取器(500W ,
50/60kHz ,上海科导超声仪器有限公司);HH-S恒
温水浴锅(江苏国胜实验仪器厂);十万分之一分析
天平(METTLER TOLEDO , AB104-N),梅特勒上
海有限公司 。
1.2　试　药
薯蓣皂苷元对照品(批号 1539-200001)购于
中国药品生物制品鉴定所;乙腈 、甲醇为色谱纯 , 水
为乐百氏纯净水 ,其他试剂均为分析纯。
1.3　药　材
不同产地红土茯苓全株由作者在贵州各地采
集 ,并经董立莎教授鉴定 ,除去地上部分后 ,根茎洗
净 ,切片 ,阴干备用 。
2　含量测定
2.1　色谱条件与系统适应性试验
依利特 Hypersil ODS2色谱柱(5μm , 4.6×250
mm),流动相甲醇-0.2%磷酸(76∶24),流速 1 ml/
min ,检测波长 203 nm ,柱温 30℃,进样量 10μl ,采
集时间 35 min ,理论踏板数以薯蓣皂苷元峰面积计
不得低于 5000 ,在此条件下 ,供试品中薯蓣皂苷元
峰能与其它组分达到完全基线分离 ,分离度均大于
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1.5 ,且峰形较好 。
2.2　对照品溶液制备
精密称取薯蓣皂苷元对照品16.84 mg于 10 ml
容量瓶中 ,加甲醇溶解并定容 ,配制成 1.684 mg/ml
的对照品溶液。
2.3　供试品溶液的制备
分别称取不同产地的红土茯苓药材粗粉各8 g ,
置三角瓶中 ,加乙醇 150 ml ,超声处理 30 min , 滤
过 ,滤液置于平底烧瓶中 ,加盐酸 16 ml ,加热回流
水解 2 h ,放冷 ,用 40%氢氧化钠溶液调至中性 ,蒸
至无醇味 ,残渣加热水 40 ml使溶解 ,用石油醚(60
～ 90℃)振摇提取 4次 ,每次 40 ml ,合并提取液 ,回
收溶剂至干 ,残渣加甲醇溶解并转移至 10 ml容量
瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得供
试品溶液(生药浓度 0.8 g/ml)。
2.4　线性范围考察
分别精密移取薯蓣皂苷元对照品储备液(1.684
mg/ml)分别于 10 ml容量瓶中 ,各加甲醇定容至刻
度线 ,得到一系列浓度的对照品溶液 ,分别吸取对照
品溶液各 10μl ,注入液相色谱仪 ,记录色谱 ,以对照
品量 C(μg)对峰面积 A进行线性回归 ,得线性回归
方程:C=2×10-7A+0.0005 , r =0.9999 结果表
明:薯蓣皂苷元进样量在 0.010525 ～ 2.105μg 范围
内与峰面积有良好的线性关系 。
2.5　精密度试验
精密吸取按供试品溶液制备项下样品溶液 10
μl ,重复进样 6次 ,薯蓣皂苷元峰面积值的 RSD=
0.95%(n =6),结果表明 ,本法精密度良好 。
2.6　重复性试验
精密称取过 24目筛的粗粉各 6 份 ,按“2.3”项
下供试品溶液的制备法制备。分别吸取上述溶液各
10μl进样 ,结果 ,RSD=2.15%(n =6),故重复性良
好。
2.7　稳定性试验
取同一供试品溶液 10μl ,分别在 0 、1 、2 、3 、4 、5 、
6 、7 、8 h 进样 , 测得薯蓣皂苷元含量的 RSD =
1.27%(n =9),表明供试品溶液在 8 h 内稳定 。
2.8　加样回收率试验
精密称取稳定性试验样品 9 份于三角瓶中 ,加
95%乙醇 75 m l ,其中 1 ～ 3份加入相当于样品含量
80%对照品 , 4 ～ 6 份加入相当于样品含量 100%的
对照品 ,7 ～ 9份加入相当于样品含量 120%的对照
品 。按“2.3”项下供试品溶液制备法制备 ,记录色
谱 。结 果 , 薯 蓣 皂苷 元 平 均加 样 回 收率 为
100.35%, RSD=1.85%(n =9)。
2.9　样品含量测定
按“2.3”项下方法 ,在上述色谱条件下 ,分别精
密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl ,注入液相
色谱仪 ,测定峰面积 ,按外标一点法计算含量。结果
见表 1。
表 1　贵州不同产地红土茯苓中薯蓣皂苷元的含量(n=4)
产地 薯蓣皂苷元含量(%)
贵州遵义 0.0028
贵州贵定 0.0031
贵州贵阳 0.0030
贵州安龙 0.0024
贵州清镇 0.0026
贵州大方 0.0029
贵州册亨 0.0035
(注:上述品种已测定水分 ,均以干燥品计算 。)
3　小结与讨论
3.1　分别以回流及超声方法对薯蓣皂苷元含量是
否有影响进行了考察 ,结果 ,两种提取方法所得薯蓣
皂苷元含量相近 ,因超声提取操作简便 、快速 ,故选
择超声法提取 ,并进行了超声时间及次数的考察 ,以
超声 30 min ,超声 1次为最佳提取 。
3.2　按 05版药典中菝葜项下含量测定的色谱条件
及供试品制备方法进行了测定 ,发现红土茯苓中薯
蓣皂苷元的峰未能被分开 ,故对流动相进行了选择 ,
分别考察了甲醇—水 、甲醇 —0.05%磷酸水溶液 、甲
醇 —0.2%磷酸水溶液 3个溶剂系统及不同的比例。
结果表明 ,以甲醇—0.2%磷酸水溶液(76∶24)为流
动相 ,所得色谱峰峰形较好 ,分离效果最佳 。
3.3　贵州不同产地的红土茯苓中薯蓣皂苷元的含
量很低 ,仅为 0.0024%～ 0.0035%之间 ,均未达到
药典的最低要求(薯蓣皂苷元的含量不得低于
0.040%),其原因有待于进一步更深入的研究。
参考文献:
[1] 贵州省药监局编.贵州省中药材 、民族药材质量标准
[ S] .贵阳:贵州科技出版社 , 2003.33.182.
[2] 侯　娟 ,何文辉.薯蓣皂苷的药理作用 [ J] .河北医药 ,
2004 ,26(1):71.
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