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高效液相色谱法测定甜叶菊中的3个甜菊醇糖苷的含量



全 文 :第一作者 Tel:(021)33720130;E - mail:maple. zhu@ healthy - star. cn
高效液相色谱法测定甜叶菊中的 3 个甜菊醇糖苷的含量
朱吟吟,周凌
(健士星生物技术研发(上海)有限公司,上海 200335)
摘要 目的:建立高效液相色谱法分析甜叶菊中 3 个甜菊醇糖苷含量。方法:采用 Poroshell 120 EC - C18色谱柱(4. 6 mm × 150
mm,2. 7 μm),以乙腈 -磷酸水溶液(30∶ 70)为流动相进行分离,在紫外检测波长 210 nm下进行检测,外标法定量。结果:3 个
甜菊醇糖苷的检出限为 1. 0 ~ 1. 2 mg·kg -1,定量限为 2. 5 ~ 3. 0 mg·kg -1;在 50 ~ 1000 mg·L -1的浓度范围内线性良好,相
关系数为 0. 9999 ~ 1. 000;瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C和甜菊苷的加标回收率分别为 92. 8%、87. 2%、90. 3%,RSD分别为 3. 9%、
2. 7%、4. 8%;精密度的 RSD分别为 1. 2%、2. 1%、1. 3%;重复性的 RSD 分别为 3. 3%、6. 4%和 4. 7%。结论:本方法操作简
便,快速,分离度和准确度高,可用于甜叶菊原料的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;实心薄壳填料;甜叶菊;甜菊醇糖苷;瑞鲍迪苷;甜菊苷
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:0254 - 1793(2014)01 - 0184 - 06
HPLC determination of three steviol glycosides in Stevia rebaudiana Bertohi
ZHU Yin - yin,ZHOU Ling
(Healthy Star Co.,Ltd.,Shanghai 200335,China)
Abstract Objective:To develop a method for the determination of rebaudioside A,rebaudioside C and stevioside
in Stevia rebaudiana Bertohi by HPLC. Methods:The analytes were separated on a Poroshell 120 EC C18 column
(4. 6 mm ×150 mm,2. 7 μm),eluted by 30% acetonitrile and 70% phosphoric acid water solution,identified by
UV detector at 210 nm and quantified by external standard method. Results:The limits of detection(LOD,S /N =
3)and quantification (LOQ,S /N = 10)were 1. 0 - 1. 2 mg·kg -1 and 2. 5 - 3. 0 mg·kg -1 respectively. The cor-
relation coefficients of linear calibration curves were 0. 9999 - 1. 000 in the range from 50 - 1000 mg·L -1 . The
recoveries of rebaudioside A,rebaudioside C and stevioside were 92. 8%,87. 2% and 90. 3% and the RSDs were
3. 9%,2. 7% and 4. 8% . The precision RSDs were 1. 2%,2. 1%,1. 3% respectively,and the repeatability RSDs
were 3. 3%,6. 4% and 4. 7% respectively. Conclusion:The experiment results indicate that the method is simple
and rapid with good separation and accuracy,and can be used for the quality control of the raw material of Stevia re-
baudiana Bertohi.
Key words:HPLC;poroshell;Stevia rebaudiana Bertohi;stevio glycoside;rebaudioside;stevioside
糖尿病、肥胖症、高血脂、龃齿等疾病与过多的
蔗糖摄入量有密切关系,人们正努力寻求一种安全、
天然、健康、有效的“代糖”作为蔗糖的替代品。甜
菊糖苷(steviosides)是从甜叶菊中提取、分离的一系
列甜菊醇糖苷类的混合物,是目前在自然界中发现
继甘蔗糖、甜菜糖之外大量存在的第 3 种有开发价
值的天然低热值高倍甜味剂,被誉为“世界第三糖
源”。与蔗糖、葡萄糖、甜蜜素、阿斯巴甜等甜味剂
相比,甜叶菊糖苷具有热量小、甜度高、口感好、耐高
温、稳定性高等特点。1995 年 9 月 18 日,FDA 批准
甜叶菊糖苷可以作为“膳食补充剂”进行销售和消
费。2004 年 7 月 6 日世界联合卫生组织正式通过
允许甜叶菊糖苷在世界范围内通用的决议。我国在
GB 2760 - 2011《食品添加剂使用标准》中明确规
定,甜菊糖苷作为甜味剂允许在蜜饯凉果、熟制坚果
与籽类、糖果、糕点、调味品、饮料类、膨化食品生产
加工中按生产需要适量使用[1]。
甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertohi),为菊科
—481— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2014,34(1)
(Composital)斯台比亚属(Stevia),原产于巴拉圭的
多年生草本植物。甜菊糖苷是从甜叶菊的叶和茎中
提取出来的高甜度、低热量天然甜味剂,主要含 9 个
不同甜味成分:甜菊苷(stevioside)、瑞鲍迪苷(re-
baudiosideA、B、C、D、F)、杜克苷(dulcoside a)、甜茶
苷(rubusoside)和甜菊双糖苷(steviolbioside)。其中
甜菊苷和瑞鲍迪苷 A是甜菊糖苷中口感最好、无不
良余味的 2 个甜味成分。甜菊苷甜度是蔗糖的
200 ~ 300 倍,瑞鲍迪苷 A甜度是蔗糖的 300 ~ 450
倍[2]。2008 年 11 月美国食品药品管理局(FDA)
正式批准高纯度的瑞鲍迪苷 A 可以作为甜味剂应
用到美国的食品和饮料中,这项批准打破了原先
甜菊醇糖苷类化合物在美国只能作为膳食补充剂
来销售的局限,大大扩充了其在食品添加剂领域
的应用范围,也使高纯度的瑞鲍迪苷 A 产品成为
市场热点,同时带动了高含量瑞鲍迪苷 A 品种甜
叶菊的种植产业发展。目前甜叶菊行业内已经普
遍认同了把甜叶菊原料中的瑞鲍迪苷 A 和甜菊苷
的含量比例高低作为衡量甜叶菊品质的主要指标
之一[3]。
目前,未有权威机构发布关于甜叶菊中甜菊醇
糖苷类物质的检测方法及标准,而甜菊糖苷的产品
已经有较多的质量或者检测标准:国家质量技术监
督局批准的中华人民共和国国家标准《GB 8270 -
1999 食品添加剂甜菊糖甙》[4];吉林省卫生厅发布
的地方标准《DB S22 /009 - 2012 食品安全地方标准
食品中甜菊糖苷的测定高效液相色谱法》[5];粮农
组织 /世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会
(Joint FAO /WHO Expert Committee on FoodAddit-
ives)发布的《JECFA 2010 Steviol Glycosides》[6];美
国《食品化学法典》(Food Chemicals Codex)发布的
《FCC 2009 Rebaudioside A》[7]。然而,上述方法是
否适用于甜叶菊原料中甜菊糖苷物质的检测,尚不
明确。国内外已经发表的文献中,有不少针对于甜
叶菊原料的分析方法[8 - 13],但这些方法是否真正适
合于企业作为原料的质控检测方法,有待验证。
本文对国内外甜菊糖苷的标准以及文献中报道
的方法进行了考察和验证,综合各自的优缺点,并最
终开发出了甜叶菊原料中瑞鲍迪苷 A(rebaudioside
A)、瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C)、甜菊苷(stevio-
side)的检测方法,选用了实心薄壳填料技术生产的
反相 C18色谱柱,该色谱柱的填料技术为实心内核与
表面多孔层相结合,具有低反压、高柱效的特点,从
而实现了在常规液相色谱仪上得到超高效液相色谱
的分离效果。该方法检测时间仅需 8 min,分离度和
灵敏度高,比起已经报道的标准、文献方法有着很大
的优势,能够被企业用作原料质量控制的检测方法,
为甜叶菊优生选苗、科学种植、品质鉴定提供了科
学、高效的检测依据。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪 1200 系列、Poroshell 120 色谱
柱(美国 Agilent 公司);乙腈、甲醇(色谱纯,美国
Merck公司)。
对照品瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C、甜菊苷,HPLC
检测含量均为 99%,成都曼思特生物科技有限公司。
甜叶菊样品为安徽明光市富农甜叶菊专业合作
社提供。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:Poroshell 120 EC - C18
(4. 6 mm ×150 mm,2. 7 μm);柱温:40 ℃;流动相:
0. 1%磷酸水溶液 -乙腈(70∶ 30);流速:1. 2 mL·
min - 1;紫外检测器波长:210 nm;进样量:10 μL。
2. 2 标准工作溶液的配制 分别准确称取对照品
瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C和甜菊苷各 10 mg(精确至
0. 1 mg),置 10 mL量瓶中,用水溶解并定容,分别配
制成浓度分别为 1039、1018、1013 mg·L - 1的对照
品储备液。避光 4 ℃保存。分别准确移取上述对照
品储备液适量,用水定容,配制成系列浓度的标准工
作溶液,需现用现配。
2. 3 供试品溶液的制备 样品粉碎后,称取甜叶菊
样品 1. 0025 g 于 100 mL 锥形瓶中,加水 50 mL,在
60 ℃水浴中提取 3 h,趁热用纱布过滤到 50 mL 量
瓶中,冷却后用水定容并摇匀。经 0. 45 μm 的滤膜
过滤,即得。
2. 4 线性范围与检出限 在“2. 1”项的实验条件
下,对标准工作溶液进行检测,以浓度 X(mg·L - 1)
为横坐标,以对应峰面积 Y 为纵坐标,绘制标准工
作曲线。结果表明,在 50 ~ 1000 mg·L - 1浓度范围
内,瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C和甜菊苷的线性关系良
好,线性相关系数为 0. 9999 ~ 1. 000。检出限
(LOD,S /N = 3)为 1. 0 ~ 1. 2 mg· kg - 1、定量限
(LOQ,S /N = 10)为 2. 5 ~ 3. 0 mg·kg - 1,完全可以
满足甜叶菊的检测。瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C 和甜
菊苷的线性范围、相关系数、LOD及 LOQ见表 1。
2. 5 精密度试验 取供试品溶液,按“2. 1”项下色
谱条件连续进样 6 次,进行 HPLC分析,结果瑞鲍迪
苷 A、瑞鲍迪苷 C和甜菊苷峰面积的 RSD在1. 2% ~
2. 1%之间(表 1),说明该方法的精密度良好。
—581—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2014,34(1)
表 1 瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷 C和甜菊苷的线性方程、相关系数、检出下限、定量下限、精密度、重复性
Tab 1 Linear equations,correlation coefficients,LODs,LOQs,precision and repeatability of rebaudioside A,C and stevioside
化合物
(compound)
线性方程
(linear equation)
相关系数
(correlation coefficient)
检出下限
(LOD)
/mg·kg - 1
定量下限
(LOQ)
/mg·kg - 1
精密度
(precision)
RSD /%(n =6)
重复性
(repeatability)
RSD /%(n =6)
瑞鲍迪苷 A(rebaudioside A) Y =1. 089X +1. 776 0. 9999 1. 0 2. 5 1. 2 3. 3
瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C) Y =1. 118X +1. 214 0. 9999 1. 0 2. 5 2. 1 6. 4
甜菊苷(stevioside) Y =1. 306X -1. 537 1. 000 1. 2 3. 0 1. 3 4. 7
2. 6 重复性试验 取甜叶菊样品约1. 0 g共6份,精
密称定,按“2. 3”项下方法制备供试品溶液,按“2. 1”
项下色谱条件进行 HPLC分析,结果样品中瑞鲍迪苷
A、瑞鲍迪苷 C 和甜菊苷峰面积的 RSD 在 3. 3% ~
6. 4%之间(表 1),说明该方法的重复性良好。
2. 7 加样回收率试验 取甜叶菊样品约 1. 0 g共 6
份,精密称定,分别添加一定量的瑞鲍迪苷 A、瑞鲍
迪苷 C和甜菊苷对照品,按“2. 3”项下方法制备供
试溶液,按照“2. 1”项下色谱条件进样测定,瑞鲍迪
苷 A、瑞鲍迪苷 C 和甜菊苷的平均加样回收率在
87. 2% ~ 92. 8%之间,RSD 在 2. 7% ~ 4. 8%之间
(表 2)。
表 2 瑞鲍迪苷 A、C和甜菊苷的加样回收率(n =6)
Tab 2 Recoveries of rebaudioside A,C and stevioside
化合物
(compound)
加标量
(added)/mg
回收率
(recovery)/%
RSD
/%
瑞鲍迪苷 A(rebaudioside A) 20. 7 92. 8 3. 9
瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C) 20. 7 87. 2 2. 7
甜菊苷(stevioside) 20. 2 90. 3 4. 8
2. 8 样品测定 采用本文方法对安徽明光市富农
甜叶菊专业合作社提供的甜叶菊样品进行测定,取
6 个平行样品的平均值,结果瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷
C和甜菊苷的含量分别为 9. 27%、1. 08%和1. 23%。
对照品和样品的色谱图见图 1。
图 1 混合对照品(A)、甜叶菊样品(B)的高效液相色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of mixed standards(A)and Stevia rebaudiana Bertohi samples(B)
1.瑞鲍迪苷 A(rebaudioside A) 2.甜菊苷(stevioside) 3.瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C)
3 结果与讨论
3. 1 标准及文献方法的考察 瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪
苷 C、甜菊糖苷都属于甜菊醇糖苷类化合物,化学结
构非常相似,区别只在其苷元甜菊醇上所连接配糖
体的类型和数量,在分离时具有一定的难度,国内外
的标准及文献通常采用的色谱柱固定相有 2 种:反
相 C18色谱柱和氨基键合相色谱柱。本文将两类方
法的主要参数进行归纳总结,又经过实验验证,对分
离效果进行描述和评价,见表 3 和表 4。
3. 2 方法的验证和改进 首先验证了表 2 中使用
氨基键合相柱的分析方法,具体操作为:采用 Agi-
lent ZORBAX NH2(4. 6 mm ×150 mm,5 μm)色谱柱
和流动相乙腈 -水(80 ∶ 20),在 210 nm 下进行检
测。发现在进行甜菊糖苷提取物的分析时,对各个
化合物的分离度尚能满足要求。当用同样方法,分
析甜叶菊原料时,发现样品的基质效应严重,在瑞鲍
迪苷 C 和甜菊苷中出现很大的干扰峰,提取物和原
料的谱图见图 2。导致分离效果达不到要求,和文
献[8]报道的情况一致,却和文献[9 - 11]的结果相
悖,但由于文献[9 - 11]均没有甜叶菊原料样品清
晰的谱图可以参考,故暂不予采信。文献[8]为消
除样品的基质效应,将原等度洗脱调整为梯度洗脱,
去除了样品基质的干扰,但同时也造成分析时间的
增加,不仅降低检测效率,而且加大实验室溶剂的消
—681— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2014,34(1)
表 3 使用氨基键合相色谱柱方法的信息摘要
Tab 3 Summary of the method with NH2 column
参考文献序号
(reference No.)
流动相条件
(mobile phase)
分离效果
(separation result)
方法评价
(method comment)
4 乙腈 -水(80∶ 20)
[acetonitrile - water (80∶ 20)]
原文未分析甜叶菊原料,验证后发现基质干扰严重
(the raw material of Stevia rebaudiana Bertohi was not ana-
lyzed in this reference and serious interference of substrate was
found after validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Stevia rebaudiana Bertohi)
7 乙腈 - pH 4. 3 醋酸盐水溶液(80∶
20)
[acetonitrile - pH 4. 3 acetic acid
water solution(80∶ 20)]
原文未分析甜叶菊原料,验证后发现基质干扰严重
(the raw material of Stevia rebaudiana Bertohi was not ana-
lyzed in this reference and serious interference of substrate was
found after validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Steviare baudiana Bertohi)
8 乙腈 -水(90∶ 10→75∶ 25)
[acetonitrile - water(90 ∶ 10→75 ∶
25)]
分离效果好,但一次分析需要 60 min,所使用的氨基键合
相色谱柱寿命较短
(good separation effect but it took 60 min for one analysis and
the NH2 column used had short service life)
适合分析甜叶菊原料,但方法时间久,
试剂和色谱柱消耗大
(applicable to analyze Steviare baudiana
Bertohi but time -, regent - and
column - consuming)
10 乙腈 - pH 3. 0 磷酸盐水溶液(80∶
20)
[acetonitrile - pH 3. 0 phosphate
water solution(80∶ 20)]
甜叶菊原料样品谱图不清晰,验证后发现基质干扰严重
(HPLC chromatograms shown in the reference were unclear
and serious interference of substrate was found after validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Stevia rebaudiana Bertohi)
11 乙腈 -水(78∶ 22)
[acetonitrile - water(78∶ 22)]
原文中并无谱图参考,验证后发现基质干扰严重
(no HPLC chromatograms were shown in the reference and se-
rious interference of substrate was found after validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Stevia rebaudiana Bertohi)
12 乙腈 -水(80∶ 20)
[acetonitrile - water(80∶ 20)]
原文中无甜叶菊原料样品谱图,验证后发现基质干扰严重
(no HPLC chromatograms were shown in the reference and se-
rious interference of substrate was found after validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Stevia rebaudiana Bertohi)
13 [乙腈 - 10 mmol·L -1醋酸铵水溶
液(50 ∶ 50)]-[乙腈 - 10 mmol·
L -1醋酸铵水溶液(95∶ 5)](0∶ 100→
11∶ 89→33∶ 67→55∶ 45)
( [acetonitrile - 10 mmol·L -1 am-
monium acetate solution(50∶ 50)]-
[acetonitrile -10 mmol·L -1 ammo-
nium acetate solution(95∶ 5)](0∶
100→11∶ 89→33∶ 67→55∶ 45) )
能够分离、定量甜菊糖苷提取物中的 10 种甜菊醇类化合
物,未分析甜叶菊原料
(10 steviol glycosides in the Stevia extract were separated and
quantified but the raw material of Stevia rebaudiana Bertohi
was not analyzed in the reference)
利用质谱作为检测器,对实验室仪器要
求较高,不适于企业甜叶菊原料的质量
控制
(mass spectrometer was used as the de-
tector,which imposed high requirements
for the laboratory and was not applicable
to quality control of Stevia rebaudiana
Bertohi for the enterprise)
表 4 使用反相 C18色谱柱方法的信息摘要
Tab 4 Summary of the method with reversed - phase C18 column
参考文献序号
(reference No.)
流动相条件
(mobile phase)
分离效果
(separation result)
方法评价
(comment)
5 乙腈 - 0. 002 mol·L -1磷酸水溶
液(30∶ 70)
[acetonitrile - 0. 002 mol · L -1
phosphoric acid solution(30∶ 70)]
未分析甜叶菊原料,验证后发现分离度达不到要求
(the raw material of Stevia rebaudiana Bertohi was not ana-
lyzed and the resolution failed to meet the requirements after
validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze of the raw ma-
terial of Stevia rebaudiana Bertohi)
6 乙腈 - pH 2. 6 10 mmol·L -1磷酸
盐缓冲水溶液(32∶ 68)
[acetonitrile - pH 2. 6 10 mmol·
L -1 phosphate buffer(32∶ 68)]
未分析甜叶菊原料,验证后发现分离度达不到要求
(the raw material of Stevia rebaudiana Bertohi was not ana-
lyzed and the resolution failed to meet the requirements after
validation)
不适合于分析甜叶菊原料
(not applicable to analyze the raw materi-
al of Stevia rebaudiana Bertohi)
耗。而且,此梯度洗脱模式极为复杂,在不同实验室
间的重复性尚属未知。
其次验证了表 3 中使用的反相 C18色谱柱的
分析方法,具体操作为:采用 ZORBAX SB C18
(4. 6 mm ×150 mm,5 μm)色谱柱和流动相乙腈 -
磷酸水溶液(30∶ 70),在 210 nm下进行检测。发现
—781—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2014,34(1)
图 2 使用 NH2柱后甜菊糖苷提取物(A)、甜叶菊原料(B)的高效液相色谱图
Fig 2 HPLC chromatograms of stevioside extract(A)and Stevia rebaudiana Bertohi(B)by NH2 column
1.瑞鲍迪苷 A(rebaudioside A) 2.甜菊苷(stevioside) 3.瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C)
在分析甜菊醇糖苷类化合物时,C18色谱柱的柱效远
高于氨基柱,色谱峰形较氨基柱尖锐,而且在分析甜
叶菊原料样品时,样品中的杂质和甜菊醇糖苷类目
标化合物能够得到很好的分离,不会受到干扰。但
是,使用反相 C18色谱柱时,不论如何调整流动相比
例,瑞鲍迪苷 A 和甜菊糖苷始终不能完全分离,分
离度只能达到 1. 01。考虑到色谱柱的柱效和其长
度呈正比这个原理,又尝试了 ZORBAX Eclipse Plus
C18(4. 6 mm ×250 mm,5 μm),分离度提高到了 1. 31,
可还是不符合定量要求。随后串联了上述 2 根柱子,
分离度提高到 1. 54,可以满足定量要求。但是色谱
柱串联的步骤造成操作的烦琐,且柱温箱盖子无法
合上,不能实现精确控温,方法仍然有改进的空间。
使用不同色谱柱得到的谱图见图 3。
图 3 使用不同色谱柱得到的高效液相色谱图
Fig 3 HPLC chromatograms by different columns A. C18(4. 6 mm × 150 mm,5 μm) B. C18(4. 6 mm × 250 mm,5 μm) C. C18(4. 6 mm ×
150 mm,5 μm)tandem C18(4. 6 mm ×250 mm,5 μm) D. Poroshell C18(4. 6 mm ×150 mm,2. 7 μm)
1.瑞鲍迪苷 A(rebaudioside A) 2.甜菊苷(stevioside) 3.瑞鲍迪苷 C(rebaudioside C)
3. 3 方法的最终确定 上述试验可得出结论:相比
氨基键合相色谱柱,反相 C18色谱柱得到的甜叶菊原
料谱图无杂质干扰,柱效高,分析时间短,溶剂消耗
少,更加符合分析检测的要求,且反相 C18色谱柱的
使用寿命远长于氨基键合相色谱柱,使用成本较低。
只是该方法采用 2 根色谱柱串联的方式,比较繁复,
需要 1 根普通长度的,但柱效却能达到 2 根色谱柱
串联效果的高柱效反相 C18色谱柱来改进此方法。
Poroshell 120 EC C18(4. 6 mm ×150 mm,2. 7 μm)色
谱柱符合刚才提到的这些特性,此色谱柱采用实心
薄壳填料技术,能够达到通常被使用在超高效液相
色谱仪(UHPLC)上的亚 2 μm 粒径的色谱柱的柱
效,但柱压只是亚 2 μm粒径的色谱柱的一半,可以
使用在普通高效液相色谱仪上,符合企业质控实验
—881— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2014,34(1)
室一般配置标准。使用该色谱柱后,瑞鲍迪苷 A 和
甜菊苷的分离度达到了 2. 06,分析时间也缩短至 8
min,大大地提高了实验室的工作效率,且节省了对
有机溶剂的消耗,使用上述方法得到的色谱图见图
3。
4 结论
本文对现有国内外有关甜叶菊中甜菊醇糖苷类
化合物检测的标准和文献做了整理、归纳和验证,综
合各个方法的优缺点,并通过系列实验,最终建立了
利用实心薄壳填料技术的色谱柱和高效液相色谱仪
测定甜叶菊中的 3 个甜菊醇糖苷的方法。该法分离
度好、分析迅捷、有机溶剂消耗少,无需对提取的样
品进行复杂的样品前处理,在一般配置的高效液相
色谱仪上实现快速检测并得到精准的结果,比起现
有标准和文献中的方法,降低了基质干扰、提高了分
离效率,大大缩短了检测时间,有着明显的优势。本
法适用于企业对甜叶菊原料中甜菊醇糖苷类成分的
定量分析,从而指导农户选择更为科学的方式来种
植和育种,同时帮助甜菊糖苷生产企业选择最合适
的甜叶菊品种为原料进行后续的加工和提取,并在
生产过程中用此方法对生产工艺的各步骤进行质量
检验与控制。
参考文献
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(本文于 2013 年 2 月 18 日收到)
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