全 文 ：第 21 卷 第 1期
2 (X洲)年 3 月
热 带 作 物 学 报
C H IN E S E JO U RN A L O F T R O P IC A L C R 0 1名
V o l
.
Z I N o
.
M ar
.
2 0( X)
香草兰疫病疫霉菌种的鉴定
曾会才 张开 明 李 锐 贺春萍
(中国热带农业科学院 植物保护研究所 , 海南 据州 57 173 7)
摘要 从云南西双版纳的景洪 、 助腊两地的热带作物 园香草兰疫病果英 、 茎节 、 叶片 上分离到
or 个疫霉分离菌 ,根据抱子囊 、 厚垣抱子 、 藏卵器 、 雄器形态 、 菌落形态及主要生长温度 , 鉴定为
烟草疫霉 ( 寄生疫霉 ) 丹厂叩 ht ho ar inc
~
.(P p~
“ ice ) , 10 个分离菌株均属于 A , 交配型 。
关键词 香草兰 疫病 霉菌种 鉴定
中图法分类号 5 5 7 3 . 9 5 4 3 5 . 7 3
香草兰 ( Van il a 川an 如 il a) 疫病是香草兰的一种重要病害 。 在云南西双版纳 , 每年 7 、 8
月份高温多雨时期 , 露地栽培的香草兰疫病发生普遍 , 染病的叶基 、 茎节和果荚病斑水渍状
暗绿色 , 以后叶片 、 果英脱落 , 茎蔓枯死 , 造成严重减产 。 在海南 , 本院兴隆香料饮料研究所
曾于 199 7 年在腐烂的香草兰 茎尖上分离到疫霉 , 但疫病很轻 , 分离菌受到污染未能保存下
来 , 其它地方尚未发现香草兰疫病 。 世界上最早发现香草兰疫病是 1 926 年在留尼旺 , 19 28
年 M an bl an c A . 等报道香草兰疫病病原为 外了: op ht ho ar j at orP 丙砚 .(P p ~ 众ic 刁
, ,
。
K叩 p A .报
道留尼 旺 的香草兰疫病病 原很象 .P p以~ o ar 2[] 。 此后 , 在马达加斯加 13 和 印度尼西亚的爪哇 l4] 、 波多黎各 .15 6〕 、 留尼 旺 l7j 先后报道了香草兰疫病的发生为害情况 。 云南热作所杨雄飞 曾
将从香草兰上分离到的疫霉 M b一 80 2 鉴 定为冬生疫霉 ( .P hi be r阳公15 Cam e )[ 8] 。 本研究旨在弄清侵染我国香草兰的疫霉菌种类 , 为防治该病提供理论依据 。
1 材料与方法
1
.
1 病害样本来源
香草兰疫病果荚 、 茎 节 、 叶片于 19 95 年 8一 9 月采集于 云南西双版纳的景洪 、 勋腊两地
热带作物园 。
1
.
2 培养基
①分离用培养基 : 胡萝 卜 20 9 , 琼脂 20 9 , 自来水 1仪x〕 mL , P CN B 10 p g / m L , 氨节青霉素 10 p g / m L , 利福平 10 0 9 / m L , 制霉菌素 5 0 p g / m L 。 将胡萝 卜切块打浆 , 4 层纱布过滤 ,
加水至 1《XX) m L , 加入琼脂煮溶 , 分装于 25 0 m L 三角瓶中 , 每瓶 20 m L , 高压灭菌后 , 冷却至
50 ℃左右加入选择成分 , 倒入平皿备用 。 ②鉴 定用培养基 : v 一 8 汁 10 m L , B ac ot ag ar 25 9,
去离子水 1侧X〕 m L 。 V一 8 汁加去离子水经 4 层纱布过滤后再加去离子水至 1(X旧 m L , 平均分
装于 5 个 25 0 m L 三角瓶中 , 然后每瓶加 B ac ot ag ar 粉 , 高压灭菌后倒入平皿备用 。
1
.
3 分离方法
将采集的香草兰疫病样本于 自来水下用洗衣粉洗净表面 , 在超净工作台上剪取病样病
· 健交界处组织块 , 用 面 巾纸吸干多余水分 , 移接于选择培养基平板上 , 长出菌落后镜检菌丝
体 , 属疫霉 的挑取菌落 边缘菌丝块编号保存于 V 一 8 斜面上待鉴定 。
1
.
4 鉴定方法
1
.
4
.
1 致病性测定 采集健康香草兰茎 、 叶 、 果英 , 无菌水洗净表面 , 剪成 l x 2 c m 的小块置
于放有滤纸的直径 1 1 c m 的平皿内 , 加灭菌水湿透滤纸 , 分别倒入各分离菌菌悬液 , 对照只
加灭菌水 , 合上皿盖保湿 , 观察发病情况 。
收稿 日期 : 19 9 8 一 10 一 26

l 期 曾会才等 : 香草兰疫霉菌种的鉴定 58
表 l 香草兰疫病分离菌的营养体和繁殖结构大小的测定 (单位 : ,动
分离菌 主菌丝直径 抱子囊大小 (平均 ) 抱子掀御甸 厚垣抱子大小(。 ) 藏卵器大小 (巾 ) 雄器大小严均 )
v P。 _ : 4 . 25 一 5
.
25 4 2
.
9 3 x 3一 88 1 . 3 5 / 1 25 一 4 8 1 7 . 5 一 3 5 13 . 4 x 一0 . 54
V p 。 _ : 4 . 75 一 5 . 乃 4 2 . 5 x 3 2 . 7 1 . 扔 / 1 2 0 一 4 2 . 5 1 2 . 5一 3 0 13 . 2 x 一0 . 4
V p 。 一 , 4 . 7 5 一 5 . 2 5 4 2
.
5 x 3 2
.
8 7 1
.
50 / 1 18
.
7 5 一 3 2 . 5 2 0 一 3 0 13 . 2 x l o . 6
v P 。 _ ` 4 . 7 5 一 5 . 乃 4 3 . 4 x 3 2 . s 1 . 努 / 1 2 2 . 5 一 4 2 . 5 2 0 一 ” . 5 12 . 54 x l 0 . 5 2
v p 。 一 , 4 . 7 5 一 5 . 25 4 3
.
5 x 3 2
.
6 1
.
3 3 / 1 1 7
.
5 一 3 2 . 5 2 0 一 3 2 . 5 13 . s x l o . s
V’P 。 _ ` 4 . 7 5 一 5 . 25 4 2 . 7 5 x 2 8 . 7 3 1 . 4 9 /一 2 1 . 25 一 3 2 . 5 2 2 . 5 一 32 . 5 1 2 . 5 x l 0 . 5
v p 。 一 : 4 . 7 5 一 5 . 25 4 7
.
2 9 x 3 7
.
46 1
.
2 6 / 1 20
一 3 2 . 5 2 2 . 5 一 30 13
.
5 3
x l 0
v P。 _ : 4 . 7 5 一 5 . 25 4 7
.
3 x 3 7
.
4 1
.
26 / 一 2 2
.
5 一 3() 2 2
.
5 一 30 12
.
7 3 x l 0
. 的
v p 。 一 : 5 . 0 一 5 . 25 3 6 . 4 5 x 2 8 . 2 1 . 2 9 / 1 2 0
一 3 3 . 7 5 1 7 . 5 一 30 14
.
04
x l o
. 阶
v p 。 一 : 5 . 0 一 5 . 25 3 6
.
3 5 x 2 8
.
2 1
.
2 9 / 1 17
.
5 一 30 2 0 一 3 5 13
.
4 3 x z o
.
s z
20176
.2 3 温度对分离菌生长的影响
由表 2 可见 , 各分离菌的
最低生长温度 ( 10 ℃ ) 、 最适
生长温度 ( 26 一30 ℃ ) 和最高
生 长温度 ( 38 ℃ ) 基本一致 ,
2 6 ℃下在 V 一 8 平板上菌落日
生长 7一 14 nU
O
.2 4 种的鉴定
参照文献9[ 】和文献【10] 将从
西双版纳采集分离到的 or 个
香草兰疫病分离菌鉴定为烟草
疫霉月砂娜 hhet r n ic o `~ v
a n
B er d a d e H~
。 本菌的通用异
名为寄生疫霉 ( .P p~ 。 ic a)
,
交配型测定结果均属 A l 交配
型 (表 3 ) .
表 2 温度对香草兰疫病各分离菌生长的影晌 菌落 直径 (~ / 48 h)
分离菌 1 0 ℃ 14 ℃ 18 ℃ 2 2 ℃ 26 ℃ 30 ℃ 34 ℃ 3 8 ℃
V P .
_ 一 1 7 1 3 1 8 24 乃 1 9 0
20
. 1.
V P .
_ 2
V P .
_
3
l 4
l 3
67
V P .
_ 一 0
.
5 4
V P .
_ 5 0
.
5 4
l 2
l 4
V P .
_ ` 0
.
5 5
V P .
_ : 0
.
5
l 7
18
67,
夕山.二目j.
25364025438160920193796
V P .
_ 2 0
V P .
_ 1 0
.
5 3 12
V P .
_
2 0
.
5 3 12
表 3 香草兰疫病疫舞种的鉴定结果
分离菌 交配型 鉴定结果
V P .
_ -
分离地点
云南景洪
云南景洪
云南景洪
云南动腊
云南动腊
只 矛说沉“ 夕“此
V P“ _ 2
分离部位
果英
果英
果英
果英
果英
只 月扁: 。 t“ 口“犯
分离菌 分离地点
VP
。 二 云南动腊
VP 。 : 云南景洪
V P。 _: 云南动腊
VP
。 _ , 云南景洪
VP
。 二 云南动腊
分离部位 交配型 鉴定结果
.P 川云以“ 门。 巴
只 子谊以“ 价` 巴
戊拟lA凡l英节片果茎叶
只 几众璐“ 口“ 艺
A
V P伪 _ :
V几 -4 只 刀众。扛 “ . ”
只 耐` 璐 .口刀旧吧
只 心 c以 “ . .。巴
V P .
_ , 只 矛谊 。`如翔留 只 护公以切曰`巴
热 带 作 物 学 报 2 1卷
3 讨论
v P二 _ : 、 v P。 _ 2 2 个分离菌与其它 8 个分离菌有所差异 , 在无菌水培养条件下不易产生
抱子囊 , 而产生大量厚垣抱子 , 中间改换过滤的山溪水后产生抱子囊 , 两菌的生长速度也慢
于其它 8 个菌 , v P。 _ : 的最低生长温度较高 ,为 14 ℃ , 其它 9 个菌为 10 ℃ , 但在抱子囊 、 藏卵
器形态 、雄器着生方式上都一致 , 因而将这些差异看成是种内差异 。 笔者鉴定种与杨雄飞 l8]
鉴 定种不 同 , 其原因有待探讨 。
1 M a u b】aJ l e
7 7 ~ 82
Z K叩p .A
2 8 1~ 2 8 7
参 考 文 献
A
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6 C i比 5 H R , C hi ld明 N F . R e op rt of t he F曰 e arl 公哪n 比吧 n t S t如叨 i n uP ert o 凡co 194 8一 194 9 · 2 7 i n : Tb e R e v e w
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1“ u记 b y t h e G阅阴ao n w ael ht M yco l哈cal il 坦 t i t u te , 19 4 9 , 1 18 : 3 7 7
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