全 文 ：2000版《中国药典》采用甲醇为溶剂用以配制
和提取大黄酚 ,有文献报道采用甲醇-氯仿(1∶1)提
取大黄酚提出量多 ,而在实验过程中配制大黄酚对
照品溶液时 ,发现大黄酚在甲醇中溶解度并不大 ,而
在甲醇-氯仿(1∶1)中溶解度较好 ,故本文采纳之 。
决明子中蒽醌类成分以苷 、苷元的形式存在 ,在测定
结合大黄酚的含量时 ,用水浴回流水解较直火加热
水解所测定含量偏低 ,考虑到 2000年版《中国药典》
测定蒽醌苷及苷元类成分时采用水浴回流二相水解
法 ,故采用该方法 。
参考文献
[ 1] 　张启伟 ,阴　健 ,张　颖.决明子质控方法的研究[ J] .中国中药
杂志 , 1996 , 21(11):61-62.
[ 2] 　王甲林 ,宋育航. RP-HPLC法测定润肠口服液中槲皮素的含
量[ J] .基层中药杂志 , 2002 , 16(2):43-44.
收稿日期:2006-06-07
基金项目:江苏省科技厅资助项目(BK2001184)
作者简介:任爱农(1957 -),女 ,研究员 ,硕士生导师 ,研究方向:药物
制剂及分析 , T el:025 - 85639647
高效液相色谱法测定菊花脑不同部位木犀草素含量
任爱农 ,杨念云
(江苏省中医药研究院 ,江苏 南京 210028 ,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心 ,江苏 南京 210028)
　　摘要:目的　建立菊花脑中木犀草素的含量测定方法。方法　采用高效液相色谱测定法。色谱条件 All-
tima C18柱;以乙睛-0. 5%磷酸水溶液 (3∶7)为流动相;流速 1 m L /min ,柱温 30 ℃, 检测波长 350 nm , 。结果
　在 0. 096 8 mg /mL ～ 0. 484 mg /m L范围内线性关系良好。加样回收率为 101. 02%, RSD=0. 53%。结论
　所建立的方法可靠 、准确 、专属性强 , 可作为菊花脑中木犀草素的含量测定方法。
　　关键词:菊花脑;木犀草素;含量测定;HPLC
　　中图分类号:R284. 1　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1004-2199(2006)04-0050-02
Determination of Luteolin in Chrysanthemum nankingense by HPLC
REN Ai-nong , YANG Nian-yun
(Jiangsu Provincial Institute o f T radi tional Chinese Medicine , Jiang su Provincial
Engineering Research Center fo r Pharmaceut ical , Nanjing 210028 ,China )
　　Abstract:Objective　To establish determinat ion of luteo lin in Chrysanthemum nank ingense Hand-
Mezz. Methods　HPLC was determined on Allitima RP C18column ,using rinse fluid o f acetoni t rile-0. 5 %
H 3PO 4(3∶7) and the f low rate w as 1. 0 mL min - 1 , UV detection w aveleng th w as at 350 nm , column
temperature w as 30 ℃. Results　The quantitative evaluation o f luteolin had the linear range of 0. 096 8 mg
mL - 1 ～ 0. 484 0 mg mL - 1 , the average recovery w as 99. 33%and RSD was 1. 98%, respectively. Con-
clusion　The method w as reliable , accurate and specific. It can be used for determination of luteolin in
Chry santhemum nank ingense Hand-Mezz.
　　Key words:Chry santhemum nankingense Hand-Mezz;luteolin;determination;HPLC
　　菊花脑是菊科植物菊花脑 Chrysanthemum nankingense Hand-Mezz的干燥嫩茎叶 ,为江苏地
产资源 ,其味苦 、辛 ,性凉;功能:清热解毒 。长期以
来江苏民间主要作为传统特产蔬菜 ,尤其菊花脑叶
汤是夏日的防暑清凉的佳品 。该品种于 2002年在
江苏省科技厅自然基金立项 ,经研究发现该植物含
有大量黄酮类成分 ,其中代表性成分为木犀草素[ 1] 。
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DOI牶牨牥牣牨牫牱牪牳牤j牣牨牰牱牫牠牰牬牪牱牣牪牥牥牰牣牥牬牣牥牨牳
为寻找有效成分含量集中的植物部位 ,本文采用十
八烷基硅胶键合相色谱柱 ,建立了一种灵敏 ,专属可
靠的 HPLC 法测定本品中木犀草素的含量。
1　仪器与试药
美国Waters高效液相色谱仪 , 510泵 ,Waters
717 plus Autosampler 自动进样器 , Waters 2487紫
外检测器 ,Allt ima C18柱 。
试剂均为色谱纯和分析纯 ,重蒸馏水;木犀草素
对照品由本院植化室提供 。
实验药材采自南京市六合区 ,经南京中医药大
学刘训红教授鉴定。
2　方法与结果
2. 1　高效液相色谱条件　乙睛-0. 5%磷酸水溶液
(3∶7),流速 1 mL /min ,柱温:30 ℃,检测波长 350
nm ,此条件下供试品溶液中木犀草素与其它组分均
能达到基线分离;用流动相及空白溶剂进样;结果表
明系统无污染 ,对检测结果无干扰;表明方法专属性
良好 ,见图 1。木犀草素对照品经高效液相色谱检
测 ,对照品峰面积为 25 7997 821 ,杂质峰面积为
325 665 ,归一化法计算 ,含量为 98. 75%。
A 木犀草素对照品　A reference of lu teolin　B样品　s amp le of
luteolin　C流动相及溶剂空白　C the mobile phase and b lan k
图 1　木犀草素高效液相色谱图
Fig. 1　HPLC chromatograms of luteol in
2. 2　对照品溶液的制备　称取在 80 ℃减压干燥
至恒重的对照品约 2. 5 mg ,精密称定 ,置5 mL 量瓶
中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,作为对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备　取本品经80 ℃减压干燥
至恒重花 、叶 、根粉末各 2 g 左右 ,平行两份 ,精密称
定 ,置 50 mL 三角烧瓶中 ,加甲醇 50 mL , 超声 30
min ,滤过 ,收集滤液 40 mL ,水浴蒸干 ,加甲醇定容
至 5 ～ 10 mL ,精滤 ,即得 。
2. 4　线性关系考查　精密吸取下列浓度为 0. 096 8
mg /mL 、0. 193 6 mg /mL 、 0. 290 4 mg /mL 、
0. 387 2 mg /mL 、 0. 484 0 mg /mL 对照品溶液各 20
μL注入液相色谱仪中 , 按上述色谱条件测定峰面
积 ,以峰面积为纵座标 ,对照品溶液浓度为横座标绘
制标准曲线 , 其回归方程为 Y =73 616 883X +
2 151 576。相关系数 r=0. 999 6 ,结果表明 ,木犀
草素在 0. 096 8mg /mL ～ 0. 484 mg /mL 范围内线
性关系良好 。
2. 5　精密度实验　精密吸取上述 0. 290 4 mg /mL
对照品溶液 20 μL ,重复进样 5次 ,其平均峰面积值
为 25 566 206. 6 。
2. 6　稳定性实验　精密吸取花的供试品溶液 20
μL ,分别在 1 、2 、4 、8 、12 、24 h进行测定 ,其木犀草素
平均峰面积为 20 043 578. 33 , RSD=0. 96%。
2. 7　重复性实验　精密称取花的样品粉末 6份 ,每
份样品 2 g 左右 ,按供试品溶液制备方法制备供试
品溶液 ,进行含量测定 , 其木犀草素的平均含量为
0. 69%,RSD =2. 7%。
2. 8　回收率实验　精密称取花的样品粉末 6份 ,每
份 1 g 左右 ,分别精密加入 2号标准液 3. 4 mL , 3. 5
mL 各 3份 ,按供试品溶液制备方法制备 ,并测定含
量 。结果平均回收率为 99. 33%, RSD=1. 98%。
2. 9　样品含量测定　分别精密吸取对照品溶液和
供试品溶液各 20 μL 注入液相色谱仪中 ,按上述色
谱条件测定峰面积 ,以外标法计算 ,结果见表 1。
表 1　样品中木犀草素的含量
Tab. 1　Content of luteolin in samples
植物部位 木犀草素含量 /%
花 0. 68
叶 0. 023
根 0. 043
3　讨论
3. 1　样品含量测定结果可见 ,菊花脑不同的植物部
位其木犀草素的含量从高到低的顺序为花 >叶>
根 。
3. 2　样品处理过程中 ,其叶子中含叶绿素 ,曾经采
用先经石油醚索氏提取至无色 ,再以 95%乙醇回
流 ,但提取液仍为绿色 , 所以改用甲醇直接超声提
取 ,液相色谱图显示木犀草素与其它组分均能达到
基线分离 ,说明该方法简单可行 。
参考文献
[ 1] 　杨念云.菊花脑嫩茎叶化学成分的研究[ J]. 中国药科大学学
报 , 2005 , 36(5):402-404
—51—现代中药研究与实践 2006 年第 20 卷第 4 期Resea rch and Prac tice o f Chinese Medicine s