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裂褶菌营养菌丝蛋白质成分的分析



全 文 :裂褶菌营养菌丝蛋白质成分的分析
邓百万1 , 陈文强1 , 李志洲2
(1.陕西理工学院生物系 2.陕西理工学院化学系 陕西汉中 723001)
摘要:对裂褶菌菌丝中蛋白质的氨基酸组成及含量进行了测定。结果表明 , 裂褶菌中所含粗蛋白的质量分数为 28.76%,
所测定的 17 种氨基酸总质量分数为 120.13g·kg-1 。其中 7 种必需氨基酸的质量分数为 45.36 g·kg -1 , 占氨基酸总量的 37.
76%;10 种非必需氨基酸的质量分数为 79.50 g·kg-1 ,占氨基酸总量的 62.24%。
关键词:裂褶菌;蛋白质;分析
中图分类号:Q949.32 文献标识码:A 文章编号:1006-8376(2003)04-0001-02
  裂褶菌(Schizophyllum commune Fr.)属真菌门 ,
担子菌纲 ,伞菌目 ,裂褶菌科 ,侧耳属。一般幼嫩时
可食用 ,可人工栽培 。该菌含纤维素酶 ,并能产生苹
果酸 ,菌丝深层发酵时产生大量有机酸 ,广泛用于食
品 ,医药卫生及生物化学等方面。民间药用治疗妇
科病 ,有滋补强身的作用 。另外还含有裂褶菌多糖 ,
该多糖对小白鼠肉瘤 180和艾氏癌的抑制率达 70%
以上[ 1] 。为了明确裂褶菌营养菌丝的成分 ,并为以
后的研究提供参考 ,我们对裂褶菌营养菌丝中蛋白
质的氨基酸组成及含量进行了测定 ,报道如下:
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种
裂褶菌菌种由陕西省资源生物重点实验室食用
菌菌种保藏中心提供 。
1.1.2培养基
1.1.2.1 斜面培养基 CPDA培养基马铃薯 150.0g
·L-1 ,葡萄糖 20.0g·L-1 ,KH2PO4 5.0g·L-1 , MgSO4 .
7H2O 1.5g·L-1 ,VB15.0mg·L-1 , 琼脂15.0g·L-1 。
1.1.2.2 液体培养基 马铃薯 100.0g·L-1 ,麸皮
100.0g·L-1 ,葡萄糖 20.0g·L-1 ,KH2PO4 .7H2O 3.0g·
L
-1 ,VB15.0mg·L-1 。
1.2 方法
1.2.1 培养基配制
1.2.1.1 母种培养基制备 配制CPDA培养基 ,分
收稿日期:2003-07-04
作者简介:邓百万 ,男 ,陕西理工学院生物系副教授, 主要从事微生物
资源的保护 、开发与利用
基金项目:陕西省教育厅专项科研基金资助项目(99JK109)
装于 1.8cm×18cm试管中 ,每管装入 10mL 培养基 ,
常规方法灭菌 ,放置斜面 ,待用 。
1.2.1.2 液体培养基制备 配制液体培养基 ,分装
于150mL三角瓶中 ,每瓶装入 50mL 液体培养基 ,常
规方法灭菌 ,待用。
1.2.2 培养方法
1.2.2.1 菌种活化培养 将裂褶菌斜面母种接入
CPDA培养基中 ,于 25℃下活化培养 7d ,待用。
1.2.2.2 液体菌种培养 在液体培养基中 ,接入活
化的斜面菌种 0.5cm2 ,置于 25±1℃的恒温培养箱
中静置培养 ,培养后的营养菌丝体离心过滤 ,并用蒸
馏水冲洗 3次 , 50℃下烘干至恒重 ,研制粉末 ,用电
子天平测重 ,待用。
1.2.3 测定方法
1.2.3.1 粗蛋白含量测定 微量凯氏定氮法[ 2]
1.2.3.2 氨基酸含量测定 FDBN 柱前衍生高效液
相色谱法(Hp-lc1100型)。层析柱:Zorbaxc18;流动
相:磷酸二氢钾和乙晴水溶液(水:乙晴=45:55)。
2 结果与分析
2.1 粗蛋白含量的测定
按文献[ 2]所述 ,采用微量凯氏定氮法分析裂褶
菌菌丝粗蛋白含量。结果表明 ,裂褶菌营养菌丝粗
蛋白的质量分数为 28.76%, 居于 20%~ 30%之间 ,
这在一般真菌粗蛋白含量中是比较高的 。
2.2 氨基酸种类及含量的测定
将裂褶菌液体培养获得的营养菌丝用酸水解 ,
以FDBN柱前衍生高效液相色谱法分别测得其氨基
酸的组成及含量 ,结果见表 1。
3 结论
·1·氨基酸和生物资源Amino Acids &Biotic Resources 2003 , 25(4)1~ 2
DOI :10.14188/j.a jsh.2003.04.001
表 1 裂褶菌菌丝中氨基酸种类及质量分数(g·kg-1)
必需氨基酸 质量分数 非必需氨基酸 质量分数
苏氨酸 6.177 谷氨酸 12.265
缬氨酸 9.348 丝氨酸 3.620
亮氨酸 8.439 组氨酸 7.569
异亮氨酸 7.058 精氨酸 24.146
苯丙氨酸 7.757 甘氨酸 0.265
甲硫氨酸 1.146 脯氨酸 0.281
赖氨酸 5.436 丙氨酸 12.838
胱氨酸 1.345
酪氨酸 1.872
天冬氨酸 10.571P
必需氨基酸总量 45.361 非必需氨基酸总量 74.772
氨基酸总量 120.1328
本文研究结果显示 ,液体培养裂褶菌菌丝中粗蛋白
的质量分数为 28.76%。按干重计营养菌丝含 17种
氨基酸 ,氨基酸总量为 120.13 g·kg-1 ,必需氨基酸占
营养菌丝中总氨基酸的质量分数为 37.76%,以缬氨
酸含量最高 ,亮氨酸次之 ,含量最低者是甲硫氨酸。
非必需氨基酸占营养菌丝中总氨基酸质量分数的
62.24%,以精氨酸含量最高 ,丙氨酸次之 ,含量最低
者是甘氨酸。
  表 1结果表明 ,因方法所限未检出色氨酸外 ,静
置培养的裂褶菌丝经测定含 17种氨基酸 , 总量为
120.13g·kg-1 。营养菌丝中含 7种必需氨基酸和 10
种非必需氨基酸 ,其中 7 种必需氨基酸含量为 45.
361 g·kg-1 ,占总氨基酸的质量分数为 37.76%;10
种非必需氨基酸含量为 74.772g·kg-1 ,占总氨基酸
的质量分数为 62.24%。
参考文献
[ 1]  黄来年.食用菌百科.中国农业出版社[ M] , 1993 ,(5):
119。
[ 2]  国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[ M] .
北京:化学工业出版社 , 2000.附录53~ 54。
Analysis of Protein Components of Schizophyllum commune
DENG Bai-wan1 ,  CHEN Wen-qiang1 ,  LI Zhi-zhou2
(1.Department of Biology ,
2.Department of Chemistry , Shaanxi University of Technology , Hanzhong 723001 , China)
  Abstract The component analyses were carried out for amino acids and crude protein of Schizophyllum commune.
The result showed that among 17 amino acids ,7 essential amino acids were 37.76%.
  Key words Schizophyllum commune;protein;analysis
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·2· 邓百万,等.裂褶菌营养菌丝蛋白质成分的分析