全 文 ：人参研究 2加 8年第 3期
刺 五 加 叶 中 化 学 成 分 分 析
程昆木 王 斌 鲍建才 刘 刚 郑友兰
(吉林农业大学中药材学院 · 吉林 长春 · 31 0 1 18)
丛登立
(吉林大学药学院 · 吉林 长春 · 31 0 21 )
那 微
(黑龙江省药品检验所 · 黑龙江 哈尔滨 · 巧 0 01 )
摘 要 : 目的 :分析刺五加叶中氨基酸、 无机元素 、总搪 、黄酮的含量 ,为开发刺五加叶资源提供科学依据
及物质基础 。 方法 :采用 日立 835 一 50 型氨基酸自动分析仪进行测定氨基酸含量 ,美国产 M akr n 型 8 0
系列等离子直读光谱仪分析微量元素 , 3 , 5 一 二硝基水杨酸法测定总糖含量 ,比色法测定黄酮含量 。 结
果 :刺五加叶中含有 16 种氨基酸 ,其中 7 种为人体必需 ,谷氨酸和天门冬氨酸含量较高。 并含有十多种
微量元素 ,其中 aC 含量最多 。 测得刺五加叶中总糖含量为 1 . 51 % ,总黄酮含量为 0 . 75 % 。 结论刺五
加叶中含有多种氨基酸 、无机元素及其它有效成分 ,具有较大开发应用价值。
关健词 :刺五加叶 ;氨基酸 ;微量元素 ;总糖 ;黄酮
A n a ly s i s O n T h e C h e而 c a l C o m P o s i it o n . o f T h e L e a v e
O f A e a n ht o P a n a x s e it c o s u s ( uR P
r
.
EMt
a x im
.
) H
a r m s
C h en g K un
一 m u W an gb in B a 0 J ia n 一 ca i L i u G a n g Z h e n gy o u 一 la n
( C o L L e ge of C h in e se M戒e ian L M a et ir a L , J止 in A g ir e uL tU ar L U ul ve sr iyt ,
C h an gc h un
,
J止 in , 13 0 1 18 , C创匕a )
C o n gd e n g 一 11
( S c h o L o f Pha r m a c y
,
J IL in U in v e sr i yt
,
e h a n g c h u n
,
J inL i
n , 13 004 1
,
C hi n a )
N S W
e i
( H e i oL
n gj ian g Isn it t u et F o r D nr g C o n tr o l
,
H a e br in
,
eH i oL
n gj ia n g 150 0 1 )
A b s t ar ct
: o bj ce t OT an al y
s e
het
e o n t e n t fO a n云on ac i ds , t r a c e e l em e nt , tot al s u g ar , l vao
n e of het l
e
aer Of A
e
an ht o Pan ax
s e t ie os u s ( R
u p似
M耐m . ) Hamr s . OT pvor ide s e i e n t访 e fo un diat o n a n d s ub s tan t ial fo un ds t i on in o 记 e r t o d ve e lOP ht e le afe Of A e an tho paxn
s e it e ,
s u s
( R叩 er t M ax im . ) Hasn
.
M e ht 以如 hT e e o n t e n t Of a int n o ac i d w as an aly 翻 by a out m at ie 脚 ion ac id an al y z e r . 仆 e actr e e L
e m e n t w as an al y ez d by M掀 H SX() se ir al lP as m a r ce t i一 er a d s伴 eotr 脚 ph . 马 e tot al s吧 a 15 an aly dez by D N S . 仆 e l vao n e aws
an al ydez b
y e ol ior m ietr
e m e t hde
.
R咫 ult hT e le va e of cA an hOt Pan ax s e it e o s us ( Ru p沈 t M ax im
.
) Hamsr
e o n t ia sn 16 ik dn
s of am i
-
on ac i ds ; an d 7 ik
n
ds of het
m
aer ht
e e s s e n it al of poe len
.
G lut a n li c ac i d an d as piart
e ac i d aer het ih hg es
t Of th em
.
h e o nt a i sn
m o er ht an t
e n dI n d s of
actr
e e l e m e n t an d C a 1
5 ht e
oms
t of ht e m
.
hT
e e ot ent Of
t o回 s u g ar 15 1 . 5 1% , an d t h e e o t e n t of fl a v on e is
0
.
775%
.
C o n e l u s io n hT e l e va e of cA an hot
p an ax
s e it e o s us ( uR p二 t M画m . ) Hans con t ia
n s 比旧刀 y k i n d s Of anz i
n o
ac i d
s
actr
e
e le m e nt an d hOt
e r e fe e it
v e e o ns it ut
e n t , 朋 d i t has 脾 at v al u e ot be d ve elo p de .
K盯 w o r d : A e an hot pan ax s e it e o s u s ( uR p ert M耐 m . ) Hanrt s , A m i n o ac id s , T r a c e e le m e n t , OtT al s u asr , F la v on e
程昆木等 :刺五加叶中化学成分分析
刺五加系五加科植物刺五加 (A cna th叩 na ax es n it -
co us 。 (Ru rP et M如 m ) HnaIY s ) 的干燥根及根茎或
茎川 ,商品名为五加参 ,叶也可作药用2[] ,树皮作为五
加皮人药3[] 。 主要分布在我国黑龙江 、 吉林 、 辽宁、河
北等地川 。 是我国东北地区典型的药用植物 , 味辛、
微苦、性温 、 无毒5[] 。 《本草纲目》称刺五加为“ 本经
上品 ” , 能 “ 补中益气 , 坚筋骨强意志 , 久服轻身耐
老 ” 。 作为我国传统中药 ,刺五加临床应用广泛 ,具有
益气健脾 、补肾安神 、益精壮骨之功效 [` ] 。 近年来 , 随
着对刺五加活性成分及药理作用的不断深人研究 , 国
内外学者经过大量的研究和实验 ,证实刺五加含有多
种活性成分 ,如昔类 、 黄酮类等成分川 。 对刺五加叶
的研究报道相对较少 , 本文对刺五加叶中微量元素、
氨基酸 、总糖及黄酮进行了综合分析并进行了含量测
定 。
1 实验材料 、 仪器及试剂
刺五加叶采集于吉林省长白山地区 ,经吉林农业
大学中药材学院张崇禧教授鉴定。 日立 835 一 50 型
氨基酸自动分析仪 , 美国 J~ U 一 sA h 公司产 M akr n
型 80 系列等离子直读光谱仪配用 P DSP A 计算机 ,
8Z 0( X)
一 型偏振塞曼原子吸收分光光度计 , 电子计数
天平 (常熟市百灵天平仪器有限公司 ) , 索氏提取器 ,
72 2 分光光度计 (上海精密科学仪器有限公司一子卜析
仪器总厂 ) ,所有溶剂均为分析纯 。
2 方法
2
.
1 氨基酸的含量测定
2
.
1
.
1 样品处理将样品干燥粉碎 ,过 60 目筛 , 恒重 ;
在分析天平上称取样品 50 m g ,分别放置于安瓶底部 ,
用注射器注人 6 N HCUO耐 , 然后接通真空泵 ,抽至真
空 , 迅速在酒精喷灯火焰上封口 ,置 l or ℃烘箱中水解
24 小时。 取出放冷至室温 ,打开管口 ,将水解液过滤
至 50 血 容量瓶中 ,用 0 . 01 N H a 冲洗水解管及滤纸 ,
并定容至刻度 , 取此稀释的水解液 2血 置小蒸发皿
中 ,在水浴上蒸干 , 残渣用 2耐 蒸馏水溶解并蒸干 。
如此反复操作 2 一 3 次 ,使氯化氢被挥尽 。 然后准确
加人 0 . 02 N HCU耐 ,使每毫升含相当 0 . 1 59 左右粗蛋
白(样品中粗蛋白按 12 一 巧% 计算 ) , 上机测定 。
2
.
1
.
2 将上述已处理好的试样 ,用 日立 835 一 50 型
氨基酸自动分析仪进行测定 。 仪器分析条件如表 1 。
表 1 分析条件
T a b l e l C on 山iot sn of a耐y由
分析条件 分析因素
层析柱内径 ( m m )
柱高 ( nI )
离子交换树脂
分析时间 ( m in )
缓冲液流速 ( m F m in)
苟三酮流速 (功夕而n)
柱压 ( k岁卿 )
苟三酮泵压 ( k盯()D )
缓冲液改变次数
柱温 (℃ )
进样量 (样品 )
进样量 (标准品 )
氮气压力 ( k岁卿 )
2
.
6
105
26 19 型 ( 日立株式会社出品 )
70
0
.
225
0
.
30
80 ~ 130
巧 ~ 35
50 u l
3 n m o l/ 50吐
0
.
2 8
人参研究 RE N SH ENY AN l lU Z (X) 8年第 3期
2
.
2 无机元素分析
2
.
2
.
1 原料的处理和样品溶液的制备
2
.
2
.
1
.
1 玻璃器皿预先在热硝酸中浸渍 ,用去离子
水充分洗涤 。
2
.
2
.
1
.
2 选取刺五加叶样品刷净泥土 ,再用去离子水
淋洗干净置烘箱内 105 ℃干燥 4 h ,精密称取其恒重的
干燥细粉 0 . 5 9 于 50 耐锥形瓶中 ,加人 or iln 浓硝酸 ,
浸泡 4 8h ,于 20 一 30 ℃电热板上加热 0 . s h 后取下 ,
冷却 , 加 10 耐硝酸一高氯酸 ( 5 : l) 混合液 , 继续煮至
有浓白烟产生 , 即消煮完毕 ,加热蒸去过量硝酸 ,取下
冷却后用 0 . IN 硝酸洗至 50 血 容量瓶中备用 。
2
.
2
.
2
2
.
2
.
3
平行调制全过程的空白试验溶液 。
分析条件
美国产 Makr n 型 80 系列等离子直读光谱仪分析条
件 :功率 : 1 千瓦 。 氢气 :冷却气 , 17 U m in , 工作气 1口
而 n ,载气 0 . 5口 m in ,积分时间 10 秒 ,高盐雾化器蠕动
进样 ,进样率 3 In F m in 。
z8 0( X)
一 型偏振塞曼原子吸收分光光度计分析条
件 : 电流 or 毗 , 波长 7“ . S lun ,缝宽 1 . 3 lun ,原子气 :
氧气一乙炔气 , 氧气 9 . 5口面 n , 乙炔气 2 . 3口 m in ,火
焰高 7 . S lun ,人工进样 。
2
.
3 刺五加叶总糖的测定
2
.
3
.
1 葡萄糖标准曲线的绘制以分析天平精密称取
干燥恒重的无水葡萄糖 1o mg 于 10 诫 容量瓶中 ,加
蒸馏水溶解并定容至刻度 , 混匀 , 使成 l m盯耐 . 取 9
支 25 x 25o un 试管 ,按表 2 加试剂 :
将各管混合均匀 ,在沸水浴中加热 5而 n ,取出后立即
在冷水中冷却 , 再向各管加人 21 . 5诫蒸馏水 ,混匀 ,
于 72 分光光度计 520 ~ 处测定光密度
,并以葡萄
糖 mg 数为横坐标 , 以光密度为纵坐标绘制标准曲线 .
(重复三次测得数据 ,取平均值做标准曲线 )葡萄糖标
准曲线应用回归方程分析 ,得回归方程为 : Y 二 0 . 07 15
+ 2
.
309 2 X R
Z 二 0
.
999 1
表 2 葡萄糖标准曲线试液的制备
aT bl eZ T es 七. lu t o in o仓咖山” d c vur e P r e Par 灯。
单位 (耐 )
u n i t ( ml )
试剂名称 2 3 4 5 6 7
O己,`ù、ùnà,1.1葡萄糖标准液
蒸馏水
3
,
5 一二硝基水杨酸
0 0
.
2
2
.
0 1
.
8
1
.
5 1
.
5
0
.
4
1
.
6
0
.
6
1
.
4
1
.
5
1
.
0 1
.
2 1
.
4
1
.
0 0
.
8 0
.
6
1
.
5 1
.
5 1
.
5
0
.
2
2
.
3
.
2 样品测定液的制备分析天平上精密称取样品
l (众 )mg ,放人锥形瓶中 , 加蒸馏水 30 耐 . 6N HC助 iln ,
于沸水浴中加热水解 40 而 n ,取一滴水解液于白瓷板
上 , 以碘 一 碘化钾试剂检查 ,水解液不呈蓝色为水解
完全 ,冷后加 1 滴酚酞指示剂 , 以 6N N a O H 中和并滤
至 Zo m l容量瓶中 ,残渣以蒸馏水冲洗 , 然后定容至
刻度 ,混匀 ,备用 。
2
.
3
.
3 样品的测定取 25 x 2 50 ~ 试管按下表加人
试剂 :各管混匀后各项操作按标准曲线项下进行测定
后以样品光密度查得相应的葡萄糖 m g 数 ,计算总糖
含量 。
总糖% 二 (水样品解后葡萄糖毫克数 x 样品稀释
体积 ) /样品重量
表 3 总糖含t 测定液的制备
T a b le 3 eD et
r m l n 奴月il q u o r o ft o 加山川 g ar
单位 (耐 )
u n i t (耐 )
试剂名称
样品测定液
蒸馏水
3
,
5 一 二硝基水杨酸
人参研究 2加 8年第 3期
2
.
4 刺五加叶中黄酮总含量测定
2
.
4
.
1 标准曲线制作精密称取芦丁对照品 3. 4 gm ,
用无水乙醇溶解并稀释至 50 耐 , 做为对照溶液。 取
对照品溶液 0 . 5而 、 1 . 0耐 、 2 . o ln 、 3 . 0耐 、 4 . 0耐 、
5
.
0耐 ,分别加乙醇至 5耐 ,摇匀 ,各精确加人0 . lmo F L
三氯化铝溶液 3 . 0血及 l mo F L醋酸钠溶液 5 . 0血 ,摇
匀 ,静置 40 而 n ,于波长 420 lun 处测定吸收度 , 绘制标
准曲线 , 得标准曲线的回归方程为 Y 二 0 . 08 5x -
0
.
0 926 (
r = 0
.
987 )
。
2
.
4
.
2 样品测定取刺五加叶粗粉 5 . 0 9 , 用石油醚回
流脱色 , 至无色 ,取出干燥。 精密称取一定量 ,再用无
水乙醇加热回流至提取液无色 , 滤液加 0 . 16 9 活性
炭 , 80 ℃水浴脱色 10 而 n ,抽滤 , 滤液再用活性炭脱色
一次 ,抽滤回收乙醇 ,浓缩物加一定量水。 再加活性
炭脱色 ,方法同上 ,抽滤滤液回收乙醇 , 浓缩物蒸干 ,
用无水乙醇定容于 10 耐容量瓶中 ,按标准曲线项下
的方法 , 自“ 加乙醇至 5耐 ” 起依法测定吸收度 , 计算
含量 。
3 结果与讨论
3
.
1 结果见表 4 、 5 。
表 4 刺五加叶中氮基酸测定结果
T a b l e 4
单位%
U n i t%
项目名称 实验数据 项目名称 实验数据
天门冬氨酸 1 . 0 18 苏氨酸 0 . 4 2
丝氨酸 0 . 4 29 谷氨酸 0 . 10
甘氨酸 0 . 562 丙氨酸 0 . 6 16
撷氨酸 0 . 62 蛋氨酸 0 . 0 83
异亮氨酸 0 . 430 亮氨酸 0 . 773
酪氨酸 0 . 35 苯丙氨酸 0 . 508
赖氨酸 0 . 41 5 组氨酸 0 . 190
精氨酸 0 . 438 脯氨酸 0 . 4 54
合计 8 . 42
表 5 刺五加叶微l 元素分析结果
T s b l e s
单位 。 ( B ) / 10 一 `
u n i t 。 ( B ) / 10
一 6
元素符号 A I eF Ca M g B Ba e d e o
含量 3 3 2 . 8 165 . 8 18980 3 8 8 3 36 . 3 6 2 5 0 . 9 0 . 4 1 < 0 . 0 1
元素符号 C r C u 肠 M n M o N i P Pb
含量 3 . 17 9 . 58 0 . 53 185 . 9 0 . 54 0 . 4 3 4 856 3 . 7乏l
元素符号 S r Ti V Y Z n B e
含量 7 9 . 92 < 0 . 0 1 3 . 45 < 0 . 0 1 74 . 0 1 < 0 . 0 1
人参研究 RES N HE NY A J N IZ U加8 年第 3期 3 1
刺五加叶中总糖含量为 1 . 51%, 总黄酮含量为 加叶中重要的药理活性成分〔日J ,刺五加叶中黄酮类成
0
.
75 5%
。 分具有广泛的药理活性 , 能扩张血管 , 增加冠状动脉
3
.
2 讨论 血流量 , 降低心肌耗氧量 ,抗心肌缺血 , 改善心电图 ,
本文对刺五加叶中的活性成分进行了综合分析 抗异位心律 ,降低血压 ,镇静安神9[] 。 本实验为刺五
及含量测定 ,刺五加叶中含有 16 种氨基酸 ,其中 7 种 加叶的药理作用及开发刺五加叶提供了理论依据及
为人体必需 ,谷氨酸和天门冬氨酸含量较高。 并含有 物质基础 , 同时可以扩大刺五加的应用范围 , 有效的
十多量种微量元素 , 其中 aC 含量最多 。 利用资源 。
叶中黄酮类成分含量较高 , 黄酮类化合物是刺五
参 考 文 献 :
【l] 中华人民共和国药典 (一部 )【M】, 广州 :广东科技出版社 , 20 5 .
〔2 ]赵敏 , 王炎 ,康莉 . 刺五加果实及种子 内源萌发构物质活性的研究【J] . 中国中药杂志 , 20 1 , 26 ( 8 ) : 5 34 -
538
.
【3〕全国中草药汇编编写组 . 全国中草药汇编 ( 下册 ) 【M〕. 北京 :人民卫生出版社 , 1975 : 146
[ 4 1周以 良主编 . 黑龙江树木志【M〕. 哈尔滨 : 黑龙江科学技术出版社 , 1986 .
【5 〕李庆勇 , 付玉杰 , 吕欣 ,等 . 超声法提取刺五加 ( cA an ht 叩an ax se int co su s ) 中丁香贰的研究【J ] . 植物研究 , 20 3 ,
23 ( 2 )
: 182 一 184
.
〔6」曹先兰 ,李珠莲 . 刺五加国外实验研究 (综述 ) 〔J ] . 中草药 , 1980 , 11 ( 6) : 27 7 一 28 1 .
【7」杨春花 , 刘刚 ,张崇禧 . 刺五加的研究进展【J] . 人参研究 , 2 (X)4 , ( l ) ; 17 一 21 .
〔8 〕刘忠英 , 晏国全 . 刺五加中黄酮类化合物的微波辅助提取研究〔J ] 。 分析化学研究简报 , 20 以 ,犯 ( 3 ) : 3加 -
3 6 3
.
厂g J陈貌连 , 宋凤瑞 . 刺五加叶中黄酮类化合物的分析【J ] 。 分析化学研究简报 , 20 2 , 30 ( 6) : 690 一 69 4 .