全 文 ：[ 收稿日期] 　2007-08-24
[ 通讯作者] 　＊卫昌华 , Tel:13500821826;E-mail:jczhangwei @
126.com
高效液相色谱法测定返魂草颗粒中绿原酸的含量
卫昌华＊
(长春市中心医院 ,吉林 长春　130051)
　　[ 摘要] 　目的:应用高效液相色谱法测定返魂草颗粒中绿原酸的含量。 方法:采用 Shim-pack(岛津)C18柱(4.6 mm×150
mm , 5μm);乙腈-0.4%磷酸水溶液(10.5∶89.5)为流动相;流速 0.8 mL·min-1;检测波长为 327 nm。结果:绿原酸线性范围为
(0.092 ～ 0.46)μg , r=0.999 8 ,回收率为 98.16%, RSD=1.07%。结论:该方法操作简便 、准确 、灵敏 ,可用于该制剂的质量控制。
[ 关键词] 　高效液相色谱法;绿原酸;返魂草颗粒
[ 中图分类号] 　R284.1　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2008)04-0015-02
　　返魂草颗粒是由返魂草一味中药组成 。具有清
热祛痰 ,镇咳平喘 。用于肺内感染 ,慢性支气管炎 ,
喘息性支气管炎 ,急性呼吸道感染等。我们选择返
魂草中绿原酸含量作为本品含量测定的成分指标。
本文采用HPLC色谱法对返魂草颗粒中绿原酸进行
含量测定 ,以便更好地控制产品的质量 。
1　仪器与试药
日本岛津 LC-10AT 高效液相色谱仪;SPD-10A
紫外检测器;KQ-250 型超声波处理器;绿原酸对照
品(购于中国药品生物制品检定所 ,批号:0543-9901 ,
HPLC面积归一化法 ,测定含量为 98.98%);返魂草
颗粒(市售);乙腈为色谱纯 ,产于美国。其它试剂均
为分析纯 。
2　实验方法与结果
2.1　色谱条件[ 1 , 2] 　色谱柱为 Shim-pack-C18柱(4.6
mm×150 mm ,5 μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶
液(10.5∶89.5),流速:0.8 mL·min-1 ,紫外检测波长:
327 nm;柱温:30℃。理论塔板数按绿原酸计算应不
低于3 000。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取绿原酸对照品
适量 ,置于棕色瓶中 ,以 50%甲醇制成每 1 mL含 25
μg的溶液 。
2.3　供试品溶液的制备　取本品 10袋 ,研细 ,取约
0.5 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入 50%甲
醇25 mL ,称定重量 ,超声处理(功率 250 W ,频率 20
kHZ)20 min ,取出 ,放冷 ,再称定重量 ,加 50%甲醇
补足减失的重量 ,摇匀 ,用微孔滤膜(0.45μm)滤过 ,
取续滤液 ,做为供试品溶液 。
2.4　阴性对照溶液的制备　由于返魂草颗粒是由
单味药材返魂草制成 ,故取辅料蔗糖粉作为阴性样
品 ,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液 。
分别精密吸取对照品溶液 、供试品溶液 、阴性对照溶
液各 10μL , 注入液相色谱仪中 ,按色谱条件测定 ,
结果表明 ,阴性对照色谱图中 ,与对照品相同保留时
间处无干扰 。
2.5　线性关系考察　精密吸取绿原酸对照品溶液
4 ,8 ,12 , 16 ,20 μL ,分别注入高效液相色谱仪中进行
分析 ,以对照品进样量(μg)为横坐标 ,以对照品的峰
面积为纵坐标 ,回归方程为:Y =1.99×106X -5.51
×102 , r=0.999 8 ,结果表明绿原酸在(0.092 ～ 0.46)
μg 间呈良好的线性关系。
2.6　精密度试验　精密吸取同一供试品溶液连续 5
次重复进样 ,测得相对偏差 RSD=0.73%。
2.7　稳定性试验　在制得供试品溶液后 0 , 2 , 4 , 6
h ,分别精密吸取供试品溶液 10 μL ,测定 。结果绿原
酸峰面积的 RSD=0.27%,表明在 6 h内供试品溶液
的绿原酸含量稳定。
2.8　重复性试验　取同一批样品 ,按本文方法独立
测定5次 ,样品中绿原酸含量 RSD=1.07%,结果表
明其重复性良好 。
2.9　加样回收率试验　精密称取绿原酸对照品适
量 ,加入到已测知绿原酸含量的返魂草颗粒样品中 ,
精密加入 50%甲醇 100 mL ,制备供试品溶液 ,进样 5
μL ,测定峰面积 ,计算回收率 ,结果见表 1。
·15·
第 14卷第 4 期
2008年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.14 , No.4
Apr., 2008
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2008.04.011
表 1　绿原酸回收率试验测定结果
样品取量
(g)
样品中
含量(mg)
对照品加
入量(mg)
实测值
(mg)
回收率
(%)
2.001 2 2.415 2.58 4.954 6 98.43
2.035 6 2.457 2.51 4.912 8 97.84
2.045 6 2.469 2.48 4.934 0 99.40
2.098 5 2.533 2.41 4.859 4 96.53
2.063 1 2.490 2.44 4.895 7 98.59
　　 X=98.16%　RSD=1.07%
2.10　样品测定　按本文 2.2与 2.3项下分别制备
对照品溶液和供试品溶液 ,按上述色谱条件 ,依法进
样测定 ,共测定 3 批样品 , 结果绿原酸含量分别为
3.02 ,3.34 ,2.79(mg 袋)。
3　讨论
　　在试验过程中 ,曾采用回流提取 、超声处理两种
制备供试品溶液方法 ,并进行了测定分析 。结果均
可使绿原酸提取完全 ,为了缩短检测时间 ,我们采用
超声提取 ,制得供试品溶液 。
　　在试验中 ,曾选用多种流动相进行试验 ,乙腈-
0.4%磷酸水(12∶88)、乙腈-0.4%磷酸水(9∶91)等;
最后选用正文所述的液相色谱条件 ,可使供试品得
到较好分离 ,而被采用 。
[参考文献]
[ 1 ] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部 , 北
京:化学工业出版社 , 2005.153.
[ 2] 　蔡洁英 , 梁　晖 , 蔡松涛 , 等.口炎清颗粒中绿原酸
HPLC测定及其稳定性考察[ J] .现代中药研究与实
践 , 2004 , 18(3):36-38.
高效液相法测定祛痹舒肩丸中淫羊藿苷的含量
申　强1 , 2 ,吕竹芬1 ,谢清春1 ,庄义修3＊
(1.广东省药物新剂型重点实验室/广东药学院药物研究所 ,广东 广州　510006;2.长治医学院 ,
山西 长治　046000;3.广东食品药品职业学院 ,广东 广州　510520)
　　[ 摘要] 　目的:建立以高效液相色谱法测定祛痹舒肩丸中淫羊藿苷含量的方法。方法:色谱柱为 C18柱(4.0 mm×250 mm ,
5 μm),流动相为乙腈-水(30∶70), 检测波长为270 nm ,流速为1.0 mL·min-1 ,柱温为室温。结果:淫羊藿苷在(0.199 2～ 3.984)μg
范围内浓度与峰面积线性关系良好(r=0.999 8 , n=7), 平均加样回收率为 98.2%, RSD为 2.1%(n=6)。结论:本方法简便 、灵
敏 、准确 , 可用于祛痹舒肩丸的质量控制。
[ 关键词] 　高效液相色谱法;祛痹舒肩丸;淫羊藿苷
[ 中图分类号] 　R284.1　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2008)05-0016-03
Determination of Icariin in Qubi Shujian Pills by HPLC
SHEN Qiang
1 , 2 , LVZhu-fen1 , XIE Qing-chun1 , ZHUANG Yi-xiu3＊
(1.Key laboratory of Advanced Durg Delivery of Guangdong Province , Institute of Material
Medica , Guangdong College of Pharmacy , Guangzhou 510006 , China;2.Changzhi Medical College ,
Changzhi 046000 , China;3.Guangdong Food and Drug Vocational College , Guangzhou 510520 , China)
[ 收稿日期] 　2007-11-05
[ 基金项目] 　广东省科技计划地市重点引导项目(No:2006B35604008)
[ 通讯作者] 　＊庄义修 , Tel:(020)22846586 , E-mai l:zhuangyx@gdyzy.edu.cn。
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第 14卷第 4 期
2008年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.14 , No.4
Apr., 2008