全 文 ：　　 [文章编号 ]　 1671-587Ⅹ ( 2005) 03-0474-03
[收稿日期 ] 　 2004-03-12
[基金项目 ] 　科技部国家重点科技项目 (攻关 ) 计划新药研究与产业化开发基金资助课题 ( 96-901-05-155)
[作者简介 ] 　陈燕萍 ( 1963- ) , 女 , 吉林省公主岭市人 , 副教授 , 主要从事天然产物化学研究。
* 　通讯作者 ( T el: 0431-5619467)
人参果的鉴定及 RP-HPLC法测定其人参皂苷的含量
Identif ication of ginseng fruit and determination of content
of ginsenoside in ginseng fruit by RP-HPLC
陈燕萍 1 , 刘　磊 1 , 张　雷 1 , 徐芳菲 2 , 王志才 1* , 马兴元 1
( 1. 吉林大学化学学院化学中心 , 吉林 长春 130021; 2. 吉林集安益盛药业股份有限公司 , 吉林 集安 134200)
[摘　要 ]　目的: 测定人参果中人参皂苷 Re和 Rg1的含量 , 同时对人参果进行鉴定 , 为人参果资源的开发、 药
材及制剂的质量控制提供依据。方法: 采用 RP-HPLC法测定人参果中人参皂苷 Re和 Rg1含量 ; 采用粉末显微鉴
别法、 薄层色谱法对人参果进行鉴别。结果 : 规定了人参果的性状、 粉末的显微鉴别特征 ; 人参皂苷 Re和 Rg1的
薄层色谱斑点清晰 , 专属性强。人参皂苷 Re和 Rg1含量分别在 0. 5～ 5. 0μg和 0. 04～ 0. 25μg范围内呈良好的线
性关系 , 回归方程分别为 y= 1301104x+ 143575 ( r= 0. 9999) 和 y= - 1644034x+ 10985 (r= 0. 9999) , 加样回
收率分别为 96. 7%和 97. 1%。 人参果中人参皂苷 Re和 Rg1的加和量不低于 0. 3%。 结论: 粉末显微鉴定法、 薄
层色谱法鉴别准确、 简便、 重现性好 , 适合于人参果的鉴定 ; RP-HPLC法测定人参果中人参皂苷含量方法准确、
简便、 重现性好 , 适用于人参果的含量测定 , 可为人参果的质量控制提供依据。
[关键词 ] 　人参果 /分析 ; 色谱法 , 高效液相 ; 质量控制
[中图分类号 ] 　 R284　　 [文献标识码 ]　 A
　　人参果为五加科植物人参的成熟果实 , 主要活
性成分为人参皂苷 , 与人参 (根 ) 的主要成分相同 ,
且人参果中的皂苷较人参根中的含量高 [ 1] , 主要皂
苷成分为人参皂苷 Re。目前尚未见人参果质量控制
的报道 ,为开发利用人参地上部分资源 ,本研究从药
材性状、显微特征、薄层色谱、 HPLC定量分析等方
面对人参果进行了质量控制方面研究 , 为制定人参
果质量标准提供依据。
1　材料与仪器
生物显微镜 ( OLYM PUS-CH20, 日本 ) , 高效
液相色谱仪 ( LC-10T A, 岛津 ) , 工作站 (大连江申
分离科学技术中心 ) , V P-O DS ( 150× 4. 6 mm , 5μ)
色谱柱 (岛津 ) , SPD-10AV P/10AV P紫外 -可见检
测器。乙腈 (色谱纯 , 浙江黄岩化工实验厂 ) , 其他
试剂为优级纯。人参皂苷 Re、 Rg1对照品由本研究
室自制 ( HPLC面积归一化测定含量均不低于
99% )。人参果采自吉林省集安市 , 经任国栋教授鉴
定为人参的成熟果实。
2　方　法
2. 1　人参果性状
本品为浆果状核果 ,呈肾状扁球形 ,横向直径约
10 mm,纵向直径约 8 mm ,个别有小者。暗红色 ,表
面光滑或微皱 , 顶端有花盘残存 , 直径约 1 mm。底
部有一圆形凹窝 , 为果柄痕 , 直径约 1 mm。剥去果
肉可见果核 2枚 , 宽肾形 , 一面平截 , 长约 7 mm,
宽约 5 mm。剥开果核 , 可见种子一枚 , 白色 , 富油
性。浆果质地柔软 ,果核质地坚硬。果肉味甘甜后苦
辛 , 种仁甘、 辛。
2. 2　人参果的鉴定
2. 2. 1　人参果粉末的显微鉴定　人参果粉末呈土
黄色。 果皮表皮细胞表面为多角形或长方形 , 直径
13～ 30μm,可见气孔 , 不定式 , 保卫细胞长 36～
45μm。果皮表皮细胞侧面观呈长方形 , 导管多为环
纹导管 , 直径 15μm左右 , 已木化 , 导管旁伴有长
形薄壁细胞。内果皮厚壁细胞呈纤维状 ,长 150μm,
直径 12～ 32μm, 壁厚、 木化 , 可见孔沟及壁孔 , 有
474
第 31卷　第 3期
2005年 5月
吉　林　大　学　学　报　 (医　学　版 )
Journal o f Jilin Univ er sity ( Medicine Edition)
Vo l. 31 No . 3
May 2005
DOI : 10. 13481 /j . 1671 -587x. 2005. 03. 065
的平行成束或纵横交错排列。 种仁薄壁细胞呈多角
形 , 直径约 30μm,内含油滴。人参果粉末显微特征
见图 1。
Fig. 1　 The Charateristics of ginseng fruit pow er unde r
micr oscope
1A: Pericarp epidermis cell outside; 1B: Pericarp epid ermis cell
profi le; 2: Duct wi th parench yma cell; 3: End ocarp sclerenchyma cell;
4: Seed parench yma cell w i th greas e; 5: Cluster crystal
2. 2. 2　薄层色谱法鉴定　取人参果 1 g , 果肉研碎
后加乙醇 5 mL, 超声提取 20 min, 滤过 , 滤液为供
试品溶液。另取人参皂苷 Re和人参皂苷 Rg1对照
品 , 加乙醇分别制成每 1 mL各含 2. 5 mg的溶液。
吸取上述两种溶液各 10 μL, 分别点于同一
硅胶 G薄层 板上 , 以氯 仿 -甲 醇 -醋 酸 乙酯 -水
( 15∶ 22∶ 40∶ 10) 10℃以下放置后的下层溶液为展
开剂展开 ,取出晾干 ,喷以硫酸溶液 ( 1→ 10) , 105℃
烘约 15 min。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的
位置上 , 显相同颜色的斑点。
2. 3　 RP-HPLC法测定人参果中人参皂苷含量
2. 3. 1　对照品溶液的制备　精密称取人参皂苷 Re
与人参皂苷 Rg1对照品适量 , 加甲醇分别制成每
1 mL含人参皂苷 Re 0. 25 mg 和人参皂苷 Rg1
0. 025 mg的溶液。
2. 3. 2　供试品溶液的制备　取本品 50 g , 精密称
定 ,将果肉研碎 ,加乙醇 100 mL,超声提取 30 min,
滤过 , 重复一次操作 , 合并滤液。将滤液浓缩至干 ,
加 水 50 mL 溶解 , 过 D4020大 孔吸附 树脂 柱
(长 20 cm ,内径 2. 5 cm)水洗至洗脱液无色 ,用 20%
乙醇 100 m L洗脱 , 弃去洗脱液 , 再用 80%乙醇
120 mL洗脱 , 收集洗脱液。将洗脱液过用乙醇浸泡
过的 D941型离子交换树脂柱 (长 20 cm, 内径
2. 5 cm ) ,接收流出液 , 最后用 20 mL乙醇洗脱。将
流出液浓缩至干 , 甲醇定容 25 mL量瓶中 , 精密量
取 1 mL,置 10 mL量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。
2. 3. 3　方法学考察　①色谱条件与系统适用性: 用
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 , 乙腈 -0. 05%磷酸
溶液 ( 21∶ 79) 为流动相 , 检测波长为 203 nm, 流
速为 1 mL· min- 1 ; 理论板数按人参皂苷 Re峰计 ,
应不低于 3000。②线性关系: 分别精密吸取人参皂
苷 Re对照品 3、 6、 9、 12、 15、 18和 20μL按上述
条件测定。以进样量为横坐标 ,峰面积积分值为纵坐
标 , 绘制标准曲线 , 得回归方程 y= 1301104x+
143575, r= 0. 9999,结果表明人参皂苷 Re在 0. 5～
5. 0μg范围内呈良好的线性关系。 分别精密吸取人
参皂苷 Rg1对照品 2、 4、 6、 8和 10μL按上述条件
测定。以进样量为横坐标 , 峰面积积分值为纵坐标 ,
绘制标准曲线 , 得回归方程 y= - 1644034x+
10985, r= 0. 9999,结果表明人参皂苷 Rg1在 0. 04～
0. 25μg范围内呈线性关系。③稳定性: 精密吸取样
品溶液 10μL,分别在 0、 4、 8、 12和 24 h内测定 ,结
果表明样品溶液在 24 h内基本稳定 , 人参皂苷 Re
和 Rg1的 RSD分别为 1. 80%和 2. 27%。 ④精密
度: 取一样品溶液进样 10μL, 依法连续测定 5次 ,
Re和 Rg1的 RSD分别为 1. 38%和 1. 43% , 结果表
明仪器精密度良好。 ⑤重现性: 取同一批号样品
5份 ,依上述方法独立测定 5次 , Re和 Rg1的 RSD
分别为 0. 74%和 1. 52% , 结果表明人参皂苷 Re和
Rg1的重现性良好。⑥加样回收试验: 精密称取已知
含量的样品 20 g ,共 5份 , 分别精密称取人参皂苷
Re和 Rg1对照品适量 , 测定加标回收率 , 结果表明
人参皂苷 Re和 Rg1回收率较好 ,平均回收率分别为
96. 7%和 97. 1% , RSD分别为 1. 3%和 1. 4%。
3　结　果
依上述测定条件和方法测定 3批样品人参皂苷
Re和 Rg1的含量 , 平均含量分别为 0. 348%和
0. 018% , 总含量平均值为 0. 366%。样品色谱图见
图 2。
Fig. 2　 HPLC chromato g rams of g inseng fruit
1. Gins eosid e Rg1; 2. Gins eosid e Re
475陈燕萍 , 等 .　人参果的鉴定及 RP-HPLC法测定其人参皂苷的含量
4　讨　论
本文作者报道人参果定性鉴定和定量分析的方
法:粉末显微鉴别法、薄层色谱法 ,方法准确、简单、
重现性好 ,适于于人参果的定性鉴定。 RP-HPLC法
测定人参皂苷含量方法准确、先进、可操作性强 ,适
于人参果中主要皂苷成分的定量分析 ,为人参果质
量标准的制定提供试验方法和科学数据。
通过 RP-HPLC法测定人参皂苷 Re和 Rg1的
含量 ,人参果中二者总含量均高于 0. 3% 。作者拟定
人参果中人参皂苷 Re和 Rg1的加和量不低于
0. 3%作为人参果中人参皂苷质量控制指标。
在含量测定中 ,采用树脂法制备样品 ,即可除去
人参果中的糖类、蛋白质等大分子杂质 ,同时脱色树
脂可除去色素类成分 ,避免样品对色谱柱的污染。同
时 ,参照文献 [2-5 ]进行了线性关系考察和稳定性、
精密度、加标回收率等方法学考察 ,结果符合
2000年版中国药典要求。
[参考文献 ]
[1 ] 张树臣 . 人参地上部分与人参根的药理作用不尽相同 [ J] .中医
杂志 , 1984, 25( 2): 156-157.
[2 ] 张　雷 ,陈燕萍 ,王志才 ,等 . 高效液相法测定参杞降糖口服液
中人参皂苷 Re、 Rg1的含量 [ J] . 吉林大学学报:医学版 , 2002,
28( 4): 439-444.
[3 ] 朱照静 ,邓开英 . 红参中人参皂苷 Re1和人参皂苷 Re的含量测
定 [ J] .中国实验方剂学杂志 , 2003, 9(5) : 10-11.
[4 ] 张雪光 ,俄丽丹 ,孙　巍 ,等 . 高效液相法测定人参片人参皂苷
Rg1和 Re的含量 [ J] .中国药业 , 2003, 12( 10): 42-43.
[5 ] 郭永利 . HPLC法测定云南红药中人参皂苷 Rg1 [ J] . 药物分析
杂志 , 2001, 12( 1): 58-59.
臀大肌肌皮瓣修复一氧化碳中毒所致臀部溃疡
辽宁 省营 口市 中 心医 院外 科　刘　枫
辽宁省营口市开发区人民医院外科　张　鹏
吉林 大学 中日 联 谊医 院外 科　张屹阳
本院 1994- 2003年收治一氧化碳中毒致臀部溃疡患者 55例 ,采用臀大肌肌皮瓣修复 13例 ,经 6个月～ 3年随诊 ,效果良
好。
1　临床资料
1. 1　一般资料　本组 13例 ,男性 8例 女性 5例 ,年龄 18～ 76岁 ,均为一氧化碳中毒后并发低温慢热性烫伤 ,后经高压氧及
创面换药处理 ,清除坏死组织后有深部溃疡。 2例并发坐骨神经痛 ,同时 5例伴有迟发性脑病 ,病程 1～ 5个月 ,创面
6. 0 cm× 8. 0 cm～ 10. 0 cm× 14. 0 cm,均深达深筋膜及骨质。
1. 2　治疗方法　①手术前清创: 溃疡创面术前逐渐剪除坏死组织 ,术前 3～ 5 d每日用庆大霉素盐水清洗创面并高渗盐水外
敷 ,再敷以碘伏油纱 ,待创面清洁、肉芽新鲜无水肿后手术。 ②手术中清创处理: 常规消毒铺巾 ,清除不健康的组织 ,创面冲洗 ,
修剪肉芽创面 ,止血彻底 ,必要时彻底切除肉芽组织。 再予重新消毒铺巾 ,用庆大霉素盐水外敷备皮瓣转移。 ③皮瓣修
复: a. 以臀上动脉为蒂的臀大肌上部肌皮瓣。从臀部外上方开始切开皮肤、皮下及深筋膜 ,寻找臀大肌与臀中肌间隙 ,钝性分
离。 游离臀上肌肌纤维至髂胫束与大粗隆间 ,注意保留臀下神经来的运动神经分支 ,翻起肌皮瓣 ,术中可以不暴露臀上动脉的
主干。也可将臀大肌起始端肌纤维切断 ,形成臀上动脉浅支为蒂的岛状瓣。 b. 以臀下动脉为蒂的臀大肌下部的肌皮瓣。沿臀
大肌下缘做弧形切口 ,先作皮瓣下部的切口 ,沿臀大肌下缘向外上方游离臀大肌至股骨粗隆附着点处 ,切断后向上掀起皮瓣 ,
备用。根据创面的大小及位置 ,需要将肌皮瓣向内或向外旋转修复创面。注意创面张力不要过大 ,予以边缘缝合 ,放置引流条。
供皮区潜行后可直接缝合 ,或张力过大可作游离植皮 ,创面大部分Ⅰ 期愈合。 1例创面清创不彻底 ,形成瘘道 ,经换药后Ⅱ期手
术清创缝合 ,愈合良好。 随访见皮瓣成活好 ,深感觉存在 ,步态基本正常 ,臀部、下肢功能无损伤。
2　讨　论
深部溃疡血液循环差 ,易受压 ,病程长 ,创面营养差。 皮瓣修复应选用易成活又耐磨的皮瓣为主。 采用臀大肌上下肌皮瓣
修复 ,时间短 ,疗效确切 ,多可一次性完成。 愈合后功能好 ,耐磨 ,不易破损。 手术前及手术中创面需清创 ,减少感染 ;术中探查
溃疡面积及深度 ;清创中要彻底清除坏死组织 ,同时保留有血运的健康组织。根据具体情况设计皮瓣 ,并注意蒂部是否受压及
皮瓣的大小 ,一般比创面大 2～ 4 cm为宜。 注意转移时张力不易过大 ,蒂部不要扭转及受压。术中熟悉解剖知识 ,防止创伤过
大 ,止血要彻底。 术后护理需及时观察创面 ,减少并发症的发生 ,并加强全身营养 ,配合高压氧治疗。
(邮编: 辽宁 营口 115002)
476 吉林大学学报 (医学版 ) 　第 31卷　第 3期　 2005年 5月