全 文 ：Ｊ．ＳＨＡＮＸＩ　ＡＧＲＩＣ，ＵＮＩＶ．（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
学报（自然科学版）２０１６，３６（１）：１５ ００３３３５
收稿日期：２０１５－０７－２１　　　修回日期：２０１５－１０－０９
作者简介：陈秋芳（１９７１－），女（汉），山西汾西人，副研究员，研究方向：果树栽培育种
＊通讯作者：王美琴，副教授，硕士生导师。Ｔｅｌ：１３９３５４９２９１８；Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｘｎｄｗｍｑ１９７３＠１６３．ｃｏｍ
基金项目：山西省科技攻关项目（２０１２０３１１０１６－２）；博士科研启动项目（２０１３ＹＪ１０）；山西省农科院育种基金（Ｙｙｚｊｃ１３１２）
樱桃根腐病病原鉴定及其生物学特性研究
陈秋芳１，梁艳霞１，张红娟２，吴红玉２，王美琴２＊
（１．山西省农业科学院 果树研究所，山西 太原０３０００６；２．山西农业大学 农学院，山西 太谷０３０８０１）
摘　要：为了有效的防治樱桃树根腐病，采用组织分离法、单孢分离法、形态学特征和柯赫氏法则对樱桃根腐病的病
原进行了分离纯化和鉴定；并采用菌落直径生长速率法和悬滴法测定了致病菌的培养条件及其对６种杀菌剂的敏感
性。研究结果表明引起樱桃根腐病的病原为腹状镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐｐｅｌ　＆ Ｗｏｌｅｎｗｅｂｅｒ）；病原菌在ＰＳＡ
培养基上生长最好，２５℃和偏酸性条件有益于孢子的萌发，而光照对孢子的萌发没有影响。供试的６种杀菌剂中，
樱桃根腐病菌对多菌灵最敏感，ＥＣ５０为０．４３１　４μｇ·ｍＬ
－１，其次是苯醚甲环唑和扑海因，ＥＣ５０分别为３４．９９９　３μｇ·
ｍＬ－１和８５．０９２　９μｇ·ｍＬ
－１。研究结果对指导樱桃根腐病的防治具有一定的意义。
关键词：樱桃根腐病；病原鉴定；腹状镰孢菌；生物学特性
中图分类号：Ｓ４３２．１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１６７１－８１５１（２０１６）０１－００１５－０５
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｆｒｏｍ　ｃｈｅｒｒｙ　ｔｒｅｅ　ｒｏｏｔ－ｒｏｔ
Ｃｈｅｎ　Ｑｉｕｆａｎｇ１，Ｌｉａｎｇ　Ｙａｎｘｉａ１，Ｚｈａｎｇ　Ｈｏｎｇｊｕａｎ２，Ｗｕ　Ｈｏｎｇｙｕ２，Ｗａｎｇ　Ｍｅｉｑｉｎ２＊
（１．Ｐｏｍｏｌｏｇｙ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｓｈａｎｘｉ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌ－
ｔｕｒｅ，Ｓｈａｎｘｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｇｕ　０３０８００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｐｒｅｖｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄａｍａｇｅ　ｏｆ　ｃｈｅｒｒｙ　ｒｏｏｔ－ｒｏｔ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ，ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｍｏｎｏｓｐｏｒｅ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ
Ｋｏｃｈ，ｓ　ｐｏｓｔｕｌａｔｅｓ，Ｔｈｅ　ｃｏｌｏｎｙ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｐｏｒｅｓ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ　ｉｎ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐｐｅｌ　＆ Ｗｏｌｅｎ－
ｗｅｂｅｒ．Ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｐｏｒｅｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｔｅｒ　ｏｎ　ＰＳＡ　ｍｅｄｉｕｍ，２５℃ａｎｄ　ａｃｉｄｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｂｕｔ　ｌｉｇｈｔ　ｈａｄ
ｎｏ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｓｐｏｒｅｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ａｍｏｎｇ　６ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ，ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａ－
ｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ＥＣ５０ｗａｓ　０．４３１　４μｇ·ｍＬ
－１．ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ　ａｎｄ　ｉｐｒｏｄｉｏｎｅ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏ－
ｇｅｎ，ＥＣ５０ｗｅｒｅ　３４．９９９　３μｇ·ｍＬ
－１　ａｎｄ　８５．０９２　９μｇ·ｍＬ
－１　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｈａｖｅ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｆｏｒ　ｐｒｅ－
ｖｅｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇ　ｃｈｅｒｒｙ　ｒｏｏｔ－ｒｏｔ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｈｅｒｒｙ　ｔｒｅｅ　ｒｏｏｔ－ｒｏｔ；Ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐｐｅｌ　＆ Ｗｏｌｅｎｗｅｂｅｒ；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒ－
ａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
　　樱桃因其上市早，色泽艳丽，果实营养丰富，含
有糖、蛋白质、维生素以及钙、铁、磷、钾等多种微量
元素，具有很高的食用价值，深受果农及消费者的
喜爱。近年来对其在培育优质品种资源方面进行
了大量的研究，出现了许多优良的品种［１～５］，但随
着种植面积的扩大和种植环境的变化，出现了发病
率上升、抗病性降低的问题，影响了樱桃的产
量［６，７］，尤其是樱桃树因根颈腐烂导致整株死亡的
现象日趋严重，病株率达２０％，地上部分表现出营
养不良症状，部分枝干上叶片发黄，严重的枝干枯
死，给果农造成了严重的经济损失。Ｊｏｎｅｓ在１９８６
年报道了美国 Ｍｉｃｈｉｇａｎ 有 该病 害的发生［８］，
Ｖｅｔｔｒａｉｎｏ在２００８年报道了意大利首次发现樱桃
根腐病［９］，在我国山东、山西、河南等地均有该病发
生，并且有逐年加重的趋势［１０，１１］。为了有效的预
防和控制该病害的发生，病原菌的鉴定是病害防治
的重要环节，也是进行病害发生规律和防治技术研
究的基础。本试验采用常规的组织分离法进行病
DOI:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2016.01.003
原菌的分离纯化后回接，按照柯赫氏法则的程序对
樱桃根腐病进行病原鉴定，并对致病菌的培养条件
及其对常用杀菌剂的敏感性进行了初步研究，为樱
桃根腐病的防治提供理论依据。
１　材料和方法
１．１　材料
培养基：①ＰＤＡ培养基：马铃薯２００ｇ，琼脂粉
１５ｇ，葡萄糖２０ｇ，蒸馏水１　０００ｍＬ；不加琼脂粉的
为液体培养基。②ＰＳＡ培养基：马铃薯２００ｇ，琼脂
粉１５ｇ，蔗糖２０ｇ，琼脂粉１５ｇ，蒸馏水１　０００ｍＬ。
③Ｂｉｌａｉｓ培养基：ＫＨ２ＰＯ４１ｇ，ＫＮＯ３１ｇ，ＫＣｌ　０．５ｇ，
ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ　０．５ｇ，淀粉０．２ｇ，葡萄糖０．２ｇ，蔗糖
０．２ｇ，琼脂粉１５ｇ，水１　０００ｍＬ。④查彼培养液：
ＮａＮＯ３２ｇ，ＫＣｌ　０．５ｇ，ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ　０．１ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４
１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ　０．５ｇ，蔗糖３０ｇ，琼脂粉１５ｇ，蒸
馏水１　０００ｍＬ。
供试材料：樱桃树病根（２０１３年７月采自山西
省农科院果树研究所樱桃园 ）
供试药剂：１０％苯醚甲环唑水分散粒剂（瑞士先
正达作物保护有限公司），７５％百菌清可湿性粉剂
（深圳诺普信农化股份有限公司），７０％甲基托布津
可湿性粉剂（美国阿普顿有限公司生产），５０％扑海
因可湿性粉剂（法国罗纳普朗克北京办事处），８０％
多菌灵可湿性粉剂（大仓市农药厂有限公司），８０％
代森锰锌可湿性粉剂（西安近代农药科技股份有限
公司）。
１．２　樱桃根腐病病原菌的分离与鉴定
１．２．１　病组织上病原的形态学鉴定
樱桃病根涂片显微镜检测：于２０１３年７月挖
取病根，病根表面有白色菌丝层，实验室进行手工
切片后在显微镜下观察病原真菌的产孢结构及分
生孢子类型，初步确定寄生真菌的分类地位。
１．２．２　樱桃根腐病菌的分离纯化和单孢分离
分离纯化：取直径约１ｍｍ粗细的新鲜病根，
先用自来水将表面的泥土冲洗干净，７０％的酒精浸
泡１ｍｉｎ进行表面消毒，再用无菌水冲洗３～４次，
然后在超净工作台上用灭菌的手术刀和镊子撕去
皮层组织，将中间木质部切成约为３ｍｍ左右的小
段置于ＰＤＡ平板中央，２５℃下恒温培养。待材料
边缘有菌落长出时，将不同的菌落分别挑到ＰＤＡ
平板上进行纯化。
单孢分离：将纯化后培养的分生孢子用无菌水
配成孢子浓度约为１０３ 个·ｍＬ－１，取２５μＬ孢子悬浮
液涂布于ＰＤＡ平板上，２５℃恒温培养箱中黑暗培
养，从分散的单个菌落上移植菌丝体进行培养。纯
化后的菌株在２５℃恒温培养４ｄ后，观察菌落形态
特征，产孢细胞，大、小分生孢子和厚垣孢子的形态。
１．２．３　回接试验
将分离纯化的单胞菌系对樱桃进行蘸根接种试
验。选用大小相同，生长状况相近的１年生樱桃健
康盆栽苗，用灭菌的接种针刺伤根毛，将樱桃苗的根
浸泡在孢子浓度为１０６ 个·ｍＬ－１的孢子悬浮液中
１０ｈ，取出后栽种在花盆中，每个花盆栽种一株，共
栽种１０株。盆栽土壤用孔径为５ｍｍ土壤筛处理
后在１６０℃的干燥灭菌箱中灭菌１ｈ，冷却后使用。
以无菌水浸泡的樱桃苗作为对照。定期观察植株发
病情况，如地上部分出现黄化症状后，采集樱桃病根
进行分离纯化，镜检分离物并与原始菌株比较。
１．３　致病菌的生物学特性
１．３．１　不同培养基对菌落生长及产孢量的影响
用打孔器在培养３ｄ的菌落边缘取直径６ｍｍ
的菌块，并将其正面朝下置于不同培养基平板中
央，置于２５℃的恒温箱中黑暗培养。每个处理重
复３次，培养２ｄ后开始测量菌落净生长量，培养
４ｄ后用直径１０ｍｍ打孔器分别在菌落中间位置
打取５个菌块，放入有１０ｍＬ无菌水的试管中（加
入少许明胶），用振荡器充分振荡洗涤后，用血球记
数板计测洗涤液中分生孢子数，重复测定３次，计
算１ｍＬ孢子悬浮液的产孢量。
１．３．２　温度、ｐＨ及光照对孢子萌发的影响
采用悬滴法测量孢子萌发率［１２］：用无菌水加少
许明胶将培养４ｄ的致病菌制成浓度为１０６ 个·
ｍＬ－１的孢子悬浮液。用移液器取０．０５ｍＬ的孢子
悬浮液滴在洁净的盖玻片中央，在盖玻片的边缘涂
上一层凡士林，然后快速翻转放在凹陷的载玻片上，
轻压使盖玻片粘在载玻片上，将载玻片放在培养皿
中，皿底放置浸水的棉花团保湿。置于不同条件下
培养。３６ｈ后在１６×４０倍的显微镜下观察孢子萌
发状况，当芽管长度超过孢子直径一半记为萌发，每
个处理３次重复，每个载玻片观察３个视野，即每个
处理观察９个视野，计算孢子的平均萌发率。
温度的设置：将培养箱的温度分别调节到
１０℃，１５℃，２０℃，２５℃，２８℃，３０℃下黑暗培
养；ｐＨ的影响：用１％盐酸和１％氢氧化钠溶液将
无菌水的ｐＨ 分别调至５．５，６．０，６．５，７．０，７．５，
８．０和８．５共６个处理，２５℃下黑暗培养；光照的
影响：将光照培养箱设置成光照、黑暗、４ｈ光照和
６１ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１６
黑暗交替３个处理，置于２５℃下培养。
１．３．３　不同药剂对樱桃根腐病菌的室内毒力测定
含药平板的制备：用无菌水将供试杀菌剂配置
成浓度为１　０００μｇ·ｍＬ
－１的母液，用无菌水将母液稀
释成浓度分别为４００、２００、１００、５０μｇ·ｍＬ
－１稀释液。
用移液枪取各稀释液１ｍＬ注入不同的无菌培养皿
中，同时倒入冷却至５０℃左右的ＰＤＡ培养基９ｍＬ，
轻轻摇匀，制成浓度分别为１００、４０、２０、１０、５μｇ·
ｍＬ－１的含药平板，以加无菌水为空白对照。
毒力测定：用打孔器在培养３ｄ的菌落边缘取
直径为６ｍｍ的菌块接入各含药平板中央，置于
２５℃恒温培养箱中培养，每个处理３个重复，４ｄ后
测量菌落直径，按照下列公式计算抑制率，使用ＤＰＳ
软件处理后得到毒力回归方程、相关系数及ＥＣ５０值。
抑制率／％＝（对照菌落直径－处理菌落直
径）／（对照菌落直径－６ｍｍ）×１００％
２　结果与分析
２．１　樱桃根腐病致病菌的分离和鉴定
２．１．１　樱桃根腐病病原组织分离结果
通过对樱桃根腐病病根的菌丝进行涂片观察发
现有大量的镰刀形的大型分生孢子和肾形的小型分
生孢子，初步鉴定为无性孢子类的镰孢菌属真菌
（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．），除此外没有发现其他的病原菌。
２．１．２　樱桃根腐病致病菌的分离和鉴定
致病菌的培养性状：该菌在ＰＤＡ培养基上生
长较 快，到 第 四 天 时 菌 落 直 径 达 到 ３．５０～
４．５０ｃｍ，气生菌丝发达，菌落为绒絮状，乳白色。
培养２ｄ后，开始产生分生孢子，１５ｄ时培养基背
面中央出现黄色条带，２１天黄色条带愈明显（图１
中Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ）。
致病菌的形态特征：分生孢子梗无色，多簇生，
有分隔，较少分枝。上端为产孢细胞：单瓶梗（图
１Ｅ）。分生孢子有两种类型：①小型分生孢子，多
卵圆形至椭圆形，无色，单胞至双胞，单生，量度为
６．５１～１６．６８×１．３５～５．５６μｍ（图１Ｆ）。②大型分
生孢子镰刀形，２～３分隔，分隔不太明显，量度为
２９．７９～３８．５０×５．８５～６．６８μｍ（图１Ｇ）。厚垣孢
子：第１５ｄ开始有厚垣孢子，但较少，第２１ｄ形成
大量的厚垣孢子，厚垣孢子表面光滑，单生或者
２～３个串生，在短侧枝的末端形成（图１Ｈ）。
病菌的生长速度、培养性状和子实体形态均与
已报道的腹状镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐｐｅｌ
＆ Ｗｏｌｅｎｗｅｂｅｒ）相似［１３］。根据分离物的培养性
状和形态学特征，最后初步将引起樱桃根腐病的致
病菌鉴定为腹状镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐ－
ｐｅｌ　＆ Ｗｏｌｅｎｗｅｂｅｒ）。
２．１．３　病原菌致病性测定
病原菌致病性测定人工回接结果表明，只有接
种了该菌的植株表现出了与田间相同的症状，再分
离菌株在２５℃培养３ｄ时的菌落形态与原接种体
一致，经测量其孢子形态及大小也与原接种体一
致，符合柯赫氏法则，故证实分离的菌株为樱桃根
腐病的致病菌。
２．２　致病镰孢菌的生物学特性
２．２．１　不同培养基对菌落生长及产孢量的影响
由表１可以看出，２５℃条件下致病镰孢菌在
４种培养基上都能够正常扩展和产孢。在ＰＳＡ和
查氏培养基上生长量最大，与其它处理差异显著，
４ｄ时菌落直径超过３５．０ｍｍ；在Ｂｉｌａｉｓ和查氏培
养基上大孢子的产孢量最大，分别为２．１×１０５个·
ｍＬ－１和１．９×１０５个·ｍＬ－１，在ＰＤＡ上大孢子的产
孢量最小；小孢子在 ＰＳＡ 培养基上产量最大为
２．６×１０５个·ｍＬ－１，与其他处理差异显著。
表１　不同培养基上致病菌的菌落直径和产孢量
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｃｏｌｏｎｙ　ｄｉａｍｅｔｅｒ　ａｎｄ　ｓｐｏｒｅｓ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　Ｆｕｓａｒ－
ｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ
培养基类型
Ｔｙｐｅｓ　ｏｆ
ｃｕｌｔｕｒｅ
ｍｅｄｉｕｍ
菌落直径／ｍｍ
Ｃｏｌｏｎｙ　ｄｉａｍｅｔｅｒ
产孢量个·ｍＬ－１
Ｓｐｏｒｅ　ｎｕｍｂｅｒ
２ｄ ４ｄ 大孢子 小孢子
ＰＳＡ　 １５．６ａ ３５．０ａ １．１×１０５　ｃ　 ２．６×１０５　ａ
Ｂｉｌａｉｓ　 １４．５ｂ ３４．３ｂ ２．１×１０５　ａ　 ５．０×１０４　ｂ
查氏 １５．２ａ ３５．３ａ １．９×１０５　ｂ　 ５．０×１０４　ｂ
ＰＤＡ　 １４．３ｂ ３４．６ｂ ６．０×１０４　ｄ　 ５．１×１０４　ｂ
注：不同小写字母表示Ｐ＜０．０５差异显著水平，下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｒｅｎｔ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｓｈｏｗ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｔ
ｔｈｅ　０．０５ｌｅｖｅｌ，ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
２．２．２　温度、ｐＨ及光照对致病菌孢子萌发的影响
试验结果表明：致病镰孢菌孢子在１８～３０℃
范围内均能萌发，在２５℃时萌发率最高为８９．５％
（图２）。ｐＨ为６．５时孢子的萌发率最高为９６．３％
（图３）。光照对孢子的萌发影响差异不显著，无论
在光照或黑暗条件下孢子均正常萌发。
２．２．３　６种杀菌剂对致病菌的毒力测定
由表２可知，苯醚甲环唑、扑海因、多菌灵３种
药剂对樱桃根腐病致病菌有很好的抑制作用。多
菌灵 对 樱 桃 根 腐 病 菌 的 毒 力 最 大，ＥＣ５０ 为
７１３６（１） 陈秋芳等：樱桃根腐病病原鉴定及其生物学特性研究
　　　　　
（Ａ和Ｃ：培养４ｄ和２１ｄ菌落正面；Ｂ和Ｄ培养４ｄ和２１ｄ菌落背面）
（Ａ＆Ｃ：ｃｏｌｏｎｉｅｓ　ｆａｃｅｓ　ｏｆ　４ａｎｄ　２１ｄａｙｓ；Ｂ＆Ｄ：ｃｏｌｏｎｉｅｓ　ｂａｃｋｓ　ｏｆ　４ａｎｄ　２１ｄａｙｓ）
图１　樱桃根腐病致病菌的培养性状和形态特征
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｐａｔｈｏｇｅｎ
图２　不同温度下分生孢子的萌发率
Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｓｐｏｒｅｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍ－
ｐｅｒａｔｕｒｅ
０．４３１　４μｇ·ｍＬ
－１，与其它处理相比差异显著。其
次是苯醚甲环唑和扑海英 ＥＣ５０分别为３４．９９９　３
图３　不同ｐＨ值下分生孢子萌发率
Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｓｐｏｒｅｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ
μｇ·ｍＬ
－１和８５．０９２　９μｇ·ｍＬ
－１。百菌清、甲基托
布津和代森锰锌 ３ 种杀菌剂的 ＥＣ５０ 都超过
８１ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１６
３００μｇ·ｍＬ
－１，对病原菌的毒性较弱。
表２　６种杀菌剂对樱桃根腐病致病菌的毒力测定
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　６ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ
ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　ｏｆ　ｃｈｅｅｒｙ　ｔｒｅｅ　ｒｏｏｔ－ｒｏｔ
杀菌剂
Ｂｉｏｃｉｄｅ
毒力回归方程
Ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｅｑｕａｔｉｏｎ
相关系数Ｒ
Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
ＥＣ５０
百菌清 Ｙ＝３．４４９　９＋０．５６４　３Ｘ ０．９５３　２　 ５５８．２８７　４ａ
甲基托布津 Ｙ＝３．０９２　９＋０．７３５　４Ｘ ０．９３６　９　 ３９１．９９６　９ｂ
苯醚甲环唑 Ｙ＝４．１０６　５＋０．５７８　７Ｘ ０．９８０　４　 ３４．９９９　３ｄ
扑海因 Ｙ＝２．７４３　５＋１．１６９　３Ｘ ０．８８８　４　 ８５．０９２　９ｃ
代森锰锌 Ｙ＝３．０３２　８＋０．７１４　８Ｘ ０．９７７　０　 ５６５．１３５　９ａ
多菌灵 Ｙ＝５．１９０　１＋０．５２０　７Ｘ ０．９９１　６　 ０．４３１　４ｅ
３　讨论
对于引起樱桃根腐病病原，上世纪９０年代，美
国纽约州农业实验站从樱桃病根和根颈中分离出
引起根腐病的致病菌为疫霉属真菌［１０］，Ｊｏｎｅｓ和
Ｖｅｔｔｒａｉｎｏ先后报道的引起樱桃根腐病的病原均为
疫霉属的隐地疫霉Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｃｒｙｐｔｏｇｅａ［８，９］。
国内还未见这方面明确的报道，本试验通过形态观
察、培养形状及柯赫氏法则确定引起樱桃根腐病的
病菌为腹状镰孢菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ，虽然与
　　　
国外学者报道的有出入，但据资料研究得知，引起
植物根腐病的病原种类不止一种，如赵思峰等分离
和鉴定了新疆甜菜根腐病的病原种群是以镰孢菌、
丝核菌和腐霉菌为主［１４］，国外Ｐｉｖｏｎｉａ等从甜瓜病
株的根部分离到腐皮镰孢菌 ［Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉ
（Ｍａｒｔ．）Ｓａｃｃ．］［１５］。中国林兰稳等从番茄根腐病
和粉葛根腐病中都分离到了镰孢菌 （Ｆｕｓａｒｉ－
ｕｍ）［１６，１７］。本试验采集的样本较单一，所以在今后
的工作中，针对全国主要樱桃产区的根腐病，需采
用传统形态学方法结合分子鉴定，进一步明确我国
樱桃根腐病致病菌的种群结构。
对于根腐病的防治，目前在生产中主要以增强
树势，注意防冻保暖，病根处理以及药剂灌根来控制
病害的扩展［１０，１１］。结合本试验结果，还应该从改良
土壤，调节微生态环境等方面来控制病害的发生。
４　结论
引起樱桃根腐病的致病菌为无性孢子类镰孢菌
属的腹状镰孢菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａ　Ａｐｐｅｌ　＆ Ｗｏｌ－
ｌｅｎｗｅｂｅｒ。ＰＳＡ培养基有利于菌落生长和孢子的产
生，２５℃和酸性条件有利于孢子的萌发，而光照和
黑暗对孢子的萌发没有影响，多菌灵对致病菌的毒
性最强，所以在发病初期建议使用多菌灵灌根，可以
有效的抑制病原菌的萌发，控制病害的扩展。
参　考　文　献
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（编辑：张贵森）
９１３６（１） 陈秋芳等：樱桃根腐病病原鉴定及其生物学特性研究