全 文 ：第 27卷　第 2期
2008 年 4 月 安　徽　中　医　学　院　学　报JOURNAL OF ANHUI TCM COLLEGE Vo l.27　No.2Apr.2008
紫外分光光度法测定豨莶草中总萜类成分含量
杨满琴 ,许凤清1 ,刘金旗
(安徽中医学院附属针灸医院　安徽省中药研究与开发重点实验室 ,安徽 合肥　230031)
摘要:目的:建立紫外分光光度法测定豨莶草中总萜类含量的方法。方法:以药材中有效成分
豨莶苷为对照品 ,用 800 g/ L 硫酸显色 ,在 385 nm 波长处测定样品吸收度。结果:豨莶苷浓度为
44 ～ 132 μg/ml时与峰面积呈良好线性关系 ,其回归方程为:A=0.006 3 c-0.000 4 , r =0.998 1 ,
平均回收率为 98.24%,RSD为 1.56%。结论:该方法操作简便 ,结果可靠 ,重现性好 ,可用于豨莶
草中总萜类含量的测定。
关键词:紫外分光光度法;豨莶草;豨莶苷;含量测定
中图分类号:R927.2　文献标识码:A 　文章编号:1000-2219(2008)02-0046-02
　　豨莶草为菊科植物豨莶(Siegesbeckia oriental-
i s L .)、腺梗豨莶(S iegesbeckia pubescens Makino)
或毛梗豨莶(S iegesbeck ia glabrescens Makino)的干
燥地上部分 ,具有祛风湿 、利关节 、解毒功效 ,用于风
湿痹痛 、筋骨无力 、腰膝酸软 、四肢麻痹 、半身不遂 、
风疹湿疮等症[ 1] 。其成分为二萜类 、倍半萜类及黄
酮等[ 2] 。主要成分为二萜类 ,包括豨莶苷 、奇壬醇 、
豨莶苷元 、豨莶萜内酯等[ 3] 。豨莶分布于江苏 、安
徽 、陕西 、浙江等地;腺梗豨莶分布于江苏 、安徽 、浙
江 、江西 、湖北等地;毛梗豨莶分布于江苏 、安徽 、浙
江 、江西 、福建等地[ 4] 。可见安徽是豨莶草主要产地
作者简介:杨满琴(1979-),女 ,硕士研究生
通讯作者:刘金旗 , Tel:0551-5169139 , E-mail:liujingqi228@
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1　安徽中医学院药学院
之一。为了比较大别山区 、皖南山区 、沿江地区的豨
莶草中总萜类含量 ,控制该药材质量 ,保证临床用药
效果 ,本研究采用紫外分光光度法测定安徽不同产
地及采收季节豨莶草中总萜类的含量[ 5] ,结果表明
该方法简便 、快速 , 为豨莶草的质量控制提供了
依据。
1　仪器及试药
UV-757CRT 紫外可见分光光度计(上海棱光
仪器公司);超声提取器(AS3120);电子天平(十万
分之一 ,德国赛多利斯公司);索氏提取器;豨莶苷
(自制 ,纯度在 98%以上);豨莶草药材由本院中药
教研室刘守金博士鉴定 。
2　方法与结果
2.1　对照品溶液制备　精密称取豨莶苷对照品
2.20 mg ,置 10 ml容量瓶中 ,加 500 ml/L 乙醇适量 ,
超声 20 min ,加 500 ml/ L乙醇至刻度 ,摇匀 ,得浓度
水回流提取和乙醇回流提取最佳工艺的对比 ,并结
合单因素考察 ,确定葛根素提取最佳工艺 ,使结果更
加科学合理。
综合正交试验直观分析和方差分析结果确定的
葛根素最佳提取工艺为 300 ml/ L 乙醇 , 料液比
14∶1 ,回流提取两次 , 每次 2 h 。通过验证实验表
明 ,其葛根素含量较其他工艺均高 ,因此认为正交试
验优选的工艺水平是科学 、可行的 。
在实验操作中发现 ,乙醇回流提取法不仅提高
葛根素的含量 ,而且降低提取液中固体物含量 。因
此该提取方法使得药物服用量减少而疗效提高成为
可能 。
参考文献:
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(收稿日期:2007-10-16)
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为 0.22 mg/ml的豨莶苷对照品溶液 ,备用 。
2.2　样品溶液制备　精密称取豨莶草药材粉末(过
40目筛)0.5 g ,置索氏提取器中 ,加入 150 ml 30 ～
60℃的石油醚加热回流至提取液无色 ,取出 ,挥干溶
剂 ,置烧瓶中 ,加 600 m l/L 乙醇 50 m l回流 1.5 h ,
过滤 ,滤渣用 600 ml/L 乙醇 30 m l回流 0.5 h ,过
滤 ,合并滤液 ,蒸干 ,用 500 ml/ L 乙醇溶解 ,定容至
100 ml。
2.3　吸收波长测定　取“2.1”项下的对照品溶液 1
ml ,和“2.2”项下的豨莶草醇提液 1 ml分别置于 5
ml容量瓶中 ,加浓硫酸至刻度 ,沸水浴加热 20 min ,
冷却至 10℃, 在 340 ～ 600 nm 波长范围内进行扫
描 ,结果豨莶草醇提液与豨莶苷对照品溶液的吸收
曲线基本一致 , 并且在 385 nm 波长处有最大吸
收值 。
2.4　方法学考察
2.4.1　线性范围与标准曲线制备:精密吸取“2.1”
对照品溶液 0.2 , 0.3 ,0.4 , 0.5 , 0.6 ml ,分别置于 5
ml容量瓶中 ,准确加入 500 ml/ L 乙醇 0.8 , 0.7 ,
0.6 , 0.5 , 0.4 ml ,摇匀 ,加浓硫酸至刻度 ,沸水浴加
热 20 min ,冷却至 10℃,以浓硫酸-500 m l/ L 乙醇
(4∶1)为空白对照 ,在 385 nm 波长处测定吸光度 ,
以吸光度(A)为纵坐标 ,浓度(c)为横坐标 ,绘制标
准曲线。回归方程为:A=0.006 3 c-0.000 4 , r =
0.998 1 ,线性范围为 44 ～ 132 μg/ml。
2.4.2　精密度试验:精密吸取“2.2”项下的豨莶草
提取液 1 m l置 5 m l容量瓶中 ,加浓硫酸至刻度 ,按
“2.4.1”项方法操作 ,对该试样进行 6次重复测定 ,
吸光度分别为 0.536 , 0.536 ,0.538 , 0.537 , 0.536 ,
0.537 ,平均吸光度为 0.537 , RSD为 0.15%,其表
明仪器精密度良好。
2.4.3　重复性实验:吸取“2.2”项下豨莶草提取液
6次 ,每次吸取 1 ml ,分别置 6个 5 ml容量瓶中 ,加
浓硫酸至刻度 ,按“2.4.1”方法操作 ,对该试样进行
测定 ,含量分别为 3.05 , 3.12 , 3.09 , 2.98 , 3.11 ,
3.04 ,RSD为 1.28%,表明实验的重复性良好。
2.4.4　稳定性实验:精密吸取“2.2”项下的豨莶草
提取液 1 m l置 5 m l容量瓶中 ,加浓硫酸至刻度 ,按
“2.4.1”方法操作 ,每隔 10 min对该试样进行测定 ,
吸收度分别为 0.539 , 0.542 ,0.543 , 0.543 , 0.542 ,
0.541 ,0.541 , RSD为 0.25%,表明供试品在 1 h 内
稳定 。
2.4.5　加样回收率测定:精密称取已测知含量的豨
莶草 ,加入对照品 ,按照“ 2.2”项方法配制供试品溶
液 ,按“2.4.1”项下方法操作 ,测得回收率。见表 1。
表 1　加样回收率测定
豨莶草药
材量(g)
取样量
(m g)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%) RSD(%)
0.51 0.023 3 0.020 0 0.043 6 101.32
0.50 0.023 3 0.020 0 0.042 8 97.48
0.51 0.023 3 0.020 0 0.042 5 96.23
0.50 0.023 3 0.026 4 0.049 2 98.11
0.50 0.023 3 0.026 4 0.049 1 97.84 98.24 1.56
0.52 0.023 3 0.026 4 0.049 7 99.93
0.50 0.023 3 0.030 8 0.053 6 98.29
0.51 0.023 3 0.030 8 0.053 2 96.95
0.50 0.023 3 0.030 8 0.053 5 98.04
2.5　含量测定　精密称取 7个不同产地的豨莶草
药材 ,按照“2.2”项方法配制供试品溶液 ,吸取 1 ml ,
置 5 ml容量瓶中 ,按“2.4.1”项下方法操作 ,每个样
品测定两次 ,测得平均吸收度 ,计算含量 。见表 2。
表 2　豨莶草中总萜类含量测定
样品产地 采集时间 品种 含量(%)
岳西姚河 2006—10—02 腺梗豨莶 2.875
本院药植园 2006—09—28 豨莶 2.572
岳西石关 2006—10—02 豨莶 3.243
池州 2006—10—06 豨莶 4.237
饮片厂 2006—10—12 豨莶 3.100
大蜀山 2006—09—29 豨莶 1.636
黄山汤口 2006—10—16 豨莶 0.895
3　讨论
豨莶草中主要有效成分为二萜类化合物 ,以豨
莶苷为对照品对其总萜类化合物进行含量测定 ,未
见文献报道 。用本法来分析安徽各地豨莶草中总萜
化合物的含量 ,为控制该药材质量提供依据 。对影
响显著的因素如硫酸浓度 、水浴时间 、水浴温度进行
了考察 ,结果以 800 m l/L 硫酸 ,沸水浴加热 20 min
为佳。实验结果表明:在实验操作中严格控制反应
条件 ,其结果稳定 ,重现性好 。从测定结果可以看
出 ,安徽地区不同产地的豨莶草中总萜类含量有一
定区别 ,其范围为 0.895%～ 4.237%。长江流域含
量最高 ,说明在安徽长江流域的豨莶草质量较好 ,可
以满足临床需求。
参考文献:
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(收稿日期:2007-04-06)
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