全 文 ：HPLC 法测定人参花中绿原酸的含量
刘松长，罗跃中，李忠英
（湖南化工职业技术学院 湖南 株洲 412004）
摘 要：建立以高效液相色谱法测定人参花中绿原酸含量的方法. 色谱柱为 ODS-C18( 250mm×4. 6mm，5μm)，流
动相为乙腈 - 0. 5%磷酸溶液( 30∶70)，流速为 1. 0mL/ mi n,检测波长为 326nm，柱温为 25℃.绿原酸在 0. 4～4. 0μg范围
内与峰面积积分值呈良好的线性关系( R=0. 9991)；平均回收率为 99. 28%，RSD=1. 46%( n=6) .本法简便、准确、重现性好、
可用于人参花茶的质量控制和评价.
关 键 词：高效液相色谱法；人参花；绿原酸；含量测定
中图分类号：R927.2 文献标识码：A
Determination of Chlorogenic Acid in Ginseng Flower by HPLC
LIU Song- Chang，LUOYue- Zhong ，LI Zong- Ying
（Hunan Chemical Industry Vocation Technology Institute , HuNan Zhuzhou 412004 ）
Abstract: To establish a high- performance liquid chromatography ginseng flower content of chlorogenic acid method. Chromato-
graphic ODS- C18(250mm×4.6mm，5μm)，Mobile phase of acetonitrile - 0.5% phosphoric acid (30:70), flow1.0mL/min, The detection
wavelength was 326nm, The column temperature was 25 ℃ . Chlorogenic acid in the range of 0.4 ~ 4.0μg integral value within the
peak area showed good linear relationship The average recovery was 99.28%, RSD=1.46%(n=6). The method is simple, accurate, repro-
ducible, and can be used for quality control of ginseng tea and its evaluation.
Keywords: HPLC；ginseng flower；chlorogenic acid；content determination
文章编号：1672- 7010（2009）03- 0074- 03
收稿日期： 2009- 9- 14
作者简介： 刘松长(1955- )，男，湖南安化人，高级讲师，主要从事应用化学研究.
人参花是我国名贵药材，含有大量皂甙活性物
质、多种矿物质、微量元素及生物碱类等 [1].具有益气
活血，调节内分泌，促进新陈代谢等功效又能清热消
炎、平肝清火、解毒利咽、降血压等诸多医疗保健功
能，因此被广泛用于高档食用茶 [2].人参花中富含绿
原酸，对有效成分绿原酸作为控制质量的参考依据，
用高效液相色谱 (HPLC)法进行测定，方法简便、准
确、重现性好等特点，可用于人参花的质量控制和评
价.
1 材料
1.1仪器
戴安 summit型高效液相色谱仪：（包括 P680泵，
UV紫外检测器、变色龙工作站）；型超声波振荡器
(深圳市科工达超声设备厂)；电子分析天平(梅特勒).
1.2试药
人参花样品（购于千金药店），绿原酸对照品(供
含量测定用，中国药品生物制品检定所)；甲醇、乙腈
为色谱纯；水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯.
1.3色谱条件
色谱柱：ODS(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙
腈 - 0.5%磷酸溶液 (30∶70)；流速 :1.0mL/min；柱温：
25℃；检测波长:326nm.理论塔板数按绿原酸峰计应
为 11000(>2000).
第 6卷 第 3期
2009年 09月
邵阳学院学报（自然科学版）
Journal of Shaoyang Univers ity( Natural Science Edition )
Vol . 6 No . 3
Sep . 2009
表 1 样品加样回收率试验结果（n=6）
1.4溶液的制备[3]
1.4.1供试品溶液的制备
精密称取人参花试样 1.0g置 100ml 锥形瓶中，
加 50%甲醇 25mL，置于微波炉内，处理 30S，分 5 次
完成. 每隔 6S暂停一次. 冷却后用 50%甲醇定容至
50ml.用 0.45μm微孔滤膜滤过，即得.
1.4.2对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品适量，用 50%甲醇溶解
并配制含绿原酸 20μg/ml的溶液，即得.
2 方法与结果[4]
2.1以对照品样在 200～600nm波长范围内进行波长
扫描，测出绿原酸的最大吸收波长为 326nm（见图
1），以此确定色谱分析的最适波长.
2.2系统适应性试验
精密吸取供试品溶液、对照品溶液按“1.3”项下
色谱条件进样 .结果,供试品与绿原酸对照品在对应
的位置上出现色谱峰，且供试品色谱峰中基线平稳，
分离度良好. 图 1 对照品的紫外光谱扫描色谱详见
图 2和图 3.
2.3线性关系考察
图 2 绿原酸对照品色谱图 图 3 人参花样品色谱图图 1 对照品的紫外光谱扫描
精密吸取绿原酸对照品溶液 2、4、6、8、12μL，
按“1.3”项下色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值
(Y)为纵坐标，进样量(X)为横坐标进行线性回归，得
回归方程为 Y = 513.18x－0.5481，R2=0.9991. 结果
表明, 绿原酸进样量在 0.4～4.0μg范围内与峰面积
积分值呈良好的线性关系.
2.4精密度试验
精密吸取绿原酸对照品溶液，按“1.3”项下色谱
条件重复进样 5次，测定绿原酸峰面积积分值.结果
RSD= 0.8%，表明仪器精密度良好.
2.5稳定性试验
精密吸取供试品溶液，分别在 0、4、8、16、24h 进
样，测定绿原酸峰面积积分值.结果 RSD=1.2 %，表明
供试品溶液在 24h内具有良好的稳定性.
2.6重现性试验
取同一批 样品 5 份,按“1.3.1 ”项下方法制成供
试品溶液，每份样品连续进样 2 次 , 测定 . 结果
RSD=1.46 %，表明方法重现性良好.
2.7加样回收率试验
精密称取已知绿原酸含量的样品，共 6 份，分别
加入 3 种不同量的绿原酸对照品溶液，按“1.3.1”项
下方法分别制备供试品溶液，并按“1.3”项下色谱条
刘松长，罗跃中，李忠英：HPLC 法测定人参花中绿原酸的含量第 3 期 75
表 2 样品含量测定结果
件测定绿原酸的含量，计算回收率.结果详见表 1.
2.8样品含量测定
取不同批号的 3 份样品，按“1.3.1”项下方法制备
供试品溶液，按“1.3”项下色谱条件测定绿原酸的含
量.结果详见表 2.
3 讨论
（1）吸收波长的确定 通过紫外光谱在 200～
600nm波长范围内进行波长扫描，结果在 326.3nm
处有最大吸收，且在此波长处分离效果较好，理论塔
板数按绿原酸峰计应为 11000(>5000).故选择作为检
测波长为 326nm.
（2）在实验过程中比较了 40%，50%，60%，70%，
80%等不同浓度甲醇溶液为提取剂对绿原酸的提取
率进行了考察，结果 50%甲醇溶液微波处理 30S，分
5次完成对绿原酸提取率最高.
（3）根据三批样品的含量测定结果，本品按干燥
品计算，含绿原酸(C16H18O9)不少于 0.36%.
参考文献：
［1］郭颖，侯玉兵. 人参花质量标准的研究［J］.人参研究,
2004(4):41.
［2］张萍, 王金东,肖新月等.人参化学成分分析方法的研
究进展［J］.中草药，2004(12):1429- 1430.
［3］周锐. HPLC 法测定结石通茶中绿原酸的含量［J］.中
国药房,2007,18(27):2128- 2129.
［4］方传代 . 反相高效液相色谱法测定金银花中绿原酸
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邵阳学院学报（自然科学版） 第 6 卷76