全 文 :19 9年第 6期
用科学合理轮换施用除草剂 , 可有效地控制杂
草危害 。
3
.
5
.
1 播种前土壤封闭处理
可选用禾利 (环草特 )每公顷施用 73 . 5% 乐
利乳油 4 9 50 一 6 以x、记 兑水 40 kg , 或选用 7 2%
都尔乳油 ,每公顷 2 250 一 2 7以 b l l ,兑水 4 Ok g ,进
行土壤封闭处理 。 对于以野燕麦杂草为主的地
块 ,可选用 40 % 燕麦畏乳油 3 (拟〕一 3 45 伍记 。
3
.
5
.
2 播后苗前土壤处理
在甜菜播种后 , 出苗前每公顷用 72 %都尔
乳油 1 80 一 2 中以、记 兑水 15 一 2 5 kg , 进行土表
处理 ,防除一年生禾本科杂草效果显著 , 或选用
丁草胺在甜菜播后苗前处理 , 每公顷用 印% 丁
草胺乳油 2 250 一 3 仪乃 1习, 兑水 50k g , 进行土表
处理。
3
.
5
.
3 苗后茎叶处理
甜菜田双子叶杂草以黎科 、 萝科为主的地
块 (条 田 ) 可选用甜菜宁 (苯草敌 ) 在杂草 2 一 4
叶 期 , 每 公顷 用 13 % 甜 菜宁乳油 4 950 一 6
以洲为u , 兑水 15 一 30 kg , 进行茎叶处理 , 防除效果
明显 。 若甜菜田杂草以单子叶杂草为主可选用
威霜每公 顷 1 8 0汤111 ,兑水 书攻g 进行茎叶处理 。
试验采用威霜 + 甜安宁混合液防除效果更佳 。
即每公顷威霜 1 2〕玉祖 + 甜安宁 6 (X) 0I l l } 兑水
40 k g 进行茎叶处理 。
重瓣榆叶梅组织培养及快速繁殖
石 河子园林研究所 ( 8 32 以洲〕)文国辉 任维英 李建新 王利
摘要 本文通过对花灌木重瓣榆叶梅利用培养植物组织进行快速繁 殖的研究和应
用 , 证明在 M S 培养基中加入 6 一 B A 21 19八记 、 NA A 0 . nlI g l/ 讨 ,能促进茎段腋芽萌发 , 萌发
一率 4 % ; 继代转移 于相同培养基中 , 加入 6 一 I认 0 . 2 一 0 . 51 唱八证几认 A D . l m g八记 ,增殖 系 -
数 10 ; 利用速蘸生根粉 A BT 0 . s m g / 间 , 诱导抽枝苗生根 , 生根率 10 % ;在土 + 沙 ( 1 : l)
的基质 中 ,移栽成活率达 75 % 。
关键词 偷叶梅 组织 培养基 增殖系数
1 试验材料和方法 5) 、将抽枝苗进行生根培养 。
1
.
1 供试材料 6) 、 对以上各阶段种植 、 转移的培养基分
剪取在温室内的 2 年生重瓣榆叶梅新抽枝 装人三角瓶内 , 用 Ik g / c n l ’ 的压力热压 巧 分钟
条 , 去叶及叶柄 ,截为具 1个腋芽的茎段 。 灭菌 。
!
.
2 方法 7) 、 上述培养基的蔗糖均为 3% , 琼脂为
l )
、 将处殖体 (具腋芽茎段 )用洗衣粉溶液 0 . 6% , PH 值为 6 . 6 , 室内温度为 18 一 28 ℃ , 光照
洗净 , 先倒人 75 % 洒清中 , 再倾人 0 . 1% H g :(l 2 强度 l 以叉〕一 巧 0 lux ,光照时间 12 小时 。
溶液中灭菌 ,用无菌水冲洗干净 , 置于无菌培养 2 结果与分析
皿中待用 。 在接种培养前 , 接种茎段芽 (包括顶芽 ) 使
2)
、将灭菌的材料用滤纸吸去表面水分 , 种 用不同种类 、浓度 、时间的消毒剂消毒外殖体会
植于灭菌后的培养基中开始离体培养 。 、 产生不同的结果。
3)
、 接种外殖体萌发后移人继代培养琴 中 , 从表 l 可看出 : l 、 2 、 4 、 5 、 9 、 10 号有不同程
迅速扩大繁殖 。 度的污染 , 但未失活 。 3 号失活并污染 。 6 、 7 号全
4)
、 再使分化芽抽枝为壮苗 、 部失活 , 无污染 。 8号无污染 , 未失活 , 表现适
9
石河子科技
表 l外殖体不同灭菌方法的比较
序号 外殖体灭菌方法 失活率 % 污染率 %
o的茎段自来水冲洗后 , 用 0 . 1叹 I于薛12溶液浸泡 6分钟 , 无菌水冲洗 4遍
茎段自来水冲洗后 , 用。 . 1% I{解 l :溶液浸泡 8分钟 , 无菌水冲洗 4遍
茎段自来水冲洗后 , 用 0 . 1铸 H郊 l藉液浸泡 10分钟 , 无菌水冲洗 4遍
茎段用 20 叹洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 0 . 1铸 H药 l
溶液浸 8分钟 , 无菌水冲洗4遍
茎段用20 % 洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 8叹 N。
CI O
.
5H 0溶液浸 巧分钟 , 无菌水冲洗4遍
茎段用 20 % 洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 75 % 酒精浸 5
分钟 、 0 . 1% H薛 l藉液浸 8分钟 、无菌水冲4遍
茎段用 20 % 洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 75 % 酒精浸 1
分钟 、 0 . 1% H薛l藉液浸 8分钟 、无菌水冲4遍
茎段用 20 % 洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 75 % 酒精迅
速漂洗 、 0 . 1% H薛1藉液浸 8分钟 、无菌水冲 4遍
茎段用 20 % 洗衣粉溶液浸泡 5分钟 , 自来水冲5分钟 , 再用 75 % 酒精迅
速漂洗 、 无菌水冲 4遍
茎段 自来冲洗后 , 75 % 酒精迅速漂洗 , 0 . 1% H醉 l :溶液浸泡 8分钟 , 无
菌水冲4遍
1o ! o
1o
1o
! o
宜 。
所 以将茎段用 20 % 洗衣粉溶液浸泡 5 分
钟 , 自来水冲 5 分钟 , 75 % 洒精迅速漂洗 , 0 . 1%
H蔡 12溶液浸泡 8 分钟 , 无菌水冲 4 遍 , 为适宜
的灭菌方法 。
2
. 】 激素种类及浓度对培养物的影响
2
.
1
.
1 激素种类对培养物的影响
在接种 、 继代培养中 , 在适宜的浓度条件
下 ,采用细胞分裂素 6 一 B A 、 K T , 生长素 NA 、 卜
A人 、 BI A 的不同重复组合 , 试验重复 3 次 , 其反
应 为 :
1)
、
6 一 B人 与 N AA 组合用于接种过程中 ,
外殖体正常萌发 , 叶色浓绿 , 而与 认入组合 , 接
种芽不萌发 。
2 )
、
6 一 B A 与 N人A 组合用 于继代培养过
程中 , 分化芽分化生长停滞 : 而 6 一 BA 与 IA A
组合 ,培养体旺盛分化生长 , 叶色浓绿 。
3)
、
6 一 B A 与 BI A 组合用于接种 、 继化培
养中 , 使基部愈伤组织呈瘤状 , 叶黄 、 影响液芽
萌发及分化芽分化 。
4)
、 细胞分裂素使用 K T 在接种 、 继代培养
中 , 只使萌发芽和分化芽伸出 l 一 2 个叶片 , 畸
形增大 , 无分化生长趋势 , 生长 、 发育畸形发
展 。
2
.
1
.
2 激素浓度对培养物的影响
将培养物在加入同一种类激素 , 而激素浓
度不同的 入侣 培养基中进行接种 、 继代培养 , 其
各项数据结果见表 2 、 表 3c
同时各接种芽萌发表现如下 :
l 、 、 NAA 0 . 0 5 ,1 , g / : n一与 4 种 6 一 B A 激素浓
度进行组合 , 萌发的腋芽全部分化 , 可达 8 个
芽 ,但萌发率低 , 叶卷曲 、淡黄 。
2 )
、
NAA 0
.
is ng /
r记 与 4 种 6 一 B A 激素的
浓度进行组合 , 萌发后近一半芽分化并抽枝 ,叶
199年第 6 期
表 2 不同激素浓度对接种外殖体萌发率的影响
6
一
A B( m g /nl I )0
.
5 12 3
N A人(。岁 ml )供试数 萌芽数 萌芽率 %供试数 萌芽数萌芽率 %供试数 萌芽数 萌芽率 %供试数萌芽数 萌芽率 %
0
.
02 2 17 4 4
1
.
0 10 2 20 0 ! 10 !
(注 : 试验重复三次 ,每次供试数相同 , 萌芽数为三次平均值 )
表 3 不同激素浓度对继代培养物分化抽枝的影响
6 一 BA ( gm /
11 1
1) N A (A m g /
n l l ) 浓度比值 分化芽数 抽枝数 抽枝率 (% ) 增殖系数
0
.
5 0
.
3 1
.
7 5 飞 曰1 气
83067510,
730
.
5
0
.
5 0
.
05
0
.
2
0
.
2
5
】O
0
.
4
,
12
巧
3
8
0
.
2 0
.
0 5
0
.
1 0
.
0 5 2 2 0 0 2
(增殖系数以数代转移瓶数的平均值计算 ,试验重复 3 次 )
色正常 。 大高度 6 . 5 0 11 , 最小高度 I cl n , 抽枝苗多数处最
3 )
、
N从 x, n g / : : 11与 4 种 6 一 B A 激素浓度 大高度中 。
进行组合 ,萌发后只有 l 个芽分化 , 叶浓绿 。 3) 、 0 . 5 与 0 . 05 中 , 培养物分化极多 , 无抽
4)
、 在 6 一 BA 去n g l/ il 、 N A A 0 . 1 1州 il 激素 枝 , 叶窄黄 , 以至继代转移不能使芽块分离过
浓度中 , 萌发的腋芽均分化 5 一 6 个 , 伴有少量 多 ,所以转移系数下降 。
抽枝 , 分化芽粗壮 ,叶浓绿 , 萌发状况较好 , 同时 4) 、 0 . 2 与 0 . 5 中 , 培养物基部分化 , 抽枝
萌发率最高 。 苗腋处强烈萌发 , 枝条叶黄茎细 , 平均高度
所以选用 M S + 6 一 B人 2川g / : l d 十 N从 0 . 1 ,二 g / 助 : 1 1 。
n U为初代培养的最佳配方 5) 、 0 . 2 与 0 . ! 中 , 培养物产生的分化芽多
同时培养物表现如 卜: 数抽枝 , 叶色绿 , 最大高度 4C n l , 最小高度 10 1飞 ,
! )
、
6 一 BA
一与 NA 一人 的浓度为 0 . 5 与 0 . 3 平均高度 2 . c5 n l , 并且苗高多数处平均高度 , 抽
时 , 培养物极缓慢生 长 , 抽枝高度 0 . 加 n 、 , 部分 枝整齐 , 苗粗壮 。
芽培养中变褐死亡 。 6) 、 0 . 2 与 0 . 05 中 , 抽枝苗高度较短 , 为
2)
、
0
.
5 与 0 . 1中 , 士音养物的 分化抽枝苗最 O . .5( n 1 ,无生 长变化 ,叶色绿 。
1 1
石河子科技
7 )
、
0
.
1与 0 .5 0中 , 培养物少量分化 , 无生
长 ,后保持此状况半个月 , 开始叶黄脱落 。
所以 , 采用 MST + 6 一 BA 0 . 2 一 0 . s mg / 耐 +
N从 o , lgm / n il 配方适合培养物继代培养 。
2
.
2 外殖体取材不同位置对萌发率的影响
在灭菌处理前 , 将供试枝条按顶部 、 中部 、
下部三个不同部位剪取带 l 个腋芽 (包括顶芽 )
的茎段 , 按一定供试数植于接种培养基中 ( M S
培养基 、 6 一 BA Zgm / n习、 NA 0 . h gn l/ 记 ) ,其萌发
状况结果见表四 。
表 4 枝条不同部位上茎段芽的萌发率表
供试数 萌发数 萌发率%
顶部 25 11 4
中部
下部 80 2 3
(注 : 以上为五次重复试验的平均结果 )
以上结 果说明采取枝条顶端部位 比中下
部腋芽萌发率高 。
剪取 继代培养中高度 处 m 以上的抽枝 壮
苗 , 将基部快速蘸激素溶液 , 直插人无激素的
M S 培养基中 , 处理抽枝苗的激素种类 、 浓度 、 消
毒方式不同 ,试管苗生根反应不同 。
同时表现如下 :
1号根粗壮 , 发根不整齐 , 有愈伤组织块 ,
有的只伸出根尖 , 叶黄 、 卷曲 ,甚至脱落。
2 号根细 ,长度 3 一 奄m ,茎叶正常 。
4 号 、 5号为激素配制后进行高压消毒 , 至
使活性下降 , 生根率降低 。 4 号根粗壮 , 生根整
齐 ,茎叶正常 。 5 号生根不整齐 ,茎叶正常 。
6 号 、 7 号为配制的器皿及激素均未消毒 ,
抽枝苗速蘸后 , 出根迅速 , 但刚出现根尖 , 由于
受菌感染 ,根系停止生长 ,这种试管苗移栽成活
率较低 。 6 号苗状况同 1号 , 7 号苗状况同 2
号 。
3 号配制激素的器皿消毒 , 为根粗壮 , 发根
整齐 ,根长 3 一 c7 m ,枝渐粗壮 , 叶色绿 。
所以将试管苗速蘸 0 . smg / 时 浓度的 AB T
溶液 , 可使各方面指标达最佳状态 。
将生根试管苗去除封 口 , 带瓶置于温室 自
然光照充足的地方炼苗 , 5 天后 , 小亡地提出洗
表 5 激素各种类 、 浓度 、配制 、消毒方式对试管苗的生根反应
项 日
序号 拐众索
种类
激素浓度
( n
飞g /司 )
配制
方式
消 毒
力~ 式
供试数
(株 ) 生根数
生根率 生根 高峰期
价 ( 天 )
根数
( 条 )
污染率
件
1
.
0
0
.
5
0
.
5
0
.
5
0
.
5
0
.
5
0
.
5
内配 器
I一11护肖毒
激素 未消毒
内 配 器
Il xl穿肖。彭
激素未 消 ,石
内配 器
I一It孚肖毒
激素未消 ;诊
外配 器 J一1护肖肖激 素护肖 ,!J
外配 器 1IIL呀肖
,石
激 东 f肖 ,匀
外配 器 IU[术护肖
子七
激 东未才肖 ,石
外配 器 ] 111未下i
`
j
`七
激 水 未 矛肖 ,打
r.`
`ū胜r、`卜门人qlAJATTr.\I
199 年第 6期
去根部琼脂 ,植于不同基质的育苗箱中 。
选择不同基质 , 试管苗成活率不同 。
表 6 不同基质试管苗成活率的影响
供试数
(株 )
成活数
(株 )
成活率
(% )
序号
1 5 0 0 0
节间细长 。
2) 稀土浓度不同 , 培育的生根苗状况不
同。
稀土浓度为 o . 02 i gn 八ul 一 0 . 03 gm /耐 时 , 枝
梢较对照长 , 叶色较对照浓绿 , 木质化程度提
高 。 发根数的多少并未影响移栽成活率 , 稀土
浓度 0 . 以 r飞m/ l 时枝条细弱 。
所 以 将稀 土使用在 继 代培养中 , 浓度
O
·
03 m g /耐 一 0 . 以 r飞八记 ; 使用在生根培养中 , 浓
度 O · 02 m g / n让一 Q. 03 mg / 耐 对试管苗的质量有
所改善 。
三十烷醇
当 室 温 25 一 28 ℃ 时 , 加 人 三 十烷醇
0
.
03 m g / inl
, 结果与对照相同 ; 加人 0 . 以 n毛 / 耐
三十烷醇 , 分化生长状况与对照相 比差距不大 ,
但抽枝苗嫩弱 , 细长 。 加人 0 . 05 m g / 耐 三十烷
醇 ,抽枝苗节间长 ,叶片小 , 茎嫩 , 近玻璃苗 。
当室温 2 1一 25 ℃时 ,加人三十烷醇效果均不
显著 。
当室温 18 一 20 ℃时 , 加人 0 . 以口嗯 / 而三十
烷醇 , 分化芽块与对照 (M S + 6 一 B A 0 . 2n lg /
闻 + 认 A O . 】gm /时 中未加三十烷醇 )相 比 ,分化
数量增强 , 同时抽枝粗壮 , 平均高度 电m , 叶片
浓绿 。 浓度为 0 . 05 1飞 / inl 时 ,枝条开始显弱 , 叶
色变淡 。
所以在低温 18 一 2() ℃ 时 , 加人 0 . 汉m g / 耐
三十烷醇 ,可增强分化 ,扶壮试管苗 。 在室温高
时不适于加人三 十烷 醇 。 所 以不 同季节 , 在
18 一 28 ℃环境温度波动下 , 可在培养基中调整
三十烷醇的存在和数量 。
从以下试验可看出 : 重瓣偷叶梅虽然接种
萌发率很低 , 仅 4 % , 但一旦转移培养 , 增殖系
数非常高 。 这在当前众多木本植物组培研究的
结果中比较增殖系数 , 重瓣榆叶梅的增殖系数
是非常高的 , 因此它不失为一种很好的组织培
养材料 。 我们通过使用添加剂以利培育壮苗 ,
并得以实现 , 同时我们打破常规的组培生根法 ,
不是将激素力1人培养基中生根培养 , 而是先几
激素处理无根试管苗 , 再在无激素培养基中培
养 ,生根率高 , 生根期短 , 生根苗粗壮 ,这在组培
生根技术 _ [ 是一种创新 。 今后我们还应加强生
产扩繁中一系列问题的研究 。
O4lO,
ll伪」XO(OC
4 1的 7 5 7 5
(注 ; 30天后对成活率观测 。 墓质为 1号 : 炉渣或珍
珠岩 ; 2 号 : 炉渣 十 沙 ( 3 : l) ; 3 号 : 下 层炉渣 、 上 层土
+ 沙 ; 4 号 :土 + 沙 ( l : l ) )
由表可知 , 使用土 十 沙 ( l : l) 作为移栽基质
成活率较高 。
选择生根培养 巧 天后 , 高度 cZ m 以上 , 木
质化程度高的试管苗 , 成活率较高 。 并且根长
I c m 以下 , 成活率很低 , l 一 3cm 成活率较高 ,
3e m 以上成活率则下降 。
适宜的温度 、 光照 、 湿度 。
温度过高不宜移栽 , 适宜 的温度为 21 士
2℃ 。 清洗试管苗时叶面不能浸水 ,栽入 20 % 湿
度的基质中 , 栽后不宜立即浇水 , 罩上塑料布 ,
置于散射光下 , 待基质表层土稍干时 , 再少量浇
水 。
2
.
3 不 同添加 剂种类及 浓度对 培育壮 芽苗的
影响
稀土
将稀土按不同浓度所需重量称量后 , 充分
溶解加入定容前的培养基中 ,
)] 不同浓度的添加剂对继代培养的分化
芽分化生长的影响 。
在 继 代 培 养 基 中 加 人 0 . 03 i n g / n d -
0
. 以 m g / ml 浓度的稀土 , 分化苗多 , l 个芽块可
达 16 苗 , 3 一 阮m 高 , 较对照 你丁S + 6 一 B A
O
·
21 19 l/ 丁d + X
一人A 0 . 1工吧 / il ) 苗茎明显增粗 , 而
且节间短 , 叶舒展浓绿密集 : .
加人 0 . 0 21 19 / n u 浓度的称土 , 分化苗无不
同反应
加人 0 . 0 5 , 1 19八 1 , ]浓度的稀土 , 抽枝苗较嫩 ,