全 文 ：伤 DNA, 使染色体断裂 , 形成基因重排 , 激活癌基因而致
癌。
5　结束语
砷剂在临床中的应用是一个相当矛盾 、相当有争议的
问题。砷制剂由于其毒性大 , 在临床上多以外用为主。近
年来 AS203注射液在临床上治疗白血病(尤其是急性早幼粒
细胞白血病 , 即 M 3型或 APL)中取得了突出成绩。但我们
对砷在体内的代谢方式 、过程 、与其它物质之间的相互作
用 、量效关系等仍然了解不够 ,使得临床活动较盲目 , 导致
砷剂毒副作用难以控制。在以后的研究工作中 , 我们应进
一步开展砷剂的新剂型及其药代动力学的研究 , 摸索合适
的给药途径 、剂量 、配伍或联合用药等以减小砷剂的毒副作
用 、提高其疗效。以便砷剂能更好地为人类的健康作贡献。
参考文献
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西医结合杂志 , 1984:(1):19.
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中西医结合杂志 , 1992:(3):170.
[ 3] 　张鹏等。 AS2O 3治疗急性早幼粒细胞白血病七所总结一附
142例分析 [ J] 。中华血液学杂志 , 2000:21(2):67.
[ 4] 　王振义 .开展砷剂治疗白血病的临床和机制研究 [ J] 。中华
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究[ J] 。中华血液学杂志 , 1997:18(12):623.
(下转封底)
收稿日期:2005 - 03 - 17
实验
研究　　HPLC法测定三棵针中盐酸小檗碱的含量
杨朝莲 1 ,冯　华 2 ,张运杰 1 ,武孔云 2 , 靳风云 2 , 梁光义 2
(1.贵州省六盘水市药检所 , 贵州水城　553000;2.贵阳中医学院 ,贵州贵阳　550002)
　　内容提要:目的:为了控制三棵针药材质量 ,采用高效液相色谱方法测定药材中盐酸小檗碱的含量。 方法:色谱柱 Di-
amosil7M(钻石)HPLCC18(250×4. 6mm, 5μm),以乙腈 -0. 03mo l /m l磷酸二氢钾(25:75)为流动相 , 流速 1.0m l.m in- 1 , 检测
波长 345nm。结果:盐酸小檗碱在 0. 0443 -0.151μg范围内 ,线性关系良好 , r=0.9996, 平均加样回收率为 100. 97%　RSD
=0. 77%。结论:本法简便 , 快速 ,准确 , 适用于药品生产厂家及 GAP药材基地对三棵针药材的质量监控。
关键词:盐酸小檗碱;高效液相色谱法;三棵针
中图分类号:R284.1　文献标识码:B　文章编号:1002 - 1108(2005)03 - 0056 - 01
　　贵州为三棵针(Rad ix Bcrbo ridis)药材主产地 ,分布广 ,
产量大。但由于三棵针植物中所含盐酸小檗碱依物种 、产
地 、部位 、采集时间等因素的不同其含量差别较大。 本文
拟反相高效液相法 (R -HPLC)测定三棵针植物茎中盐酸
小檗碱的含量 , 并以此对其药用价值进行考察和评估 , 为
科学合理地开发利用贵州三棵针药用植物资源提供参考
依据。
1　仪器与材料
1. 1　仪器
W aters1525　高效液相色谱仪 , W ate rs2487紫外检测
器。
1. 2　药材和试剂
三棵针药材购于贵阳花果园药材市场 , 经冯华鉴定三
颗针为小蘖科植物三棵针 (berberY s pruinosa F r)的干燥根
茎 , 试剂乙腈为色谱纯 , 其它为分析纯。盐酸小檗碱由中
国生物制品检定所提供。
1. 3　色谱条件
色谱柱:D iam osil7M (钻石 )HPLCG 18 (250 ×4.6mm ,
5μm);流动相:乙腈— 0. 03m o l /m l磷酸二氢钾 (25:75);流
速 1. 0m l.m in- 1;检测波长 345nm;柱温:20℃。
(图 1— 2)
57
第 27卷　第 3期
2005年 7月　 　　　　　　　　　　　　
贵阳中医学院学报
JGCTCM
　　　　　　　　　　　No.3　Vo. 27
Ju ly　2005
DOI牶牨牥牣牨牰牭牳牳牤j牣cnki牣issn牨牥牥牪牠牨牨牥牳牣牪牥牥牭牣牥牫牣牥牬牪
2　方法与结果
2. 1　对照品溶液的制备 [ 1]
精密称取在 100℃干燥 5小时的盐酸小檗碱对照品约
27.71mg,置 250m l烧杯中 , 加沸水约 150m1使溶解 , 稍冷
后加入稀盐酸 3m l,搅匀 , 放冷 , 转移至 250m l量瓶中 , 加水
至刻度 , 摇匀 ,精密量取 2m l, 置 25m l量瓶中 , 用流动相稀
释至刻度 , 摇匀 ,即得(每 1m l含盐酸小檗碱 8.86μg)。
2. 2　标准曲线的绘制
精密吸取盐酸小檗碱 5.0μl, 7. 0μl, 11. 0μl, 13. 0μl,
17. 0μl注入液相色谱仪 ,按上述色谱条件下 ,进样测定 , 以
峰面积(Y)为纵坐标 , 取样的量 μg为横坐标。测得直线回
归方程 Y=3937.1X+116445, 相关系数:r=0. 9996, 结果
表明:盐酸小檗碱在 0. 0443 - 0.151μg之间呈良好线性关
系。
2. 3　供试品溶液的制备 [ 3]
精密称取 0. 16g三棵针药材置于 50m l磨口的三角瓶
中 , 加甲醇 20m l,称重 , 浸泡 12小时 ,超声处 60分钟 , 用甲
醇补足重量 , 过滤 , 取续滤液 10m l蒸干 , 用流动相定容在
25m l容量瓶中备用。
2. 4　精密度试验
精密吸取对照品溶液 10μg注入液相色谱仪 , 测定峰
面积 , 重复 6次 ,盐酸小檗碱峰面积 RSD=0.80%
2. 5　重复性实验
取同一批药材 , 按样品制各项处理 5份样品盐酸小檗
碱的含量的平均值为 0.36%, RSD =2.6%, 表明本试验方
法重复性良好。
2. 6　稳定性实验
取同一批药材按供试品的制备方法制备测定一份 , 分
别于 0、1、2、4、 8h注入液相色谱仪中测定 , 盐酸小檗碱峰面
积的相对标准偏差 RSD=2.6%, 稳定性良好。
2. 7　加样回收率试验
精密称取 0. 08g药材 9份 , 分别按 80%、 100%、 120%
加入盐酸小檗碱对照品 ,按 2. 1项下方法制备 ,并按上述色
谱条件测定 , 计算回收率 ,结果见表 1。
　表 1 加样回收率测定
药材盐酸小檗碱含量 m g 加样量 /mg 回收量 /m g 回收率% x-% RSD%
0. 248 0. 211 0. 451 95.21
0. 249 0. 211 0. 450 95.26 96. 37 1. 24
0. 247 0. 211 0. 453 97.63
0. 288 0. 261 0. 551 100.76
0. 285 0. 261 0. 552 100.30 101. 77 0. 87
0. 282 0. 261 0. 549 100.31
0. 289 0. 346 0. 651 104.62
0. 290 0. 346 0. 653 104.91 104. 71 0. 20
0. 292 0. 346 0. 654 104.61
2. 8　样品含量测定
取三批药材 , 按上述样品制备项下操作 , 结果见表 2。
　表 2三批药材盐酸小檗碱含量测定结果(n=3)%
药材批号 含量% x- RSD%
200501 0. 36 0. 37 0.35 0. 36 2. 78
200502 0. 37 0. 38 0.36 0. 37 2. 70
200503 0. 35 0. 37 0.36 0. 36 2. 77
3　讨论
3. 1　三棵针药材中主要含盐酸小檗碱 , 药根碱 ,巴马亭等
成分 , 文献报道 [ 2]测定三棵针中盐酸小檗碱的含量所采用
的方法有紫外 , 薄层扫描法 , 容量法等。 但以上方法误差
大 , 经查阅资料 [ 3]及实验后 , 采用高效液相色谱法测定盐
酸小檗碱的含量 , 并对测定方法进行方法学考查。色谱条
件如正文所述 , 盐酸小檗碱与其它组分分离度好 , 重现性
好 , 精密度好 ,回收率高 , 本方法可作为三棵针药材质量控
制指标。
3. 2　本实验结果为药品生产厂家及三棵针 GAP药材基地
对三棵针药材质量监控提供了参考。
参考文献
[ 1] 　中华人民共和国 2000版一部药典:525.
[ 2] 　王勤 .马志刚等甘肃产三棵针植物中生物碱测定及分布状
况研究 ,分析测试学报 2004, 23(3):54 - 57.
[ 3] 　李亢宗 ,韩跃武 .高效液相色谱测定三棵针中生物碱的含
量,兰州医学院学报 1994, 20(1):1.
58 　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵阳中医学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　第 27卷