全 文 :中国医药导报 2014 年 2月第 11卷第 6期 ·药品检验·
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 11 No. 6 February 2014
野葛 Pueraria lobata (Willd.)Ohwi 为豆科葛属植
物,茎叶可作饲料,根和花可入药。 野葛的干燥块根为
常见中药,具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻、
通经活络、解酒毒的功能 [1]。 野葛根中富含的黄酮类
成分具有多种药理作用[2-5],而葛粉又是很好的保健食
品,畅销国内外[6-9]。野葛从根、藤到花、叶在工业、农业、
医药方面都有很高的研究利用价值。 渝东北山区野
葛资源丰富[10-11],但从未被开发利用,因此本研究以渝
东北山区的开县城口巫溪交界地带产野葛为样本,采
用组织捣碎水沉淀法和 UV 法测定一年中每月采收
野葛根中葛粉和总黄酮含量,对含量动态变化进行分
析,以期确定最佳采收时期,为该区野葛根的开发利
用提供科学依据。
渝东北山区野葛中葛粉与总黄酮含量动态变化研究
谭小燕 1 李达斌 2 林中翔 1 黄 静 3 贾 晗 1 王立青 1
1.重庆三峡医药高等专科学校,重庆 404020;2.重庆市巫溪县人民医院,重庆 405800;
3.四川大学华西药学院,四川成都 610041
[摘要] 目的 通过对渝东北山区野葛中葛粉和总黄酮含量测定,总结其成分在 1 年中随季节的变化规律,从而确
定每年最佳采收时间。 方法 2011 年 6 月~2012 年 5 月每月定期采集渝东北山区产野葛样本, 切成 2~3 mm 薄
片,自然干燥。 通过文献调研,方法稳定性考察确定采用组织捣碎水沉淀法测定野葛葛粉含量;采用 UV 紫外分
光光度法,以葛根素为对照品,在波长 250 nm 处测定样品溶液吸收度,计算出野葛总黄酮含量,从而得到渝东北
山区产野葛在 1 年里葛粉和总黄酮含量随季节的变化规律。 结果 经实验测定, 渝东北山区野葛葛粉和总黄酮
含量全年变化趋势基本一致,变化规律为葛粉含量在 8.9%~25.3%之间,从 11 月~次年 2 月最高,3、8、9、10 月其
次,4~7 月最低; 总黄酮含量在 2.13%~11.6%之间,11 月~次年 3 月高于 9%,8~10 月约 6%,4~7 月较低在 2%左
右。 结论 渝东北山区野葛最佳采集时间在 11 月~次年 3月。
[关键词] 野葛;葛粉;总黄酮;含量测定
[中图分类号] R629 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2014)02(c)-0087-03
Study on the regulation of starch and total flavone dynamic content in
Pueraria lobata (Willd.) Ohwi from northeast mountain wild of Chongqing
TAN Xiaoyan1 LI Dabin2 LIN Zhongxiang1 HUANG Jing3 JIA Han1 WANG Liqing1
1.Chongqing Three Gorges Medical College, Chongqing 404020, China; 2.Wuxi County Peoples Hospital, Chongqing
405800, China; 3.West China School of Pharmacy, Sichuan University, Sichuan Province, Chengdu 610041, China
[Abstract] Objective To provide scientific basis for determining the optimum harvest time, by assaying and summary-
ing the content of starch and total flavone in Pueraria lobata (Willd.) Ohwi from northeast mountain wild of Chongqing
and the change regulation with the season in a year. Methods Pueraria lobata samples were collected every month from
June 2011 to May 2012 in northeast of Chongqing area on schedule. Samples were sliced into 2-3 mm, and dried at
room temperature. According to literature, tissue smash and water sediment method was used to determine the content
of Pueraria starch. The total concentration of flavone in Pueraria lobata samples could be evaluated by UV-vis spec-
trum at 250 nm, using puerarin as controls, which can infer the change regulation of starch and flavone in Pueraria lo-
bata samples along with the alternating of seasons. Results The experimental determination showed that the content of
starch and flavone in Pueraria lobata remained a constant trend throughout a year. Generally, starch maintained be-
tween 8.9%-25.3%, and kept most high from November to February, then March, August, September and October. The
lowest content was from April to July. Flavone went similarity, which kept between 2.13%-11.6%. It went higher than
9% from November to March, remained 6% during August and October and lower than 2% from April to July. Conclu-
sion The best time for collecting Pueraria lobata (Willd.) Ohwi from northeast mountain wild of Chongqing should be
from November to March next year.
[Key words] Pueraria lobata (Willd.) Ohwi; Starch; Total flavone; Determination
[基金项目] 重庆市教委科学技术研究项目(编号 KJ111803)。
[作者简介] 谭小燕(1984.5-),女,重庆人,硕士研究生;研
究方向:中药材质量评价与开发利用。
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·药品检验· 中国医药导报 2014 年 2 月第 11 卷第 6 期
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 11 No. 6 February 2014
1 材料与方法
1.1 材料
METTLER TOLEDO PL1501-S 电子秤 (梅特勒-
托利多中国地区)、电热恒温鼓风干燥箱 DHG-9140A
型(上海一恒科技有限公司)、高速中药粉碎机 HX-
500A 型(浙江省永康市溪岸五金药具厂)、低速自动
离心机 LD25-2、U-2800 分光光度计(UV2300)、特殊
减压抽滤装置(四川大学华西药学院天然药物系自主
设计)、水、95%乙醇(分析纯)、葛根素对照品(批号:
110753-200912,中国药品生物制品检定所)。
试验样本采自重庆开县谭家乡。从 2011年 6月~
2012 年 5 月,每月 9 日(或前后 2 日)选取生长年限
一致,粗细相近的野葛根采挖,然后洗净泥沙,切成
2~3 mm薄片,自然干燥。
1.2 方法
文献报道一般利用组织捣碎水沉淀法 [12]或酶解-
蒽酮比色法 [13]测定葛根中葛粉含量,而且酶解-蒽酮
比色法是最常用的淀粉含量测定方法。但因本实验目
的在于通过测定野葛中葛粉含量,从而确定野葛的最
佳采集时间,再用于提取葛粉的工艺中,为与提取工
艺相结合,故选取组织捣碎水沉淀法来测定葛粉含量。
野葛中总黄酮的含量测定采用 UV分光光度法[14-20]。
2 结果
2.1 野葛葛粉含量测定
将 12份试验样本各称取 1 kg,粉碎后过 40目筛,
将药材用 1∶8 倍量冷水(W/V)浸泡 1 h,然后物理搅
拌,让葛粉充分混入水液中,用纱布过滤,将滤渣加入
7 倍量水,搅拌均匀后再过滤,滤渣再重复清洗 1 遍,
合并 3 次的滤液胶浆,再用细纱布过滤 1 遍,去除微
粒杂质。将葛粉浆液离心或放置沉降,待沉降完全(溶
液变澄清)倒掉上清液,再加 5 倍量清水搅匀葛粉,再
沉降,重复 3 次后得葛粉,将其恒温 40℃减压干燥葛
粉。 葛粉干燥后,用电子天平称重。
根据试验结果表明,1 年 12 个月野葛葛粉含量
从 11 月~第 2 年 2 月最高,3、8~10 月其次,4~7 月最
低,具体测定结果见表 1。
2.2 野葛总黄酮含量测定
2.2.1 标准曲线制备 准确称取葛根素对照品 0.0155 g,
用 70%乙醇溶解,于 100 mL 容量瓶中定容,得 0.155
mg/mL浓度的葛根素对照品溶液。分别精密吸取该对
照品溶液 0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于 10 mL 容量
瓶中,加 70%乙醇定容,得系列对照品溶液。用 1.0 mL
70%乙醇溶液作空白对照, 在 250 nm 波长处测定吸
收度。 所得结果见表 2和图 1。
根据标准曲线求回归方程为 A=74.288C+0.0091,
r = 0.9999。
2.2.2 供试样品总黄酮含量测定 将每个月野葛样本
粉碎成粉末,分别精密称取 2 g置 250 mL圆底烧瓶中,
各加 70%乙醇 100 mL,称量,恒温 80℃回流 1.5 h,放
冷,再称量,并加 70%乙醇补足减少重量,摇匀,滤过,
用移液管精确量取滤液 1 mL 于 25 mL 容量瓶,加
70%乙醇稀释定容得待测液,用 1.0 mL 70%乙醇溶液
作空白对照,在 250 nm波长处连续 3 次测定吸收度,
结果取 3次之平均值,通过标准回归方程即可计算出
待测液浓度,再乘以稀释倍数,然后换算成总黄酮质
量,最后用质量除以称取的粉末重量可得该月野葛样
本的总黄酮含量。 具体含量见表 3,根据数据显示 11月~
第 2 年 3 月总黄酮含量高于 9%,8~10 月稍高 ,约
6%,4~7月含量较低,在 2%左右。
2.3 全年野葛葛粉和总黄酮含量变化趋势
根据“2.1”、“2.2”项下测定的一年中每月在渝东
北山区采集野葛中葛粉和总黄酮含量结果 (即表 1、
表 3中数据)制定葛粉和总黄酮含量随时间变化的趋
势曲线图,见图 2。
由图 2 可见渝东北山区野葛的葛粉和总黄酮含
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
253.0
239.0
183.0
89.0
108.0
90.4
90.6
138.0
124.0
138.0
249.0
232.0
25.3
23.9
18.3
8.9
10.8
9.0
9.1
13.8
12.4
13.8
24.9
23.2
月份 所得葛粉重(g) 葛粉含量(%)
表 1 每月野葛葛粉含量表
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
0.0000
0.0031
0.0062
0.0093
0.0124
0.0155
0.0000
0.2458
0.4675
0.7081
0.9412
1.1467
对照品溶液(mL) 对照品液浓度 C(g/L) 吸收度 A
表 2 标准曲线制备
浓度(g/L)
图 1 对照品溶液标准曲线
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中国医药导报 2014 年 2月第 11卷第 6期 ·药品检验·
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量随季节变化趋势基本一致, 从 10 月起开始呈含量
上升趋势,11 月份达第一峰值,12 月份略有下降,次
年 1 月份达第二峰值, 之后含量开始呈下降趋势,到
次年 4 月份含量降到最低,4~10 月一直处于含量低
水平时期。总体显示在 11 月~次年 3月期间葛粉和总
黄酮含量都相对较高。
3 讨论
葛粉和总黄酮含量测定方法皆参考文献报道并
结合实际提取葛粉和总黄酮的工艺而确定,故未再做
方法的稳定性、重复性等考察。
根据图 2 的渝东北山区野葛葛粉和总黄酮含量
随季节变化趋势曲线显示在 11 月~次年 3 月期间葛
粉和总黄酮含量都相对较高。因此认为最佳采集时间
为 11 月~次年 3 月,采集时间段较长,将有利于野葛
的加工生产。
根据研究测定结果发现渝东北山区一带所产野
葛葛粉含量变化在 8.9%~25.3%, 总黄酮含量在 2%~
12%,总的来看,葛粉含量比粉葛类低,若利用其提取
葛粉产率不及粉葛 [21],但总黄酮含量较高,异黄酮类
成分丰富,药用价值更高。 如果能对该区野葛的葛粉
和总黄酮进行连续提取综合利用,定能提高其利用价
值和经济效益。此部分研究不但确定了该区野葛采收
时间段,更为后续关于综合连续提取野葛葛粉和总黄
酮的工艺研究奠定了理论基础。
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(收稿日期:2013-11-23 本文编辑:卫 轲)
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4
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6
7
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0.5213
0.6312
0.5104
0.5346
0.8482
0.9154
0.9823
0.4793
0.5133
0.6781
0.6946
10.81
10.25
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2.8
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6.63
7.92
11.40
11.60
样本(月) 吸收度 换算后含量(%)
表 3 野葛各月份总黄酮含量表
图 2 渝东北山区野葛葛时间粉与总黄酮含量随时间变化曲线
百
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