全 文 :81
2011年第13期
总第125期
ISSN1672-1438
CN11-4994/T
2011年7月
收稿日期:2010-12-10 稿件编号:1012053
作者简介:孟宪锋,硕士,副教授,实验室主任。
基金项目:泰安市科技局科技发展规划课题项目(编号:
20074046)。
泰山女儿茶的儿茶素含量测定
孟宪锋 王仁亮 陈小全 张昌军
泰山医学院化学与化学工程学院 山东泰安 271016
摘 要:为了同时测定女儿茶中4种儿茶素(DC,EC,GC和EGC)及咖啡因(CAF),对女儿茶质量评判奠定基础,笔者采用伊
利特C18(250mm×4.6mm)色谱柱,甲醇-水-乙酸为流动相,流速1ml/min,检测波长278nm,在所选用条件下,各组分理想
分离,效果良好。
关键词:茶叶;儿茶素;咖啡因;含量测定
Determination of catechins in Mount Tai daughter tea
Meng Xianfeng, Wang Renliang, Chen Xiaoquan, Zhang Changjun
Taishan medical university, Tai’an, 271016, China
Abstract: In order to establish a method for the simultaneous determination of catechins (DC, EC, GC, EGC) and caffeine (CAF) in daughter
tea. The obtained data can be used as references for evaluation of tea quality. The study was achieved using a Yilite C18 column with a
methanol-water-acetic acid elution system. The fl ow was detected at a wave length 278 nm and fl ow rate was 1ml/min. The result is that
under the selected analytical condition, the fi ve ingredients in the samples got ideal separation resolution and had good linear relationship.
Key words: tea; catechins; caffeine (CAF); determination
茶是大众喜爱的饮料,其保健功能自古以来
深受人们关注。茶叶中的主要有机成分包括纤维素
(24%)、果胶质(61%)、蛋白质(17%)、啡碱(4%)、多
元酚类(22%)、儿茶素(14%)、酶(3%)、有机酸(9%)
等。茶多酚和茶色素是茶叶中的主要生物活性成分,
也是茶的主要抗氧化成分。茶多酚是茶叶中30多种酚
类物质的总称,约占茶叶干物质总量的25%~35%。
其中包括:儿茶素、黄酮类化合物、花青素、鞣酸
等4大类物质,其中以儿茶素含量最多,约占茶多酚
总量的65%~80%,它决定着茶叶中特有的色、香、
味,其氧化物茶黄素、茶红素等直接决定着红茶汤色
的红艳度及滋味。儿茶素类物质是茶叶中主要的药效
活性成分,具有防止血管硬化、降血脂、消炎杀菌、
抗癌变、抗突变防辐射等多种功效;因此,人们对茶
叶中对人体有益的各种有机与无机成分及其保健作用
作了颇多研究。
泰山女儿茶主产地山东省泰安市大津口地区,
早在明代李日华所撰的《紫桃轩杂缀》即有记载。有
大量文献报道了其提取分离方法以及生物活性,至今
国内外有关其测定方法的文献高效液相色谱法、滴定
法、分光光度法、红外光谱法、原子吸收法等。高效
液相色谱(HPLC)法是目前茶叶中多酚类物质分析测定
的最常用的一种方法,它具有同时分离以及定量的优
点,能对茶叶中多酚类物质进行快速、准确的测定,
且使用的溶剂经济,容易与其他技术联用,需要的样
品量少。现已有大量文献报道了利用此法对茶叶中儿
茶素含量进行测定,并有文献对其方法进行了综述,
详细地列出了各种分离条件和检测方法等。
1 实验部分
1.1 仪器设备和试剂
试剂与材料:甲醇 (色谱纯,天津试剂有限公
司);醋酸(HAc,分析纯,上海试剂一厂);超纯水(本
实验室自制)。标准品:儿茶素(DC)、表儿茶素(EC)、
咖啡因(CAF)、没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素
(EGC)(中国药品生物制品监督检定所)。茶叶样品:
一、二、三级女儿茶、日照绿茶(泰安茶叶市场购)、
茉莉花茶(泰安茶叶市场购)。
仪器及设备:高效液相色谱仪DionexP680,电子
恒温水浴锅(深圳国华仪器厂)。
1.2 实验方法
1.2.1 对照品储备液
精密称取干燥后的各儿茶素类对照品和咖啡因适
量,用含0.1%的乙酸水溶液溶解定容于10ml容量瓶
中,得到EGC浓度437.7mg/L,GC浓度512mg/L,DC
浓度246mg/L,EC浓度618.6mg/L,CAF浓度14952mg/L
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的储备液。检测波长儿茶素在210nm左右和270nm~
280nm有2个最大吸收,且210nm处的检测灵敏度大
大高于278n m处的检测灵敏度,但梯度洗脱时,在
210nm检测时基线漂移较明显。因此根据不同情况可
分别采用检测波长为210nm或278nm,或者两个波长
同时检测。
1.2.2 样品溶液
准确称取1g左右的干茶叶样品于250mL烧杯中,
倒入200m L左右已煮沸的超纯水,并把烧杯保温于
95℃左右的热水浴中,每隔30s搅拌一次,持续浸提
10m i n。取出烧杯,适当冷却后用普通定性滤纸过
滤,并用少量超纯水洗涤烧杯和残渣2~3次,过滤洗
涤液,将滤液全部转入250mL容量瓶中。待瓶内溶液
完全冷至室温时,用水定容至刻度,摇匀。流出液用
0.15μm微孔膜过滤后作HPLC分析。
1.2.3 色谱条件选择
以甲醇-水-乙酸(25:75:0.1)为流动相。色谱柱:伊
利特C18反相色谱柱。
2 结果与讨论
结果:精密移取定量对照品溶液用0.1%乙酸溶液
稀释成梯度浓度的各级标准溶液(见表1)。
表1 儿茶素类对照品保留时间及相关系数
No. Ret.Time(min)
Peak
Name Points
Coeff.Det.
(%) Offset Slope
1 3.08 GC 5 99.9945 -0.0179 0.0522
2 5.68 EC 5 99.9943 -0.0403 0.0190
3 6.17 DC 5 99.9614 1.7851 0.1949
4 8.93 CAF 5 99.8979 21.8197 0.0657
5 13.20 EGC 5 99.9868 -0.4655 0.2788
儿茶素对照品色谱图如图1所示。
图1 各儿茶素对照品色谱图
一级女儿茶样品色增图如图2所示。
图2 一级女儿茶色谱图
将各级茶叶色谱图峰面积与对照品相对照,根
据峰面得到具体浓度。各级茶叶儿茶素含量见表2(单
位:mg/g)。
表2 茶叶中各儿茶素含量表
一级女儿茶 二级女儿茶 三级女儿茶 日照绿茶 茉莉花茶
GC 33.416 25.5366 21.072 21.096 6.5904
EC 35.4386 36.7626 30.4728 28.7618 25.7604
DC - 0.3148 0.1906 - 7.7286
CAF 213.114 229.1916 220.026 183.6206 117.5094
EGC 2.7472 6.0934 5.266 4.569 2.3376
注:“-”表示未检出。
从样品色谱图可以看出,茶叶中除了考察几种儿
茶素外,还有其他未确定成分,且含量较高,需进一
步结合气相色谱、质谱联用等手段确定其具体成分。
从表中可以看出,泰山女儿茶中表儿茶素、咖啡
因、没食子儿茶素、含量均明显优于日照绿茶及茉莉
花茶,而3个级别女儿茶之间含量差别不大。所考查
茶叶中表没食子儿茶素含量差别不大。由于茶多酚类
所具有的强烈抗氧化成分,其含量高低是茶叶质量优
劣的重要方面,但是远不能代表茶叶品质全部,需综
合其他各项指标,如:农药残留、重金属污染、色泽
口感等评价其等级。
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