全 文 ：China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
＊贵州省中药现代化科技产业研究开发专项资金项目，项目编号:黔科合中药专字[ 2007 ]5014 号。
组别
A组
B组
C组
D1 组
D2 组
D3 组
给药剂量
(mg / g)
－
－
20
10
20
40
MΦ吞噬能力
( A值 )
0． 393 ± 0． 178
0． 272 ± 0． 078
0． 520 ± 0． 245■
0． 463 ± 0． 136□
0． 519 ± 0． 097□
0． 742 ± 0． 139▲■
胸腺指数
36． 73 ± 4． 67
42． 07 ± 4． 65
24． 68 ± 3． 11▲■
43． 78 ± 3． 30△
46． 82 ± 2． 90▲
49． 84 ± 2． 43▲■
脾脏指数
72． 96 ± 10． 46
121． 86 ± 81． 32
79． 92 ± 38． 56
131． 27 ± 22． 28
155． 73 ± 25． 44△
187． 60 ± 27． 79▲□
表 1 牡蛎多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响(X ± s，n = 8)
注: 与A 组比较，△ P ＜ 0． 05，▲ P ＜ 0． 01; 与B 组比较，□ P ＜ 0． 05，
■ P ＜ 0． 01。
吞噬功能。巨噬细胞在产生特异性细胞免疫和体液免疫之前发挥
了重要的防御作用，同时能分泌各种活性因子，从而对免疫应答
实施正、负调节效应。因此，巨噬细胞的功能基本反映了机体免疫
能力的强弱。通过 PMΦ吞噬中性红试验发现，随着牡蛎多糖剂量
的增加，PMΦ吞噬能力显著增强，说明牡蛎多糖与阿昔洛韦一样，
具有显著增强 PMΦ吞噬能力的作用。这提示牡蛎多糖具有抗病毒
作用，在抗感染中有可能起重要作用，这与有关文献报道一致 [2 － 6 ]。
胸腺与脾脏是机体重要的免疫器官，其结构的正常与否直接
影响机体的免疫功能。作为外周免疫器官的脾脏，是各类免疫细
胞居住的场所，也是对抗原物质产生免疫应答及产生免疫效应的
重要基地。胸腺指数与脾脏指数是反映机体胸腺和脾脏免疫功能
的重要指标之一，其数值高低可以反映机体免疫功能的状态变
化 [ 5 ]。本研究结果显示，不同剂量的牡蛎多糖对胸腺指数、脾脏指
数有明显影响，能够提高两者水平。这说明牡蛎多糖对免疫器官
功能有增强作用，能提高机体免疫机能，从而激活巨噬细胞的吞
噬活性，增强机体的非特异性免疫功能。这可能是小鼠腹腔内巨
噬细胞吞噬功能增强的原因之一。因此可以认为，牡蛎多糖能刺
激免疫器官的增长，具有免疫增强作用;同时可增强巨噬细胞吞
噬功能，从而增强机体的细胞与体液免疫力。
综上所述，牡蛎多糖能显著提高胸腺指数和脾脏指数，增强
PMΦ 吞噬能力的作用并具有免疫增强作用，开发研究牡蛎多糖
具有广阔的前景。
作者简介:李萌，硕士研究生，主管药师，研究方向为药理学，
(电子信箱)chxq53201@ sina． com。
参考文献:
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药业，2013，22(1):69．
(收稿日期:2013 － 03 － 19 )
野鸦椿药材来为省沽油科植物野鸦椿 Euscaphis Japonica
( Thunb． ) Dippel 的带花或果的枝叶，又名鸡眼睛、芽子木、红椋、
鸡肾果等，原植物分布江南各省和云南东北部 [ 1 ]，为贵州少数民
族 (苗族 )用药，性辛、平，味苦、甘，具理气止痛、消肿散结的功效。
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
高效液相色谱法测定野鸦椿药材中鞣花酸含量＊
刘 智 1，王爱民 2，许祖超 3，李勇军 2，廖尚高 2，王永林 2
(1． 贵阳医学院附属医院药剂科，贵州 贵阳 550004; 2． 贵阳医学院药学院，贵州 贵阳 550004;
3． 贵州益康制药有限公司，贵州 贵阳 550025)
摘要:目的 建立测定野鸦椿药材中鞣花的含量高效液相色谱法。方法 色谱柱为 Waters symmetry C18 柱(150 mm × 4． 6 mm，5 μm)，流动
相为甲醇 － 0． 1%磷酸(36 ∶ 64)，流速 1 mL /min，柱温为 40 ℃，检测波长为 254 nm。结果 鞣花酸进样量在 0． 129 ～ 2． 06 μg 范围内与
峰面积呈良好线性关系 ( r = 0． 999 4 )，平均加样回收率为 100． 57%，RSD为 2． 43% ( n = 6 )。结论 该方法线性关系、精密度和准确度良
好，专属性强，可作为野鸦椿药材中鞣花酸的质量控制方法。
关键词:高效液相色谱法;野鸦椿;鞣花酸
中图分类号:R284． 1;R282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2013 )17 － 0016 － 03
Determination of Ellagic Acid in Euscaphis Japonica (Thunb． ) by HPLC
Liu Zhi1， Wang Aimin2， Xu Zuchao3， Li Yongjun2， Liao Shanggao2， Wang Yonglin2
( 1． Department of Pharmacy， Affiliated Hospital of Guiyang Medical Colledg， Guiyang， Guizhou， China 550004; 2． College of Pharmacy， Guiyang
Medical Colledge， Guiyang， Guizhou， China 550004; 3． Guizhou Eakan Pharmaceutical Co．，Ltd．，Guiyang， Guizhou， China 550025 )
Abstract: Objective To establish a HPLC method for the determination of the ellagic acid content in Euscaphis Japonica ( Thunb． ) ．
Methods The chromatographic separation was performed on the Waters symmetry C18 column ( 150 mm × 4． 6 mm， 5 μm) with
methanol － 0． 1% H3PO4 solution (36 ∶ 64 ) as the mobile phase，the flow rate was 1 mL /min and the column temperature was 40 ℃ ． The
detection wave length was 245 nm． Results The linearity of ellagic acid was in the range of 0． 129 － 2． 06 μg( r = 0． 999 4 )，the average
recovery rate was 100． 57% ， RSD was 2． 43% ( n = 6 ) ． Conclusion This method has good linearity，precision and accuracy strong speci-
ficity． It can be used for the quality control method of ellagic acid in Euscaphis Japonica ( Thunb． ) ．
Key words: high performance liguid chromatography; Euscaphis Japonica ( Thunb． ) ; ellagic acid
·药物研究·
Drug Research
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China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
A B
A. 对照品溶液 B. 供试品溶液
图 1 高效液相色谱图
表 1 鞣花酸加样回收试验结果(n = 6)
样品含量(μg)
0． 126 1
0． 128 9
0． 127 1
0． 128 5
0． 127 4
0． 132 0
加入量(μg)
0． 128
0． 128
0． 128
0． 128
0． 128
0． 128
测得量(μg)
0． 250 7
0． 258 6
0． 253 0
0． 261 1
0． 258 5
0． 262 3
回收率(%)
97． 34
99． 92
98． 36
103． 59
102． 42
101． 80
X(%)
100． 57
RSD(%)
2． 43
表 2 各批次药材中鞣花酸含量测定结果(n = 2)
样品编号
H － 1
H － 2
H － 3
H － 4
H － 5
H － 6
H － 7
H － 8
H － 9
W － 1
W － 2
W － 3
W － 4
W － 5
W － 6
W － 7
W － 8
批号
20080306
20080523
20080626
20080825
20081114
20090210
20090319
20090512
20090618
20080311
20080523
20080713
20081011
20090320
20090513
20090730
20090911
产地
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市花溪
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
贵阳市乌当
含量 (mg / g )
0． 457
0． 461
0． 504
0． 339
0． 422
0． 781
0． 756
0． 722
0． 920
0． 442
0． 384
0． 457
0． 506
0． 655
0． 826
0． 694
0． 739
野鸦椿的枝叶有明显的抗炎作用 [ 2 ]，其所含的鞣花酸类化合物具
有活血化瘀、阻断致癌物致癌、抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细
胞凋亡、抑制血管生成和抗氧化等作用 [ 3 － 5 ]，野鸦椿为血脉通胶
囊中的主要药材之一，而《贵州省中药材、民族药材质量标准》
2003 年版中仅对其进行简单的薄层色谱鉴别，难以保证和控制
产品质量。目前对该药材的质量研究国内仅见性状和显微鉴别的
研究 [6 ]和应用超高效液相色谱 (UPLC)法测定野鸦椿药材中鞣花
酸类化合物的含量 [ 7 ]。笔者采用鞣花酸作为质量控制指标，对野
鸦椿药材进行含量测定，现报道如下。
1 仪器与试药
Prominence LC － 20A高效液相色谱仪(岛津公司 )，包括二元
梯度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、LC － So-
lution色谱工作站;AE240 型十万分之一电子天平(梅特勒 －托利
多仪器上海有限公司); 超纯水机(四川沃特尔科技发展有限公
司)。鞣花酸对照品(为野鸦椿药材中提取分离制备所得，经理化
分析和波谱鉴定，采用 UPLC －阵列二极管检测器在多个检测波
长下用测定，其峰面积归一化结果均大于 98%);野鸦椿药材17批
(贵州益康制药有限公司 )，采收于贵阳市乌当区和花溪区的同株
植物，由贵阳医学院龙庆德副教授鉴定为省沽油科植物野鸦椿
E． japonica． 的干燥枝叶)。甲醇、磷酸等试剂均为国产分析纯。
2 方法与结果
2．1 色谱条件及系统适用性试验
色谱柱: Waters symmetry C18 柱(150 mm × 4． 6 mm，5 μm);流
动相:甲醇－ 0． 1%磷酸(36 ∶ 64);流速:1 mL /min;柱温:40 ℃;检
测波长:254 nm;进样量:10 μL。分别吸取对照品溶液和供试品溶
液各 10 μL，在拟订的色谱条件下测定。结果表明，鞣花酸与其他
物质峰分离度大于 1． 5，色谱分析结果见图 1。
2．2 溶液制备
取鞣花酸对照品 10． 3 mg，精密称定，置 50 mL 容量瓶中，加
甲醇适量，超声溶解，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。取
野鸦椿药材粉末(过 40目筛)约 1 g，精密称定，置索氏提取器中，
加甲醇适量，加热回流 6 h，用少量甲醇洗涤容器，洗液与提取液
合并，浓缩并转移至 10 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，
即得供试品溶液。
2．3 方法学考察
线性关系考察: 分别精密量取对照品贮备液，加甲醇制成
每 1 mL 含鞣花酸 0． 012 9，0． 025 8 ，0． 051 5，0． 103 和 0． 206 mg
系列质量浓度的对照液，按拟订的色谱条件进样 10 μL 测定，以
进样量为横坐标 ( X )、峰面积为纵坐标 ( Y )进行线性回归，得回归
方程 Y = 4． 030 × 106 X － 1． 336 × 105，r = 0． 999 4(n = 6)。结果表
明，鞣花酸进样是在 0． 129 ～ 2． 06 μg 范围内与峰面积线性关系
良好。
精密度试验: 精密量取野鸦椿药材同一供试品溶液10 μL，
连续进样 6 次。结果鞣花酸峰面积的 RSD 为 0． 10%，表明仪器
精密度良好。
重复性试验:取同一批号样品9 份，按供试品溶液制备中取
样量的 50%，100%和 150%称取，每组 3 份，照供试品溶液制备
方法制备溶液，分别测定，计算鞣花酸含量。结果鞣花酸平均含量
为 0． 254 1 mg / g，RSD为 2． 3% ( n = 9 )，表明此方法重复性良好。
稳定性试验:精密量取同一供试品溶液10 μL，分别于 0，1，
2，4，8 h进样测定。结果鞣花酸峰面积的 RSD为 0． 20%，表明供
试品溶液中鞣花酸在 8 h内稳定。
加样回收试验:精密称取已测定鞣花酸含量(0． 254 1 mg / g)
的野鸦椿药材 6 份 (过 40 目筛 )，每份 0． 5 g，分别精密加入鞣花
酸对照品甲醇溶液 1 mL(质量浓度为 0． 128 g / L)，室温挥干，依
法制备供试品溶液并测定。结果见表 1。
2．4 样品含量测定
取野鸦椿药材供试品，依法制备供试品溶液，并按拟订项色
谱条件测定。结果见表 2。
3 讨论
在供试品溶液制备中，分别考察了不同浓度乙醇、甲醇等溶
剂进行回流、超声、索式提取等方法，结果以甲醇索式提取效果较
好;还对索氏提取时间( 2，4，6，8 h )进行了考察，结果表明，提取
6 h基本能将被测物质提取完全。经紫外线扫描，鞣花酸在 254 nm
波长处有最大吸收，故选择 254 nm为含量测定波长。本试验采用
高效液相色谱 (HPLC)法测定野鸦椿药材含量，被测成分与相邻近
峰的分离度均大于 1． 5，符合中国药典含量测定的要求;与超高液
相色谱(UPLC)法比较，应用更广泛，同时具有良好的准确度、精密
度和稳定性，可作为常规方法应用于药材的质量控制。
本试验经过两年的追踪测试，初步发现两地的采收季节对野鸦
椿药材中鞣花酸含量有一定影响，至于影响程度，需进一步深入研究。
t / min t / min
1
1
0 5 10 150 5 10 15
·药物研究·
Drug Research
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China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
作者简介:刘智 (1962 － )，男，主任药师，研究方向为中药新剂
型与新技术，(电话)0851 － 6771374(电子信箱)liuzhigy@ 163． com;
王爱民 (1962 － )，男，教授，研究方向为中药质量控制，本文通讯作
者，(电话)0851 － 6908899(电子信箱)gywam100@ gmail． com。
参考文献:
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合物的含量 [ J ] ． 中国中药杂志，2009，34(24):3 235 － 3 238．
(收稿日期:2012 － 08 － 03 )
大面积烧伤患者由于皮源有限，或为了尽量减少对供皮区外
观的影响，常常需行头部取皮术。由于头部可取皮范围广泛，且生
长迅速，恢复后不影响外貌，所以在烧伤后创面覆盖及瘢痕修复
过程中常多次取用。但由于取皮前头部多属正常组织，而在广泛
取皮后剧烈的疼痛常使患者产生强烈的恐惧感，从而对后续手术
产生抵抗情绪，迫切需求一种简单有效的方式进行术后头部创面
止痛，以减轻患者术后的痛苦。
1 资料与方法
1．1 一般资料
筛选拟采用头部取皮法进行烧伤后创面切削痂植皮的患者
84 例，美国麻醉医师协会 ( ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级，年龄 18 ～ 65 岁，
男女不限，躯体烧伤创面小于 30%，其中Ⅱ度烧伤不超过 15%，
·药物研究·
Drug Research
不同局部麻醉药物用于烧伤手术头部取皮止痛的效果研究
李 杰，付丽群，王义宁，罗兴华，张卫达
(中国人民解放军广州军区广州总医院心血管外科中心，广东 广州 510010)
摘要:目的 研究低浓度罗哌卡因、布比卡因、利多卡因在烧伤手术患者头部取皮后的镇痛效果。方法 选择使用头部取皮法进行烧伤后
切削痂植皮的患者 84 例，取头皮前橡皮带环扎止血后，随机分为 4 组，各 21 例。其中常规对照组(C组)按既往常规方法在头皮下注入
含 1 /20 万的肾上腺素生理盐水 200 mL进行头皮下扩张，罗哌卡因组(R组)给予 0． 05%罗哌卡因 200 mL进行头皮下局部麻醉并扩
张头皮，布比卡因组(B组)给予 0． 188%布比卡因头皮下局部麻醉，利多卡因组(L组)给予 0． 1%利多卡因头皮下局部麻醉。分别于麻
醉开始前 ( T0 )和手术结束患者清醒后 20 min ( T1 )、5 h (T2 )和 10 h( T3 )时采用肌肉活动评分法 (MAAS )进行意识状态评价，并采用视觉模
糊评分(VAS)对头部及躯体创面分别进行疼痛评估，全程监测心率、血压等生命体征进行安全性评价。结果 4 组患者均安全度过围手
术麻醉期，其中 R组患者在 3 个时间点 VAS评分均明显低于其余两组 ( P ＜ 0． 05 )。结论 头皮下低浓度罗哌卡因注射更适合应用于头
皮取皮后的患者镇痛。
关键词:局部麻醉药物;镇痛;罗哌卡因;烧伤
中图分类号:R969． 4;R971 + ． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2013 )17 － 0018 － 02
Analgesia Efficacy of Different Local Anesthetics in Harvesting Grafts from
Scalp of Burn Patients
Li Jie， Fu Liqun， Wang Yining， Luo Xinghua， Zhang Weida
( Center of Cardiovascular Surgery， Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Region， Guangzhou， Guangdong， China 510010 )
Abstract: Objective To investigate the analgesic effect of low concentrations of ropivacaine，bupivacaine and lidocaine in burn patients
after harvesting grafts from scalp． Methods Eighty － four patients with harvesting grafts from the scalp after burn，whom randomly divid-
ed into 4 groups ( n = 21 ) after rubber belt ring ligation hemostasis． The routine control group (C ) was injected normal saline 200 mL
containing 1 / 200 000 adrenaline under the scalp for the subscalp dilation; the ropivacaine group (R ) was given 0． 05% ropivacaine 200
mL for subscalp local anesthesia; the bupivacaine group (B ) was given 0． 188% bupivacaine for subscalp local anesthesia and the lido-
caine group (L ) was given 0． 1% lidocaine for subscalp local anesthesia． The motor activity assessment scale (MAAS ) was adopted to
perform the conscious state evaluation before anesthesia (T0 ) and at 20 min ( T1 ) ，5 h (T2 ) ，10 h ( T3 ) after the end of operation and pa-
tients awaking． Moreover，the visual analogue scale (VAS ) was adopted to conduct the pain evaluation on the head and body wound． The
vital signs of the heart rate and blood pressure， etc． were also performed the whole course monitoring for the assessment of se-
curity． Results All 4 groups passed the perioperative period safely． Among them，the VAS scores at 3 timepoints in the group R were
significcantly lower than those in the other 2 groups． Conclusion Low concentration of ropivacaine injected under the scalp is more
suitable for analgesia in harvesting grafts from scalp．
Key words: local anesthetics; analgesia; ropivacaine; burn
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
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