全 文 ：前学者的研究相一致 [ 5] 。
众多资料表明 [ 5] , 生脉散对心血管系统具有广泛的生理
作用 , 它既可直接作用于心脏 , 产生正性肌力和负性频率作
用 , 又有扩张血管改善器官血流量 , 降低血压和较强的抗心
律失常作用等。现代医学研究指出 ,人参和五味子有抑制自
由基和抗脂质过氧化作用 [ 6] , 从细胞水平的实验研究提示 ,
生脉散通过提高心肌细胞线粒体呼吸链功能 , 使电子传递的
异常途径得以改善 , 减少自由基生成 , 并提高细胞内 SOD,
GSH-PX活性 , 增加心肌细胞清除自由基能力 , 从而降低
MDA含量 [ 7] 。但生脉散抑制自由基 、抗脂质过氧化和扩张
冠脉血管 , 增加冠脉血流量的报道至今均为体外实验或静脉
直接给药所得结论。对有效成分并不十分确切的这一粗制
剂经口给药后能否产生同样的活性尚未见报道。本实验采
用生脉散给动物口服 , 取其血清进行体外实验 , 这样可排除
其所含杂质成分包括无机离子的干扰。实验结果表明 , 含生
脉散血清与生脉散制剂直接给药两者对心肌的作用基本相
似 , 说明其抑制自由基 、抗脂质过氧化和扩张冠脉血管 , 增加
冠脉血流量作用的有效成分确能经胃肠道吸收入血。
观察复方中药对器官的影响方法较多 , 但若用复方中药
直接接触器官 , 其复杂的成分可影响实验的结果 。而给动物
灌服中药一定时间后 ,取其血清进行实验的药理学方法就具
有一定的优势 , 近年来许多中药药理实验即采用此方法 [ 8] 。
任何新的方法学都需经过一定的时间 , 在探索的过程中得以
建立 , 在研究过程中逐步加以完善 , 逐渐推广应用 , 血清药理
学方法作为一种新的方法也不例外 ,必然存在局限性及某些
问题。如:血清标本采集时间的确定 、含药血清药物浓度的
测定与选择 、血清的处理 、不能保证中药全部通过血液而起
作用以及中药尤其是复方复杂的药物代谢动力学及血清化
学等 , 以上存在的问题在今后的研究过程中还有待逐步加以
改进 , 以更好地促进中药药理的研究。
鉴于生脉散的有效成分极其复杂 , 故对其确切作用机制
仍不明确。但根据自由基能造成心肌缺血和再灌注性损伤
的机理 , 生脉散改善心功能的作用 , 可能与清除体内的自由
基和抗脂质过氧化损伤有关。至于其他作用机制 , 有待进一
步深入研究。
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土家族药紫金砂挥发油成分分析和药理作用研究
汪 植 1 , 　张荣平 2 , 　叶　红1 , 　朱烈彬 1 , 　余志刚 1
(1.天然产物研究与利用湖北省重点实验室 三峡大学化学与生命科学学院 ,湖北 宜昌 443002;2.昆明医学
院药学院 ,云南 昆明 650031)
收稿日期:2007-04-16
基金项目:天然产物研究与利用湖北省重点实验室开放基金资助项目(2006NP08)。
作者简介:汪 植(1966～ ),男 ,博士 ,教授 ,研究方向:三峡地区民族民间药研究与利用 ,电话:0717-6397478。
关键词:AngclicapolymorphaMaxim;挥发油;GC-MS分析
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)04-0596-03
　　紫金砂为土家族常用药物 , 为伞形科当归属植物拐芹
AngelicapolymorphaMaxim.的根 [ 1] 。主要分布于湖北 、湖南 、
重庆等省地。具有温中散寒 、理气止痛的功效。用于治疗胃
痛 、腹痛 、胸胁痛 、风湿关节痛 、跌打损伤 、毒蛇咬伤等 [ 2] 。王
长岱等曾对拐芹根及根茎中挥发油成分进行分析 [ 3] , 表明其
主要成分为 β -水芹烯 、α-蒎烯 、α-水芹烯。与本试验报道基
本一致 ,但由于样品采收地点 、采收时间 、挥发油提取方法不
一致。挥发油成分和含量存在差异。本文对紫金砂挥发油
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的化学成分和药理作用进行了研究 ,为进一步开发利用紫金
砂提供了科学依据。
1　实验材料
药材:紫金砂 ,购于湖北省神农架林区木鱼镇 ,经鉴定为
伞形科当归属植物拐芹 AngelicapolymorphaMaxim.的根。
仪器:气相色谱质谱联用仪(美国 AgilentTechnologies
公司 HP68590GC/5973MS),旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器
厂 RE-52AYLS-6A),智能热板仪(山东省医学科学院设备
站), 50 μL微量移液器(中外合资上海博精生化试剂仪器有
限公司)。
实验动物:昆明种小鼠(18 ～ 22 g), 由华中科技大学实
验动物中心提供。
2　实验方法与结果
2.1　挥发油成分分析
2.1.1　挥发油提取
取紫金砂称重后切碎 ,置于 1 000 mL圆底烧瓶中 , 加入
适量水 , 浸泡 1h。连接冷凝回流装置及挥发油测定器 , 置于
调温电热套上 , 提取 4 h, 得到挥发油 ,得油率为 0.5%。
2.1.2　检测条件
气相色谱-质谱条件:仪器为美国 AgilentTechnologies公
司 HP68590GC/5973MS气相色谱质谱联用仪。 GC条件:
HP-5MS石英毛细管(30 m×0.25mm×0.25 μm);柱温 80
～ 240 ℃,程序升温 3 ℃/min;进样口温度 250℃;柱前压 100
kPa;进样量 0.06 μL;分流比 15∶1;载气为高纯氦。 MS条
件:电离方式 EI;电子能量 70 eV;传输线温度 250 ℃;离子
源温度 230 ℃;质量范围 35 ～ 450;wikey7n.1谱库检索定
性 ,并参考文献加以确认 [ 3] 。
2.1.3　实验结果及分析
按上述条件对紫金砂挥发油进行 GC-MS分析 , 分离出
69个峰(图 1)。经计算机检索 NIST02标准质谱数据库 , 人
工解析及查对有关资料 [ 4] ,确认了其中 54个成分。 用峰面
积归一化法计算出各成分在挥发油中的相对含量 , 结果见表
1。
图 1　紫金砂挥发油的总离子流图
表 1　 紫金砂挥发油的化学成分和相对百分含量
序号 化合物 百分含量 /%
1 α-侧柏烯 0.10
2 α-蒎烯 11.86
3 莰烯 0.10
4 β-蒎烯 0.54
5 月桂烯 1.97
6 2-甲基-2戊烯酸 0.10
7 α-水芹烯 13.35
8 3-蒈烯 1.72
9 α-松油烯 0.36
10 对-聚伞花素 3.48
11 β-水芹烯 23.91
12 罗勒烯 0.05
13 γ-松油烯 0.05
14 4-甲基苯酚 2.60
15 异松油烯 2.60
16 6-莰烯酮 0.28
17 3-甲基丁酸-3-甲基丁酯 2.72
18 顺-玫瑰醚 0.10
19 1-甲基-4-异丙基-2-环己烯-1-醇 1.01
20 反-玫瑰烯 0.08
21 松油-1-醇 0.77
22 2, 5-二乙基噻吩 6.34
23 4-异丙基-2-环己烯-1-酮 0.89
24 顺-胡椒醇 0.47
25 3-甲基丁酸己酯 0.39
26 松香芹醇 0.34
27 反-胡椒醇 0.49
序号 化合物 百分含量 /%
28 香芹酚甲醚 0.10
29 戊酸己酯 0.27
30 胡椒酮 0.05
31 4-羟基-3-甲基苯乙酮 1.87
32 乙酸龙脑酯 0.94
33 乙酸薰衣草酯 0.43
34 2-甲基丁酸庚酯 0.30
35 戊酸庚酯 0.42
36 4-乙基-1, 2-二甲氧基苯 0.05
37 乙酸香茅酯 0.10
38 δ-榄香烯 0.84
39 戊酸辛酯 0.28
40 α-柏木烯 0.21
41 α-古芸烯 0.39
42 β-金合欢烯 0.57
43 芳香-姜黄烯 0.22
44 α-金合欢烯 0.84
45 β-香柠檬烯 0.60
46 β-红没药烯 0.32
47 δ-杜松烯 0.25
48 α-红没药烯 0.38
49 橙花叔醇 0.05
50 戊酸香茅酯 0.23
51 匙叶桉油烯醇 0.32
52 蓝桉醇 0.78
53 α-红没药醇 1.67
54 9-十五碳烯醇 0.87
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2.2　挥发油药理作用研究
2.2.1　镇痛作用
取♀KM小鼠置于(55 ±0.5)℃热板仪上 , 测定小鼠自
放在热板上至出现舔后足所需时间(s), 小于 10 s或大于 50
s或跳跃者弃之不用。 重复测其正常痛阈值 2次(60 s), 取
两次正常痛阈平均值作为该鼠给药前基础痛阈。将 40只小
鼠按药前痛阈随机分为 4组。每组分别灌服不同药物 3 d,
于末次给药后测定给药后 30、60、120min内的痛阈。结果见
表 2。
表 2　 紫金砂挥发油对小鼠热刺激性疼痛的影响( x±s, n=10)
组别 剂量 /mg/kg 30min痛阈值提高率 60min痛阈值提高率 120min痛阈值提高率
生理盐水 / 10.60±22.65 -1.54±21.13 -2.83±9.51
盐酸曲马多 16.67 59.89±19.12＊＊ 64.29±16.92＊＊ 74.20±15.10＊＊
挥发油低剂量 8.33 35.27±5.71 33.16±15.18 40.15±15.25＊
挥发油高剂量 16.60 60.42±36.98＊＊ 70.18±8.70＊＊ 83.64±23.41＊＊
　　与生理盐水组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
　　取 KM小鼠 40只 , ♀♂各半 , 随机分成 4组。每组分别
灌服不同药物 ,给药 3d,于末次给药后 30 min各鼠腹腔注射
0.8%醋酸溶液(0.2 mL/只), 观察并记录注射醋酸后第 1次
出现扭体反应的时间及 10 ～ 20min内出现扭体反应的次数。
结果见表 3。
表 3　 紫金砂挥发油对醋酸所致小鼠
扭体的影响( x±s, n=10)
组别 剂量/mg/kg
潜伏期
/s
扭体次数
/次
生理盐水 / 240.75±65.04 19.1±7.4
盐酸曲马多 16.67 408.75±124.13＊＊ 15.4±4.1＊＊
水提物低剂量 833.00 261.29±61.21 16.7±6.4＊＊
水提物高剂量 1 666.00 344.17±159.69＊ 10.3±4.5＊＊
挥发油低剂量 8.33 290.86±62.70 8.3±4.1＊＊
挥发油高剂量 16.60 396.60±74.47＊＊ 11.3±4.0＊＊
　　与生理盐水组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
　　结果表明紫金砂挥发油对物理和化学刺激所引起的疼
痛均具有镇痛作用。与生理盐水比差异有显著性。
2.2.2　抗溃疡作用 [ 4]
取 KM小鼠 40只 , ♀♂各半 , 随机分成 4组。每组分别
灌服不同药物 , 给药 3 d, 于末次给药前禁食 24 h。于末次给
药后 30min用 2mmol/L的阿司匹林-乙醇溶液按 100 mg/kg
灌胃。 4 h后 , 将小鼠处死 , 取胃 , 找出溃疡面并用解剖显微
镜观察 , 以溃疡点数表示溃疡指数。结果见表 4。
表 4　 紫金砂挥发油对阿司匹林-乙醇溶液所致
小鼠胃溃疡的影响( x±s, n=10)
组别 剂量 /(生药 mg/kg) 溃疡点数
生理盐水 / 28.0±3.3
西咪替丁 66.67 3.8±1.2＊＊
水提物低剂量 833.00 7.8±1.4＊＊
水提物高剂量 1 666.00 2.0±3.3＊＊
挥发油低剂量 8.33 3.3±2.1＊＊
挥发油高剂量 16.60 1.7±1.6＊＊
　　与生理盐水组相比 , ＊＊P<0.01。
　　结果显示紫金砂挥发油对阿司匹林-乙醇溶液所致小鼠
胃溃疡模型有抗溃疡作用 ,与生理盐水比差异有显著性。
2.2.3　对肠平滑肌运动的影响
　　取禁食 24 h家免 , 制备离体回肠肌标本 ,标本长 2 cm,
将标本连接张力换能器 ,置于含台氏液(20 mL)的恒温浴槽
内 , 连续通人 95% O2和 5%CO2混合气体 , 记录肠肌收缩曲
线。平衡 30min,待基线稳定后 , 滴加不同剂量的紫金砂挥
发油 , 记录给药后舒张曲线 , 观察紫余砂挥发油对家兔离体
回肠肌的作用 。结果见表 5。
表 5　紫金砂挥发油对肠平滑肌运动的影响( x±s, n=6)
组别 给药量/μL
平衡时的张力
/g
给药后的张力
/g
抑制率
/%
挥发油低剂量 20 3.71±0.22 2.56±0.19＊ 31.0
挥发油低剂量 20 3.83±0.37 2.10±0.20＊ 45.2
　　结果显示紫金砂挥发油有抑制肠平滑肌运动的作用。
3　讨论
实验表明紫金砂挥发油具有良好的抗溃疡 、镇痛 、解痉
作用 , 上述药理作用是其治疗胃痛的药理学基础。其作用可
能是通过胆碱能受体阻断作用的。
　　紫余砂挥发油对胃溃疡有显著的抑制作用 ,从而保护胃
黏膜 , 是一种具有良好应用前景的抗溃疡药物 , 通过对紫金
砂挥发油化学成分的分析和药理作用研究 , 为进一步开发利
用紫金砂提供了科学依据。
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