全 文 ：工作简报
高效液相色谱法测定葛粉保健品中
葛根素的含量
孙林超
(江苏食品职业技术学院 , 淮安 223003)
摘　要:对不同产区葛粉保健品中葛根素的含量进行分析 ,拟建立高效液相色谱法快速测定葛
粉保健品中葛根素含量的方法 。固定相为 A gilent-C18柱(4.6 mm ×300 mm , 5 μm),流动相为甲
醇-水(70+30 ,体积比)溶液 ,流速为 1.0 mL ·min-1 ,波长为 250 nm ,进样量 10 μL。结果表明:葛
根素的质量浓度在 10.00 ～ 100.00 mg ·L-1范围内与峰面积呈线性关系 ,加标回收率为 99.0%～
99.8%,检出限(3S/ N)为 1.0 mg ·L-1 ,相对标准偏差分别为 0.57%,0.64%,1.71%。
关键词:高效液相色谱法;葛粉;葛根素;保健品
中图分类号:O657.1　　　文献标识码:B　　　文章编号:1001-4020(2008)10-0945-02
HPLC Determination of Puerarin in An Health-care food
“Kudzu Vine Root Powder”
SUN Lin-chao
(J iangsu Techno-vocational College of food Science , H uaian 223003 , China)
Abstract:Concents of puer arin in kudzu vine ro ot powder produced in diffe rent a reas in our country were
determined by H PLC.The Agilent-C18 co lumn(4.6 mm×300 mm , 5μm)w as used as the stationa ry phase , and a
mix fur e of methanol and H2O , mixed in the vo lume ratio o f 70 to 30 , w as used as the mobile phase w ith a flow-r ate
of 1.0 m L·min -1 .Vo lume taken fo r sample introduction w as 10μL.UV-detections w ere made at the w aveleng th
of 250 nm.Linear rela tionship w as obtained in the r ange of 10.00 to 100.00 mg· L-1 between the va lues of peak
area and concent ration of puera rin , with its detection limit(3S/ N)of 1.0 mg· L-1 .Test fo r pr ecision w as made a t
3 different concentr ation levels of 1.58 , 1.55 and 0.24 mg· L-1 fo r 6 determinations each , g iv ing values o f RSD′s
of 0.57%, 0.64% and 1.71% respective ly.Under the condition o f sample analy sis , recovery of the method w as
tested by addition of standa rd so lution of puerarin at 3 different concentr ations , and values of recover y (n =6)
obtained w ere in the range o f 99.0% to 99.8%
Keywords:HPLC;Kudzu vine ro ot pow de r;Pue rarin;Health-ca re food
　　葛根是野生豆科植物葛的块根 ,野生葛根素有
“亚洲人参”之美誉 ,野葛根的有效成分为异黄酮类
化合物 ,这类异黄酮化合物在干葛根中的量可达
50 mg/100 g 。现代医学研究表明[ 1] :葛根中含有大
量的葛根素和黄酮类物质 ,能增加冠状动脉血流量 、
降低血管阻力 、调节血液循环 、降低心肌耗氧等 ,是
收稿日期:2008-05-05
作者简介:孙林超(1965-),男 ,江苏涟水人 ,实验师 , 从事分析
　检测及大型仪器使用与管理。
一种较为常见的心肌保护物质;能解痉止痛 ,防治高
血压 、头晕头痛 、冠心病 、心绞痛 、神经性头痛等;能
清热凉血 、抗菌消炎 、抗过敏 、抗病毒 、抗糖尿病并发
症等药理作用;具有抗自由基 、抗氧化 、抗癌和增强
肌体的免疫力;具有显著的调节内分泌 ,双向平衡体
内雌激素的功效。对卵巢有特定的活性作用 ,能增
加卵巢局部微循环系统的血流 ,对滋养卵巢 ,激活卵
巢雌激素的自然分泌 ,从而延缓女性衰老。葛粉是
葛根经加工而得的初级产品 ,是一种很好的营养保
健品 ,经常食用葛粉 ,能强筋壮骨 、美容健身 、延年益
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孙林超:高效液相色谱法测定葛粉保健品中葛根素的含量
寿。因此 ,葛粉在世界上被誉为“长寿粉”[ 2] 。由于
葛根素具有雌激素样作用 ,长期食用易出现乳腺痛 、
易怒 、钠水储留 ,停用后子宫出血等副作用[ 3] ,因此
作为保健品只能适量服用才有益 。本工作在文献
[ 4-6]的基础上 ,用高效液相色谱法测定葛粉保健品
中葛根素的含量 ,方法操作简便 ,结果准确。
1　试验部分
1.1　仪器与试剂
Agilent 1200高效液相色谱仪;A gilent 1200紫
外检测器;Agi lent 液相化学工作站;KQ-250DB 型
数控超声波提取器。
葛根素标准储备溶液:称取标准品 20.0 mg 于
100 mL 容量瓶中 ,用 50%(体积分数 ,下同)甲醇溶
液溶解并稀至刻度 ,摇匀 ,即成 200.0 mg ·L-1标准
储备溶液 。
甲醇 、乙腈均为色谱纯 ,葛根素标准品(进口),
葛粉保健品(超市购得)。
1.2　仪器工作条件
Agilent-C18 色谱柱(4.6 mm ×300 mm ,
5μm);流动相为甲醇-水(70+30 ,体积比)溶液;流
动相流速1.0 mL·min-1 ,柱温为 30 ℃,检测波长
为250 nm ,进样量为 10 μL 。
1.3　试验方法
称取适量葛粉样品于 50 mL 容量瓶中 ,加 50%
甲醇溶液 40 mL ,超声提取 50 min ,用 50%甲醇溶
液稀至刻度 ,摇匀 ,以 0.45 μm 滤膜过滤 ,同时制作
空白溶液 。
按仪器工作条件进样品溶液和葛根素标准系列
溶液各 10 μL ,测得峰面积 ,按标准曲线计算样品中
葛根素的含量。
2　结果与讨论
2.1　溶剂及流动相的选择
在样品提取过程中 ,试验分别以 30%, 40%,
50%,60%,70%, 80%, 90%甲醇为溶剂进行提取 ,
经试验以 50%甲醇为溶剂进行提取 ,提取较为完
全 ,且样品中有机杂质相对较少 。试验分别采用甲
醇-乙腈-水和甲醇-水为流动相进行对比 ,结果表明:
甲醇-水(70+30 ,体积比)溶液作为流动相分离效果
很好 。
2.2　样品色谱图
按仪器工作条件测定葛根素标准品与葛粉样
品 ,色谱图见图 1 。
(a)　葛根素标准品(Puerarin s tandard)
(b)　葛粉样品(Kudzu vine root p ow der sam ple)
图 1　葛根素标准品(a)和葛粉样品(b)色谱图
Fig.1　Ch rom atograms of puerarin s tandard(a)and samples(b)
2.3　标准曲线的绘制
移取葛根素标准储备溶液 0.50 , 1.00 , 2.00 ,
3.00 ,4.00 , 5.00 mL ,分别于 10 mL 容量瓶中 ,用
50%甲醇溶液释稀 , 配成 10.00 , 20.00 , 40.00 ,
60.00 ,80.00 , 100.00 mg · L-1标准系列溶液。按
色谱条件进样10 μL ,以峰面积 A为纵坐标 ,葛根素
标准品溶液浓度 c为横坐标绘制标准曲线 。葛根素
的质量浓度在 10.00 ～ 100.00 mg ·L-1范围内呈线
性 ,线性回归方程为 A=5.231 5 c+0.059 ,相关系
数为 0.999 6 。
2.4　检出限和测定限
按试验条件对空白溶液进行测定 ,信噪比为 3
时 ,求得检出限为 1.0 mg ·L-1 ;信噪比为 10时 ,求
得测定限为 3.0 mg ·L-1 ,可满足保健品中葛根素
测定要求 。
2.5　精密度试验
移取含 葛根素质量 浓度为 1.58 , 1.55 ,
0.24 mg ·L-1的葛粉样品溶液 10 μL ,重复进样 6
次 ,测定结果(n=6)分别为 1.58 ,1.55 ,0.24 mg ·
L
-1 ,其相对标准偏差分别为 0.57%, 0.64%,
1.71%。
2.6　回收率试验
按试验方法在葛粉样品加入葛根素标准 ,按样
品溶液制备方法进行加标样品的处理 ,按仪器工作
条件进行测定 ,加入 2.00 ,3.00 ,4.00 mg 葛根素标
准 ,回收量(n=6)为 1.98 ,2.98 ,3.99 mg ,回收率为
99.0%, 99.3%,99.8%。 (下转第 949页)
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汤富彬等:固相萃取-高效液相色谱法测定茶叶中有机氮农药残留量
图 1　5种有机氮标准品的液相色谱图
Fig.1　Chromatogram of organonit rogen pest icide s tandards
2.4　方法的回收率和精密度
在不含农药残留的茶叶样品中 ,加混合农药标
准溶液 ,摇匀静置 1 h ,使标准溶液被茶叶充分吸
收 ,按试验方法提取 、净化和测定。用空白基体萃取
液配制标准溶液以补偿基体效应。茶叶空白样品加
农药标准的液相色谱图见图 2(各农药峰号同图 1)。
图 2　茶叶样品添加农药标准的液相色谱图
Fig.2　Chromatog ram of tea sample , w ith addit ion
of pesticide standard s
　　试验结果表明:在 0.10 ～ 2.0 mg ·kg-1之间的
添加水平 ,重复 5次测定 ,计算各种农药平均回收率
和相对标准偏差 , 5 种有机氮农药的平均回收率为
80.1%～ 94.8%之间 , 相对标准偏差在 2.21%～
7.13%之间。
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(上接第 946页)
2.7　样品分析结果
按试验方法对不同产地的葛粉样品进行测定 ,
结果见表 1。
表 1　样品中葛根素的测定结果(n=6)
Tab.1　Contents of puerarin found in samples
样品
S ample
产地
Place of
production
测得值
Am′t of
puerarin found
w/ %
RSD
/ %
益阳葛粉 湖南 0.13 0.92
野生葛粉 福建 1.58 0.22
野生葛根粉 桂林 1.55 0.36
葛粉 重庆 0.17 0.61
蒙山葛牌葛粉 山东 0.12 0.75
葛粉保健品 云南 0.24 0.66
测定结果表明:野生葛粉(产地为福建 、桂林)中
葛根素含量比较高 ,野生葛粉的保健功效较好 ,但野
生葛粉不宜一次食用较大量 。
参考文献:
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