全 文 ：2014 年 6 月 第 16 卷 第 6 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jun. 2014 Vol. 16 No. 6
中药工业
△ ［基金项目］ 重庆市教委科学技术研究项目(KJ111803)
* ［通信作者］ 黄静，教授，研究方向:天然药物活性与 NMＲ模式识别;E-mail:txyscu@ 163. com
野葛葛粉与总黄酮连续提取工艺研究
△
谭小燕1，王毅1，2，贾晗1，王立青1，林中翔1，黄静3*
(1. 重庆三峡医药高等专科学校，重庆 万州 404000;
2. 西南交通大学，四川 成都 610031;3. 四川大学华西药学院，四川 成都 610041)
［摘要］ 目的:获得连续提取野葛葛粉和总黄酮的生产工艺。方法:测定野葛提取葛粉前后总黄酮含量变化，
为获得提取葛粉后残渣再提取总黄酮的理论依据;采用正交试验优化总黄酮的提取工艺，最后确定整个连续提取工
艺并进行中试生产验证。结果:野葛提取葛粉后残渣中总黄酮残留量近半，值得进一步提取总黄酮。总黄酮的提取
工艺条件经优化后确定为 8 倍量的 80%乙醇为溶剂，回流提取 1. 5 h，连续提取 3 次。结论:工艺经中试生产验证，
稳定可行，但需进一步优化。
［关键词］ 野葛;葛粉;总黄酮;正交设计;连续提取工艺
Study on Continuous Extraction Technology of Starch and Total Flavonoids from
Pueraria lobata(Willd. )Ohwi
TAN Xiaoyan1，WANG Yi1，2，JIA Han1，WANG Liqing1，LIN Zhongxiang1，HUANG Jing3*
(1. Chongqing Three Gorges Medical College，Chongqing 404000，China;
2. Southwest Jiaotong University，Chengdu 610031，China;
3. West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu 610041，China)
［Abstract］ Objective: To obtain a continuous extraction technology of starch and total
flavonoids. Methods:First，detecting the total flavonoids content changes before and after starch extracted
from P. lobata. To obtain theoretical basis for re-extract residue after extraction starch. Then，use orthogonal
test to optimize the extraction process of total flavonoids. Finally，determine the entire extraction process and
conduct continuous pilot production authentication. Ｒesults:The total flavonoids content nearly 50% in
residue，it is worth to further extract. Optimized extraction conditions of total flavonoids is 8 times solvent of
80% alcohol， reflux extraction 1. 5 hours， repeated 2 times. Conclusion:The production process was
enlarged validated，stability feasible，but need further optimization.
［Key words］ Pueraria lobata(Willd.)Ohwi;Starch;Total Flavonoids;Orthogonal test;Continuous
extraction technology
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2014． 06． 012
野葛 Pueraria lobata(Willd. )Ohwi为豆科葛属植
物，其干燥块根入药［1］。野葛根富含人体必需的 13
种氨基酸和铁、钙、硒、锌、锗等微量元素［2］，还
含有丰富的黄酮类物质［3］。野葛根既是传统的中药，
又是很好的保健食品，葛根淀粉畅销国内外［4-6］，以
葛根或者有效成分入药的药品也日渐增多，资源市
场需求量大。渝东北山区野葛分布广泛，资源极丰
富，然而该地区目前没有对野葛作任何开发利
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用［7-8］。若能综合开发利用野葛将对山区人民脱贫致
富产生重要意义。然而，目前国内主要对野葛根的
加工局限在只提取葛粉或总黄酮［9-11］，葛粉主要用
于开发一些保健食品，黄酮类有效成分主要用于成
药的生产和粗提取物的出口。对野葛的葛粉和黄酮
类成分进行综合连续提取放大的工艺却鲜有报道。
本研究首先测定野葛提取葛粉前后总黄酮的含量变
化，以确定提取葛粉后是否还有继续提取黄酮类成
分的必要，然后对总黄酮的提取工艺进行优化，最
终确定从野葛中连续提取葛粉与总黄酮的工艺，并
放大中试生产。
1 仪器与材料
1. 1 仪器
METTLEＲ TOLEDO PL1501-S 电子秤 ［梅特勒 －
托利多仪器(上海)有限公司］，DHG-9140A 型电热
恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)，HX-
500A型高速中药粉碎机(浙江省永康市溪岸五金药
具厂)，200 型多功能提取罐(长沙药用机械厂)，
LD25-2 低速自动离心机、U-2800 分光光度计
(UV2300)、特殊减压抽滤装置(四川大学华西药学
院天然药物系自主设计)。
1. 2 材料
95%乙醇(分析纯)，葛根素对照品(中国食品
药品检定研究院，批号:110753-200912)。
野葛采自渝东北开县谭家乡山区。于 2011 年 8
月、12 月，2012 年 1 月、4 月的每月 9 日(或前后 2
日)选取生长年限一致、粗细相近的野葛根采挖，然
后洗净泥沙，切成 2 ～ 3 mm薄片，自然干燥。
2 方法与结果
作者通过前期对渝东北山区野葛葛粉和总黄酮
含量动态变化测定，已知该地区野葛的葛粉含量在
8. 9% ～25. 3%，总黄酮含量约 2% ～9%，并建立了
总黄酮含量测定的方法［12］。为了解野葛提取葛粉后
残渣是否有再提取利用的必要，须先搞清楚样本提
取葛粉前后总黄酮含量的变化。
2. 1 野葛提取葛粉前后总黄酮含量变化测定
前期对渝东北山区野葛葛粉和总黄酮含量动态变
化研究中，已建立的总黄酮含量测定标准曲线线性回
归方程为 Y =74. 288X +0. 009 1，r =0. 999 5［12］。本次
选择了 4、8、12 月的野葛样本，各称取 1 kg，用锤
子压扁成细丝而不成粉(防止粉碎成粉末后水沉降葛
粉时粉末混在其中)，加入 8 倍量水浸泡 1 h，洗涤，
过滤，连续重复洗涤滤渣 3 次，得滤渣，将滤渣
45 ℃恒温烘烤 6 h 后得干燥滤渣。各精密称取残渣
2 g，按照之前研究的方法测定 4、8、12 月份采集野
葛总黄酮的含量。
野葛提取葛粉前后总黄酮含量见表 1。根据测
量数据显示，无论提取葛粉前总黄酮含量多高，提
取葛粉后残渣中总黄酮含量只减少约 50%，表明残
渣中还含有大量黄酮类化合物，有必要对残渣中的
黄酮类成分再提取利用，而目前一些葛粉加工企业
只提取葛粉，丢掉残渣，实属浪费资源。
表 1 野葛提取葛粉前后总黄酮含量
样本采集时间 /年-月
总黄酮质量分数 /%
提取葛粉前 提取葛粉后
2011-08 6. 31 2. 86
2011-12 11. 60 7. 67
2012-04 2. 13 0. 98
2. 2 野葛总黄酮提取工艺优化
2. 2. 1 平行试验考察总黄酮提取方式 将 1 月份采集
的野葛样本粉碎成粉末，分别精密称取 2 g 置 250
mL圆底烧瓶中，共 3 份，各加 70%乙醇 100 mL，
第 1 份采取恒温 80 ℃回流 0. 5 h，第 2 份采取超声
0. 5 h，第 3 份采取温浸 1 h，再过滤得滤液，每份
再重复提取 2 次后，分别合并滤液，将滤液浓缩至
干，真空干燥后称量，计算提取率。结果回流提取
率为 11. 6%，超声提取率为 9. 5%，温浸提取率为
9. 0%。因此总黄酮提取方式选择提取率最高的回流
提取。
2. 2. 2 正交试验优化总黄酮提取工艺 采用 L9(3
4)
正交表进行试验，以野葛总黄酮提取率为指标，考
察溶剂乙醇的浓度(A)、提取时间(B)、提取溶剂
用量(C)3 种因素对提取结果的影响，因素水平见
表 2。
表 2 葛根总黄酮提取正交试验因素水平表
水平 A乙醇浓度 /% B提取时间 /h C溶剂用量 /倍
1 70 0. 5 5
2 80 1. 5 8
3 90 3 12
据文献报道［13］，条件一定时，温度越高总黄酮
提取率越高，但到达 70 ℃之后变化不明显。常压下
溶剂系统在 70 ～ 80 ℃ 沸腾，故本实验温度选择
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80 ℃，回流提取，其他参照表 2 安排试验，每次实
验重复 3 次，将所得提取液按照上述方法测定总黄
酮含量，计算总黄酮提取率，结果见表 3，方差分
析见表 4。
表 3 葛根总黄酮提取正交试验
编号 A B C D(误差) 总黄酮提取率 /%
1 1 1 1 1 10. 3
2 1 2 2 2 11. 2
3 1 3 3 3 10. 6
4 2 1 2 3 11. 5
5 2 2 3 1 11. 6
6 2 3 1 2 11. 3
7 3 1 3 2 10. 5
8 3 2 1 3 11. 1
9 3 3 2 1 10. 9
K1 10. 70 10. 76 10. 90
K2 11. 46 11. 30 11. 20
K3 10. 83 10. 93 10. 90
Ｒ 0. 76 0. 54 0. 30
表 4 葛根总黄酮提取方差分析
因素 偏差平方和 n 均方 F P
A 1. 00 2 0. 50 37. 75 0. 026
B 0. 44 2 0. 22 16. 75 0. 056
C 0. 18 2 0. 09 6. 75 0. 129
误差 0. 04 2 0. 02
总和 1. 66 8
注:F0. 05(2，2)= 19. 0
根据表 3 的正交试验结果直观分析发现，对总
黄酮提取率的影响顺序是 A ＞ B ＞ C，表 4 方差分析
可知因素 A(乙醇浓度)对总黄酮的提取率影响具有
统计学意义，是主要影响因素。因此，确定最佳组
合工艺为 A2B2C2，即 8 倍量的 80%乙醇为溶剂，回
流提取 1. 5 h，为提取总黄酮的最佳工艺条件。按此
条件进行 3 次重复验证实验，得其提取率为
11. 78%、11. 72%、11. 75%，与正交试验 5 号结果
相近，重现性良好，工艺稳定可行。
2. 3 野葛葛粉和总黄酮连续提取工艺确定
根据文献报道［14-16］、民间经验总结与 2. 2. 2 实
验工艺的优化，通过中试放大验证，最终确定了连
续提取工艺流程。首先将采挖的新鲜野葛由传送带
送至清洗池清洗泥沙(废水需经沉降处理后循环使
用)，再将洗净的野葛传至粉碎机粉碎，再进入磨浆
机加 2 倍量清水磨浆，浆液直接通过筛分机(80 ～
100 目筛)过滤，浆液进入沉降池沉降，完全沉降
后，放出上层水液，再用 2 倍体积清水搅匀，再沉
降，漂洗 3 次后，得葛粉沉淀，将葛粉取出晒干或
60 ℃烘干即可;过滤后的滤渣进入恒温 45 ℃干燥
房干燥 6 h，再加入到多功能提取罐，加 8 倍量 80%
乙醇回流提取 1. 5 h，连续提取 3 次，浓缩提取液得
总黄酮浸膏，真空干燥得野葛总黄酮粉末。
3 讨论
提取葛粉后残渣中总黄酮含量只减少约 50%，
表明残渣中还含有大量黄酮类化合物，有必要对残
渣中的黄酮类成分再提取利用。提取葛粉前后总黄
酮含量减少部分应存在于提取的葛粉中，证明葛粉
中确实含有丰富的黄酮类化合物，具有相应的保健
作用，与市场产品宣传相符。
通过采用正交试验设计法对总黄酮的提取工艺
进行了优化，获得了提取葛根中总黄酮的最优提取
工艺，并进行了重复验证和中试放大，结果较为满
意。但对于葛粉的提取基本采用传统工业提取葛根
淀粉工艺，与传统红薯淀粉、土豆淀粉的提取相似，
此工艺生产运用历史悠久，故未做该工艺考察。
综合连续提取葛粉和总黄酮工艺首次在渝东北
地区提出并实施，此工艺简单，易于在山区资源地
带建小工厂用于生产，实用性强，能最大限度开发
利用当地野葛资源，推动当地中药材产业发展，带
领山区农民致富。但目前仍存在一些问题需解决，
例如:在大量提取葛粉部分如何处理废水;野葛药
材采收时间只有 5 个月，如何统筹安排全年生产;
如何做到可持续利用野葛资源等。
参考文献
［1］ 国家药典委员会． 中国药典［S］． 一部． 北京:中国医药
科技出版社，2010:312-313．
［2］ 中国预防医学科学院营养与食品研究所． 食物成分表
［M］．北京:人民卫生出版社，1992:287．
［3］ 范淑英，吴才君．野葛主要营养和药用成分的分析［J］．
江西农业大学学报，1998，20(4):460-462．
［4］ Wing-Ming Keung． Biochemical Studies of a New Class of
Alcohol Dehhyrogenase Inhibitors from Ｒadix puerariae［J］．
Alcoholismc:linicaanld experimentarlf search，17(6):1254-
1256，1993．
(下转第 509 页)
·774·
2014 年 6 月 第 16 卷 第 6 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jun. 2014 Vol. 16 No. 6
(5):728-730．
［26］刘文哲，王自芬． 喜树幼枝的喜树碱积累及其组织内定
位［J］． 植物生理与分子生物学学报，2004，30(4):
405-412．
［27］杜亚填，周朴华，许建宇，等． 组织培养和 HPLC 法研究
红豆杉生物合成紫杉醇的组织化学定位［J］．生物技术，
2005，15(4):45-48．
［28］刘文哲，张爱新． 大黄蒽醌类化合物的组织化学定位研
究［J］．西北植物学报，2000，20(6):1082-1085，T007．
［29］王贵智，杨军，章英才．唐古特大黄茎蒽醌类化合物组织
化学定位的研究［J］． 农业科学研究，2010，31(4):56-
58，112．
［30］谭凯丽，廖海民． 何首乌营养器官的解剖学与蒽醌类物
质组织化学研究［J］． 贵州农业科学，2010，38(2):
32-35．
［31］沈宗根，吕洪飞，胡正海．芦荟属植物叶内蒽醌类物质的
组织化学定位研究［J］． 西北植物学报，2002，22(6):
T001-T002．
［32］穆靖，袁强，吴秀菊．北细辛(Asarum heterotropoides)营养
器官的形态结构及其挥发油的组织化学定位［J］．东北
农业大学学报，2009，40(2):51-56．
［33］殷奎德，黄海．拟南芥叶片超氧自由基的组织化学定位
［J］．生物学杂志，2003，20(2):41-44．
［34］吕洪飞，刘文哲，胡正海．元宝草的分泌结构与其次生产
物的研究［J］．西北植物学报，1999，19(6):111-115．
［35］包英华，白音，石海英．金钗石斛多糖的组织化学定位研
究［J］．时珍国医国药，2012，23(12):3026-3028．
［36］张莹，陈建伟，徐建亚，等． 明党参中香豆素成分的组织
定位、分布和荧光相对定量研究［J］． 时珍国医国药，
2011，22(3):625-627．
［37］李鹏，宁熙平，吴鸿．紫锥菊药用部位的结构及其与多酚
类化合物积累的关系［J］．中草药，2007，38(4):606-610．
(收稿日期 2013-07-29
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
)
(上接第 477 页)
［5］ 杜先锋．葛根的开发研究和综合利用［J］．食品研究与开
发，1998，(1):49-50．
［6］ 毛富春，赵伯善．野生葛藤的研究利用现状及其开发前
景［J］．西北林学院学报，1995，10(3):88-92．
［7］ 《万县中草药》编写组．万县中草药［M］． 1977:928-929．
［8］ 沈力．三峡中草药资源［M］． 北京:中国中医药出版社，
2012:245．
［9］ 邵兰兰，赵燕．葛根异黄酮、淀粉的提取及葛产品开发研
究进展［J］．食品工业科技，2012，33(6):452-455．
［10］野葛粉保健食品的加工方法［J］． 中国农村小康科技，
2002，(10):34-35．
［11］陈莉华，张艳勤，杨祖贤，等． 湘西野生葛根系列深加工
产品的制作工艺［J］． 湖南农业科学，2010，(13):102-
105，109．
［12］谭小燕，李达斌，林中翔，等． 渝东北山区野葛中葛粉与
总黄酮含量动态变化研究［J］．中国医药导报，2014，11
(6):87-89．
［13］甘琳，周芳，张越非，等． 葛根总黄酮提取工艺的比较
［J］．时珍国医国药，2010，21(4):929-931．
［14］吴艳芳，王新胜． 野葛与粉葛总黄酮提取方法的比较
［J］．中国现代中药，2011，13(3):38-39．
［15］范淑英，吴才君．江西野葛种质资源的收集和研究［J］．
江西农业大学学报(自然科学版)，2003，25(1):27-29．
［16］黄银秀，谢果．用正交试验优选葛根黄酮的提取工艺研
究［J］．中国现代临床医学杂志，2006，5(3):1．
(收稿日期 2013-12-03)
·905·