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野生山黄皮果中氨基酸的测定研究



全 文 :中 国 酿 造
2011年 第 12期
总第 237期
山黄皮俗称鸡皮果,又名细叶黄皮,学名Clausena
indica(Datz). Oliv为芸香科柑桔亚科黄皮属多年生常绿
大灌木或小乔木,主产于我国广西西南部、云南南部、广
东新会及越南北部和菲律宾[1]。山黄皮为珍稀佳果,其果
肉味酸甜可口,6-7月成熟,为夏令佳果,果实具有怡人香
气,2001年北京中国国际农业博览会上,山黄皮果被评为
名牌产品,在芸香科水果中独具一格,品味独特,深受人
们的喜爱[2]。它的果皮、果肉均可食用,在药用方面,果实
可助食消暑、消积去滞、祛痰化气、疏通肠胃;枝叶可人
药,有引气、健胃、止痛、跌打刀伤、消风肿、去疳积等功能,
主治感冒发热、疟疾、胃痛、水肿、风湿性关节炎。外用治
骨折、扭挫伤、湿疹、树皮可用作消肿、去疳积[3]。常用于肉
类烹饪调料及加工成果皮干、果酱、果脯、果汁饮料等。
随着人们对绿色产品、天然产品、无污染产品需求的
日益增加,山黄皮果品的深加工将得到进一步开发,市场
将越来越宽广,价格也会因为市场需求的增加而提高。它
作为一种极具发展前景的南亚热带果树,已经引起了有关
部门的重视。本研究采摘在广西区内不同地域内种植的野
生山黄皮鲜果,使用氨基酸自动分析仪分析山黄皮果果皮,
果肉中各种游离氨基酸及水解氨基酸的组成,为野生山黄
皮的开发利用,提升药用功能奠定基础。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 野生山黄皮
采自广西龙州、大新、宁明等地。
1.1.2 实验试剂
18种氨基酸混合标准液(sigma公司),γ-氨基丁酸标准
品(sigma公司),色氨酸标准品(sigma公司),其他化学试
均剂采用国产分析纯试剂。
1.1.3 实验设备
L-8800日立自动氨基酸分析仪。
1.2 实验方法
样品制备:(1)取野生山黄皮果,将果肉,果皮分别匀
浆,称取一定质量匀浆液,加入适量8%磺基水杨酸,定容
至50mL,离心取上清液过0.45μm微孔滤膜,作为测定山
黄皮果游离氨基酸的样品试液备用上机。
(2)取野生山黄皮果,将果肉,果皮分别匀浆,称取一定
质量匀浆液于安瓿管中,加入适量6mol/L HCl溶液,抽真空
封管,放置于112℃烘箱中水解24h,取出,水浴蒸干残留的
酸,用去离子水定容至适当体积,过0.45μm微孔滤膜,作
收稿日期:2011-09-07
基金项目:广西科学研究与技术开发计划应用基础研究专项(桂科自0832181)
作者简介:杨益林(1964-),男,广西龙州人,高级工程师,从事食品营养物质检测工作。
野生山黄皮果中氨基酸的测定研究
杨益林,黄 艳
(广西分析测试中心,广西 南宁 530022)
摘 要:用氨基酸自动分析仪测定了野生山黄皮果果皮、果肉中各种游离氨基酸及水解氨基酸的组成。结果表明:野生山黄皮果果
皮,果肉中含有丰富的门冬氨酸,γ-氨基丁酸,丙氨酸等氨基酸,其中果肉中含人体必需氨基酸的含量占游离氨基酸总量3.46%,水解
氨基酸总量的12.75%;门冬氨酸的含量占游离氨基酸总量19.12%,水解氨基酸总量的31.76%;丙氨酸的含量占游离氨基酸总量
41.92%,水解氨基酸总量的19.79%;γ-氨基丁酸的含量占游离氨基酸总量18.78%。果皮中含人体必需氨基酸的含量占游离氨基酸总
量18.22%,水解氨基酸总量的18.85%;门冬氨酸的含量占游离氨基酸总量16.53%,水解氨基酸总量的17.40%;丙氨酸的含量占游离
氨基酸总量32.64%,水解氨基酸总量的11.46%;γ-氨基丁酸的含量占游离氨基酸总量29.48%。
关 键 词:野生山黄皮;丙氨酸;γ-氨基丁酸;天门冬氨酸
中图分类号:O657.7 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2011)12-0163-02
Analysis of amino acids in the fruit of Clausena indica (Datz). Oliv.
YANG Yilin, HUANG Yan
(Guangxi Center of Analysis and Test Research, Nanning 530022, China)
Abstract:The determination of free amino acids and hydrolyzed amino acids in the fruit of Clausena indica(Datz). Oliv. was conducted by automatic
amino acid analyzer. The results showed that Clausena indica (Datz). Oliv. Contained 18 kinds of amino acids. The essential amino acids in fruit pulp
were 3.46% of the tota1 free amino acid and 12.75% of the total hydrolyzed amino acids,it contained 19.12%, 31.76% Aspartic acid (Asp) in the
tota1 free amino acid and the total hydrolyzed amino acids; Alanine (Ala) in were 41.92% of the tota1 free amino acid and 19.79% of the total
hydrolyzed amino acids; 18.78% γ-GABA by fruit pule. The essential amino acids in fruit peel were18.22% of the tota1 free amino acid and 18.85%
of the total hydrolyzed amino acids,it contained 16.53%, 17.40% Aspartic acid (Asp) in the tota1 free amino acid and the total hydrolyzed amino
acids; Alanine (Ala) in were 32.64% of the tota1 free amino acid and11.46% of the total hydrolyzed amino acids; 29.48% γ-GABA by fruit peel.
Key words:Clausena indica (Datz). Oliv.; alanine;γ-GABA; aspartic acid
分析与检测 163· ·
2011 No.12
Serial No.237 China Brewing
为测定山黄皮果水解氨基酸的样品试液备用上机。
2 结果
3 讨论
通过分析测试得知(如表1,表2所示),野生山黄皮果
实中含丰富的氨基酸。其中含有人体必需氨基酸,分别为
苏氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸和赖氨酸。
天门冬氨酸是生物体内赖氨酸,苏氨酸,异亮氨酸,蛋
氨酸等氨基酸及嘌呤、嘧啶碱基的合成前体,它可改善心
肌收缩功能,同时降低氧消耗,降低血液中氮和二氧化碳
的量,增强肝脏功能,消除疲劳。实验结果表明,野生山黄
皮果的果肉、果皮中含有丰富的天门冬氨酸,分别占游离,
水解氨基酸总量的19.12%,31.76%和16.53%,17.40%。同
时,在野生山黄皮果实中含有能预防肾结石,协助葡萄糖
代谢,有助缓和低血糖,改善身体能量的丙氨酸,果肉中
含量占游离氨基酸总量的41.92%。另外,野生山黄皮果实
中还富含具有降低血压、改善脑功能、增强记忆及提高肝
肾机能,安神、促进酒精代谢和消臭作用以及高效减肥等
活性的γ-氨基丁酸[4-5],果肉、果皮中平均含量占总游离氨
基酸含量的18.78%及29.48%。野生山黄皮的γ-氨基丁酸含
量在60mg/100g~90mg/100g之间,比一般的水果高出2~3倍,
我们的实验从氨基酸成分组成的角度对野生山黄皮进行
的分析,进一步的剖析了其营养与功效的关系,为进一步深加
工野生山黄皮果,提高山黄皮果及其制品的附加值提供科学
的数据。
表1 野生山黄皮果果肉,果皮中游离氨基酸的测定
Table 1. Free amino acids in the fruit of Clausena indica (Datz).Oliv.
mg/100g
采摘
地点
果实
部位
γ-GABA Ala Asp 必需氨基
酸含量
游离氨基
酸总量
龙州
大新
宁明
果肉
果皮
果肉
果皮
果肉
果皮
62.63
80.15
71.32
88.18
65.69
77.55
149.22
87.05
153.97
95.02
142.37
90.18
68.66
43.08
70.15
44.72
64.42
50.12
8.76
48.93
15.52
55.11
12.55
47.99
344.75
273.46
369.17
281.52
348.93
279.17
表2 野生山黄皮果果肉,果皮中水解氨基酸的测定
Table 2. Hydrolyzed amino acids in the fruit of Clausena indica
(Datz).Oliv. mg/100g
采摘
地点
果实
部位
Ala Asp 必需氨基
酸含量
水解氨基
酸总量
龙州
大新
宁明
果肉
果皮
果肉
果皮
果肉
果皮
143.61
167.01
154.25
181.32
149.75
177.77
226.44
269.52
254.44
258.97
237.46
270.65
93.22
288.46
100.01
301.23
95.12
275.63
700.88
1489.00
867.54
1562.75
693.21
1539.53
图1 野生山黄皮果果肉中游离氨基酸图谱
Figure 1. Tota1 free amino acid in the fruit pulp by Clausena indica
(Datz).Oliv.
图2 野生山黄皮果果肉中水解氨基酸图谱
Figure 2. Tota1 hydrolyzed amino acid in the fruit pulp by
Clausena indica (Datz).Oliv.
图3 野生山黄皮果果皮中游离氨基酸图谱
Figure 3. Tota1 free amino acid in the fruit peel by Clausena indica
(Datz).Oliv.
图4 野生山黄皮果果皮中水解氨基酸图谱
Figure 4. Tota1 hydrolyzed amino acid in the fruit peel by
Clausena indica (Datz).Oliv.
Analysis and Examination164· ·
中 国 酿 造
2011年 第 12期
总第 237期
参考文献:
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业,2005(4):30.
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2002,85(4):11-12.
[3]谭江文,黄永平.山黄皮是石山贫困地区农民增收致富门路一关于龙
州、崇左、扶绥等县发展山黄皮的调查[J].广西林业,2004(4):22.
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术研究进展[J].湖北农学院学报,2004(4):316-320.
收稿日期:2011-07-05
基金项目:白酒工厂废弃物资源化研究(NJ2010-08)
作者简介:叶 翔(1988-),男,汉,江苏宿迁人,硕士,研究方向为白酒酒糟的资源化再利用。
近年来,我国白酒的产量逐步提高,作为其生产的副
产物—酒糟的产量相应的也越来越大,酒糟的综合利用
已成为白酒行业的关注问题。然而,由于酒糟中水量高达
60%以上,且酸度高(pH值为2.5左右),极易腐败,直接干
燥利用能耗大成本高,使得长期以来酒糟的综合利用受到
一定的限制,另外酒糟中还含有大量的不能被牲畜分解利
用的稻壳,直接作为作饲料,既降低了酒糟的营养价值,又
降低其适口性[1]。通过加水形成酒糟悬浮液体系,进一步
分离利用,不仅解决了上面所述的问题,还能对酒糟中的
稻壳进行回收,可谓是一举多得。
早期的氨基酸分析方法一般是采用氨基酸分析仪柱
后衍生测定。但氨基酸分析仪价格昂贵,分析时间长,且只
能用于分析氨基酸,限制了氨基酸分析技术的广泛应用。
目前氨基酸分离方法主要采用离子交换色谱(IEC)、高效
液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)及毛细管电泳(CE)等
仪器,检测方法也包括紫外可见光谱吸收、荧光、化学发光
等。然而,由于多数氨基酸的紫外可见光谱的吸收极弱,自
身又无荧光,因此不能直接检测,通常需要通过衍生化处
理来提高检测的灵敏度和选择性。本文即是通过高效液
相色谱柱前衍生法对酒糟与其分离产物中的氨基酸进行
检测分析[2]。
1 材料与方法
1.1 实验材料
取自江苏洋河酒厂车间当天蒸完的新鲜的酒糟。
1.2 实验仪器
安捷伦液相色谱仪AG1100型。
1.3 实验方法
1.3.1 酒糟分离过程
酒糟与分离的沉淀产物中的氨基酸分析
叶 翔1,冷云伟2,陈 翔3,李 浩3
(1.宿迁市产品质量监督检验所,江苏 宿迁 223800; 2.中国矿业大学 化工学院,江苏 徐州 221116;
3.江苏洋河酒厂股份有限公司,江苏 宿迁 223800)
摘 要:在酒糟中含有相当数量的残留蛋白质与氨基酸,采用高效液相色谱柱前衍生法分别对酒糟与其分离产物沉淀中的氨基酸进
行检测比较分析,发现酒糟中氨基酸含量高达13.45%,而沉淀产物中的氨基酸更是高达22.72%,其含量相比酒糟中提高了近一倍。
通过离心分离后的酒糟的营养价值和经济价值都得到大大地提高。另外,酒糟及其沉淀产物中氨基酸种类十分全面,比例适中,是一
种非常优秀的动物饲料。
关 键 词:酒糟;沉淀产物;氨基酸;高效液相色谱
中图分类号:O657.7 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2011)12-0165-03
Analysis of amino acids in distilled grain and its precipitates
YE Xiang1, LENG Yunwei2, CHEN Xiang3, LI Hao3
(1.Suqian Product Quality Supervision and Testing Institute, Suqian 223800, China; 2.School of Chemical Engineering, China University of
Mining and Technology, Xuzhou 221116, China; 3.Yanghe Distillery Co., Ltd., Suqian 223800, China)
Abstract: Distiller’s grain contains a considerable amount of protein and amino acids. HPLC with pre-column derivatization were used to detect and
analysis amino acids in distillers grain and precipitate. The amino acid content in distiller’s grains was up to 13.45%, and it was 22.72% in precipitate,
which was nearly two times as that in distilled grain. The nutritional value and economic value of distilled grain has been greatly improved by cen-
trifuge. In addition, for distilled grain and its centrifuged precipitate, the types of amino acid were very comprehensive, and the proportion of amino
acids also was moderate, which could be a very good source for animal feeds.
Key words: distilled grain; precipitate; amino acids; HPLC
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
分析与检测 165· ·